Name: Ein chronischer kardialer Ischämie-Modell bei Schweinen, die mit einem Ameroid Constrictor (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Lernen Sie die Platzierung eines Ameroid-Constrictors um die Koronararterie bei Schweinen zur Erzeugung eines chronischen Ischämiemodells. Diese Methode ermöglicht die Evaluation neuer diagnostischer Bildgebungsverfahren und kardiovaskulärer Behandlungsansätze.

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Intramural wurde für dieses Projekt von der Division of Intramural Research, National Heart, Lung and Blood Institute an den National Institutes of Health finanziert. Wir möchten Dr. James Hawkins, Dr. Robert Hoyt, NIH Division of Veterinary Resources und das Personal des Cardiothoracic Chirurgie Forschungsprogramms an den NIH anerkennen.

die hier beschriebenen Verfahren wurden vom National Heart, Lung, und Blut Institut Animal Care und Use Committee an den National Institutes of Health zugelassen und entsprechen den Richtlinien in der öffentlichen Gesundheitspolitik Service auf Humane Pflege und Verwendung von Labortieren, das Tierschutzgesetz und die Anleitung für die Pflege und Verwendung von Labortieren.
 Hinweis: Dieses chirurgische Verfahren soll ein Tiermodell der chronischen myokardialen Ischämie zu produzieren, die verwendet werden können, um Therapien zu entwickeln, die für Patienten mit schweren CAD klinisch relevant sind. Dies kann nicht erreicht werden, mit einem in-vitro- Modell.
 1. Tiere <ol><li>verwenden männliche Yorkshire Schweine wiegen zwischen 12 und 15 kg.</li></ol>
 2. Pre-surgical Verfahren <ol><li>für eine prophylaktische Antibiotika verwenden mündlich zweimal täglich ab 24 h vor der Operation, Amoxicillin und Clavulanat Kalium (15 mg/kg). 
	Hinweis: Diese orale Antibiotika wird vor der Operation, um sicherzustellen, dass das Schwein es zu schlucken und auch sicherstellen, dass sie keine allergische Reaktion auf das Medikament postoperativ haben gestartet.</li>
	<li>Zurückzuhalten, Nahrung und Wasser vom Schwein 12 h vor der Operation.</li>
	<li>Am Tag der Operation zu betäuben das Schwein mit einem Cocktail von Ketamin (33 mg/kg), Midazolam (0,5 - 0,75 mg/kg) und Glykopyrrolat (0,01 mg/kg), intramuskuläre (IM) gegeben.</li>
	<li>20 G intravenöse (IV) Katheter in eine Vene Ohr und Intubation das Tier mit einer 7,0 Fr endotracheal Schlauch. 
	Hinweis: Passen Sie die Größe der IV-Katheter und den Endotrachealtubus entsprechend der Größe des Schweins.</li>
	<li>Das Haar (Rasur) auf der linken Seite des Schweins aus der Schulter, um den Nabel und der Abdominal-Mittellinie an der Wirbelsäule entfernt.</li>
	<li>Verwalten die prophylaktische Antibiotika (Piperacillin und Tazobactam: 100 mg/kg IV) und Schmerzen Medikamente (Buprenorphin nachhaltig Release: 0,2 mg/kg subkutan (SC) oder ein transdermales Fentanyl patch 25-50 µg/h). 
	Hinweis: Die IV-Antibiotikum wird gegeben, weil die Tiere für 12 h vor der Operation nüchtern sind und während dieser Zeit keine der zuvor genannten oralen Antibiotikum erhalten.</li>
	<li>Transportieren das Schwein zum OP-Saal und verbinden den Endotrachealtubus mit der Anästhesiemaschine mit einem passiven Sensor ausgestattet, um die Atemwege Gase zu überwachen. Mechanisch lüften Sie das Schwein ein Tidalvolumen von 10 mL/kg als Ausgangspunkt verwenden und nicht überschreiten Sie einer Atemwegsdruck von 30 cm H 2 O. Set der Atemfrequenz zwischen 10-20 Atemzügen pro Minute (Bpm) und nach Bedarf zu Ende-Gezeiten CO 2 (anpassen PetCO 2) Ebenen zwischen 28 und 35 mm Hg. Maintain die Narkose mit Isofluran (1-3 %) oder Sevofluran (2-5 %).</li>
	<li>Positionieren das Schwein rechts unten auf dem Operationstisch. Fügen Sie alle notwendigen Sensoren zur Überwachung der Körpertemperatur (BT), Elektrokardiogramm (EKG), Pulsoximetrie (SpO 2) usw.</li> <li>Vorbereiten der Operationsstelle über drei wechselnde Peelings mit 2 % Chlorohexidine und 70 % Alkohol (gelten in einem Kreisbewegung beginnend mit Zentrum und Umzug nach außen).</li>
	<li>Drapieren der Operationsstelle mit aseptischen 21.</li>
</ol> 3. Chirurgischen Eingriff <ol><li>aussetzen das Herz durch einen linken Thorakotomie.
	<ol><li>Machen einen Hautschnitt parallel zu der 4 th und 5 th Zwischenrippenmuskeln Raum ca. 8-9 cm in der Länge mit einem Skalpellklinge Nr. 10.</li>
		<li>Schnitt durch die Latissimus Dorsi und Serratus Ventralis Muskeln mit ein paar gebogene Metzenbaumschere und Brown Adson Pinzette. Elektrokauterisation Blutstillung bei Bedarf weiterhin verwenden.</li>
		<li>Geben Sie den pleuralen Raum durch die Zwischenrippenmuskeln zwischen 4 th und 5 th Rippen mit dem Metzenbaum Schere schneiden entlang des vorderen Aspekt der 4 th Rippe. Um die Chance einer versehentlich Beschädigung der Lungenkrebs zu reduzieren, schalten Sie den Ventilator auf dem Ausatmen kurz vor Eintritt in den pleural Raum aus. Sobald der Pleurahöhle verletzt worden ist, schalten Sie den Ventilator.</li>
		<li>Verwenden einen kleine Finochietto Retraktor, um die Rippen auseinander, zu verbreiten das Herz aussetzen.</li>
	</ol></li> <li>Verwendung Debakey Pinzette fassen und heben Sie das Perikard. Potts Schere ein kleines Loch in das Perikard, so dass Luft in den Perikardialraum eindringen zu verwenden. Weiter Schnitt mit der Schere Potts über der Kreuzung der LAD und LCX Arterien.</li>
	<li>Einsatz Babcock Zange, die linken atrial Appendage zurückzuziehen. Mit Debakey und kleinen rechten Winkel Zangen, sezieren die LCX-Arterie aus dem umgebenden Gewebe vor oder proximalen zum stumpfen marginal Zweig 1 St.</li>
	<li>Legen Sie zwei Schiff Schlaufen unter der seziert LCX-Arterie, eine an jedem Ende. Halten Sie eine Größe 3,0 mm Ameroid Constrictor mit kleinen rechten Winkel Zangen und heben Sie die Schiff Schleifen um sanft die LCX-Arterie durch die Öffnung der Würger führen. Sanft Drehen der Würger, sodass die Öffnung nach oben zeigt. Die Schiff-Schleifen zu entfernen. Siehe Abbildung 1. 
	Hinweis: Angemessene Dissektion der Arterie unbedingt Abknicken zu verhindern. Wählen Sie die entsprechende Größe Constrictor für das einzelne Tier. Der entsprechenden Größe Würger wird das Schiff eng umschließen, ohne zunächst Verengung des Schiffes. Hausschweine, die mit einem Gewicht zwischen 12 und 15 kg erfordern Ameroid constrictor Größe 2,5 bis 3,5 mm. Der Speicherort von Ameroid Constrictor auf dem Schiff richtet sich auf die gewünschte Größe des ischämischen Bereich.</li>
	<li>Re ungefähre das Perikard und mit 4: 0 aus Polypropylen Nähte schließen.</li>
	<li>Wiederherstellung den thorakalen Unterdruck durch Einfügen eines 12 Fr Thoraxdrainage oder Äquivalent in den Pleuraraum mit der Ende verlassen zwischen den Schichten des Verschlusses, in der Regel zwei Intercostalneuralgie Leerzeichen nach Thorakotomie Website. 
	Beachten Sie die Lunge für Atelektase vor dem Schließen der Rippen. Wenn Sie irgendwelche Anzeichen von zu niedrigem Druck beachten, wieder aufzublasen Lungen manuell bis zu einem Druck von 30 mm Hg.</li>
	<li>In der Nähe der Brust mit 1 Polypropylen Nähte für die Intercostalneuralgie Schicht, 0 Polypropylen Nahtmaterial für den Serratus und Faszien Schicht, 2-0 Polypropylen Nahtmaterial für die subkutane Schicht und 3-0 aus Polypropylen Nahtmaterial für die Subcuticular Schicht. Heften oder Naht die Haut.</li>
	<li>Zum Jahresende die Thoraxdrainage ein drei-Wege-Absperrhahn beimessen und die Luft in der Brust mit einer 40-60 cc Spritze zu evakuieren, bis eine negative Abdichtung erreicht ist. Rollen Sie das Tier auf die Brustbein oder Gegenteil Seite zur Erleichterung die Luft zu entfernen. Sobald die Brust Unterdruck hält, entfernen Sie die Thoraxdrainage und Naht der Austrittsstelle. Wenn die Tiere einzeln postoperativ untergebracht sind, kann der Schnitt für mehrere Tage bandagiert werden.</li>
</ol> 4. Postoperative <ol><li>nach Schließung, infiltrieren die Schnittführung entlang beider Seiten des Standortes Thorakotomie mit 0,25 % Bupivacain.</li>
	<li>Das Tier aus dem Beatmungsgerät zu entwöhnen und schalten Sie die Narkose. Den Endotrachealtubus zu entfernen, sobald das Tier auf seine eigene Atmung und schlucken.</li>
	<li>Überwachen das Tier, bis es vollständig wiederhergestellt ist (wach und sternale). Es dürfen keine Auffälligkeiten oder Arrhythmien auf dem EKG, die BT sollte 38,7-39,8 ° C SpO 2 sollte 95-100 % und die Atemfrequenz sollte 32-58 Bpm.</li>
	<li>Verwalten Amiodaron (100 mg, oral zweimal am Tag) und Clopidogrel Bisulfate (75 mg oral einmal täglich), Thrombose und Rhythmusstörungen zu verhindern. Fahren Sie mit Amoxicillin und Clavulanat Kalium (15 mg/kg) mündlich zweimal täglich für 10 Tage nach der Operation. Postoperativer Schmerzen erfolgt mit Buprenorphin SR (verzögerter Freisetzung) 0,2 mg/kg. SQ alle drei Tage. Buprenorphin SR werden mit Carprofen (4,4 mg/kg) einmal ergänzt kann und dann (2,2 mg/kg) PO oder IM Angebot.</li>
	<li>Halten alle Bettwäsche und Nahrungssuche Material aus dem Tier heraus &#39; s Gehäuse Fläche, bis der Schnitt vollständig geheilt ist.</li>
</ol>

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</ol>

Die Autoren haben keinen Interessenkonflikt, offen zu legen.

Ameroid constrictor sind weitgehend benutzt worden Tiermodelle der chronischen myokardialen Ischämie, chronischer Herzinfarkt und Herzinsuffizienz5,6,7,9,10 erstellen , 11 , 12 , 13 , 15 , 16 , 17 , 18 , 19 , 22. Obwohl diese Modelle durch den Einsatz von Stents, hydraulische Occluders oder festen Stenose Occluders erstellt werden können, die Prävalenz von Ameroid Gebrauch in der wissenschaftlichen Literatur erlaubt Forschern, die Ergebnisse ihrer Arbeit mit genauer zu vergleichen bisher veröffentlichte Studien5,6,7,9,10,11,12,13, 15 , 16 , 17 , 18 , 19 , 22. ein weiterer Vorteil der Verwendung von Ameroid Constrictor ist, dass das Verfahren relativ einfach ist und von jedermann mit angemessenen chirurgischen Fähigkeiten erfolgreich durchgeführt werden kann und keine spezielle Instrumente erfordert. Die anderen genannten Methoden erfordern höhere technische Fertigkeiten und bei der hydraulischen Occluder erfordert eine intensive postoperative Überwachung aufgrund der externalisierte Gerät6,13.
Die wichtigste Einschränkung der Verwendung von Ameroid Constrictor ist die Variabilität in der Rate der Okklusion9,13. In der Regel haben die meisten Studien mit den Ameroid Constrictor gefunden die Rate der Stenose zu höchsten in den ersten zwei Wochen und dann stufenweise verjüngen, bis vollständige Okklusion23,24auftritt. Ex-Vivo Studien direkt die Messrate der Schließung von Ameroid Lumen haben bestätigt, dass die größte Reduktion Lumen Durchmesser in den ersten zwei Wochen tritt und danach25,26verlangsamt. Jedoch haben diese gleichen Studien zeigten auch, dass rund um Glucose und Protein-Konzentrationen beeinflussen kann, die Rate und die Vollständigkeit des Ameroid Verschlusses, was darauf hindeutet, dass in-Vivo -Bedingungen am ehesten verantwortlich für die Variabilität sind in Ameroid bewertet Okklusion25,26. Andere Forscher haben vorgeschlagen, dass mechanische Trauma, Entzündung, Fibrose und Thrombusbildung verursacht durch den Ameroid-Platzierung-Verfahren selbst zu dieser Variabilität5,6,25 beitragen können . Diesem Fall ist wahrscheinlich der Grund für die vorzeitige Todesfälle und Herzinsuffizienz, die in dieser Studie beobachtet. Es kann nicht genug betont die Bedeutung zart, aber angemessen, Arterie Dissektion auf beiden Seiten von den Ameroid gegen Knicken des Schiffes zu tun sein.
Die richtige Platzierung von Ameroid Constrictor ist entscheidend für einen ischämischen Bereich des Herzens zu entwickeln, die groß genug ist, um zu behandeln ist aber nicht so groß, dass es zum Tode führt. Platzieren die Ameroid Constrictor auf die LCX, bevor der erste stumpf marginal Zweig angezeigt wird, funktioniert am besten in Yorkshire-Schweine. Wie an anderer Stelle berichtet, führte dies zu einer ischämischen Fläche von ca. 25-30 % des linken Ventrikels6. Platzierung der Ameroid niedrigeren resultierte in einem ischämischen Bereich, der für die spezifische Behandlung unzureichend war, die in dieser Studie untersucht wurde.
Beim chirurgischen Eingriff auftretenden Herzrhythmusstörungen sind selten. Verwaltung oral Amiodaron nach der Operation bis zum Ende der Studie, kann verhindern Arrhythmien während der 2 bis 3 Wochen nach der Operation, wenn die Ameroid Weg geschlossen wird. Darüber hinaus sollten Hauswartung und medizinischem Personal besonders wachsam sein fest, jeder Husten während dieser Zeit, die ein frühen Anzeichen für pulmonale Ödeme/Herzinsuffizienz sein könnte.
Im Laufe der Jahre wurde das Design von Ameroid Constrictor auf verbessert. Ameroids sind derzeit in zahlreichen Größen, so dass der Chirurg eine Ameroid auswählen, das entspricht den Durchmesser des Gefäßes zu verschlossen werden. Der äußere Ring der den Ameroid gibt es in Edelstahl, Titan oder Kunststoff. Dies ist besonders wichtig, bei der die betroffenen Herzen mittels MRI Auswertung. Alle Metallteile bewirkt ein Artefakt auf die MRT-Aufnahmen. Titan Ameroids verursachen weniger eines Artefakts als Edelstahl, während Kunststoff keine überhaupt lässt. MRT-Aufnahmen zeigen den Unterschied zwischen einem Ameroid Titan und Kunststoff Ameroid sind in Abbildung 2 und Abbildung 3, bzw. gezeigt. Das Artefakt auf der rechten Seite des Herzens in Abbildung 2 wird durch die Titan-Ring umschließt die Ameroid verursacht. Bis vor kurzem war der Containment-Ring auf den Kunststoff Ameroid zu sperrig, um einer Koronararterie zu platzieren, ohne Abknicken des Schiffes. Die in dieser Studie verwendeten Ameroid Constrictor (siehe Tabelle der Materialien) ist eine viel schlankere Version, die den gleichen Außendurchmesser als Metall Ameroids hat.

Koronare Herzkrankheit (KHK), die myokardiale Ischämie führt, ist die häufigste Ursache für Invalidität, Tod und Kosten im Gesundheitswesen rund um die Welt4 und zurechenbaren für ungefähr 1 aus jeden 3 Todesfälle in den USA1,2 , 3 , 4 , 5 , 6. Zwar gab es viele Fortschritte in der perkutanen und chirurgische Behandlungen, mehr als ein Drittel der Patienten mit CAD sind nicht für diese Behandlungen aufgrund von Alter, Gesundheitszustand oder suboptimale Anatomie4, 5 , 6 , 7. um neue Methoden der bildgebenden Diagnostik oder Behandlung zu bewerten, die Entwicklung von geeigneten Tiermodell ist von entscheidender Bedeutung.
Bei der Entwicklung von einem Tiermodell für eine Krankheit sollte die induzierte Erkrankung eng die anatomischen und physiologischen Merkmale der Erkrankung bei Menschen8,9emulieren. Eines der am weitesten verbreitete Großtiere für Herz-Kreislauf-Studien ist das Schwein. Das Schweineherz entspricht am ehesten das menschliche Herz in Bezug auf Größe, Anatomie und Physiologie3,6. Ähnlich wie das menschliche Herz besitzt das Myokard das Schwein Herz keine umfangreiche Sicherheiten Umlauf-6. Aus diesem Grund die Schweineherz akuten koronaren Okklusion nicht gut vertragen, aber es kann eine allmähliche koronaren Okklusion tolerieren. Wenn eine Koronararterie langsam verdeckt ist, kann es als Modell für chronische myokardiale Ischämie, chronischer Herzinfarkt und Herzinsuffizienz5,6,9,10, verwendet werden 11 , 12 , 13. chronischer Myokardischämie durch Stent-Implantation oder die Platzierung eines hydraulischen Occluder, eine feste Stenose Occluder oder eine Ameroid Constrictor induziert werden kann. Es gibt vor- und Nachteile dieser Methoden die in verschiedenen Publikationen6,9,13 ausführlich beschrieben werden, aber die am häufigsten verwendete Methode ist die Ameroid Platzierung5, 6,10,11.
Die Ameroid Constrictor besteht aus Kasein Material innerhalb einer Edelstahl, Kunststoff oder Titan Ring umhüllt. Einmal um eine Arterie (in der Regel der linken vorderen absteigenden Koronararterie (LAD) oder der linken Koronararterie Zirkumflex (LCX)) gelegt, das Kasein Material absorbiert die umgebende Flüssigkeit verursacht das innere Lumen, nach und nach verengen imitiert die langsame Stenose der eine Arterie und daraus resultierende volle schließlich in Okklusion9,13,14. Dieses Verfahren verwendet allein oder in Verbindung mit anderen Methoden Ergebnisse in einer Region von chronischen myokardialen Ischämie/Infarkt des linken Ventrikels des Herzens, die nützlich für die Entwicklung und Bewertung der neuen bildgebenden Techniken8wurde oder, 10,15, therapeutische Behandlungen7,16,17,18 und chirurgischen Eingriffen19,20.

<table><tbody><tr><td>Anästhesie: Ketamin</td><td>Putney, INC</td><td></td><td>Dosis: 25mg/kg, IM</td></tr><tr><td>Anästhesie: Midazolam</td><td>App Pharmaceuticals</td><td></td><td>Dosis: 0,75mg/kg, IM</td></tr><tr><td>Anästhesie: Isofluran</td><td>Baxter</td><td></td><td>Dosis: 1-3%, INH</td></tr><tr><td>Antibiotika: Amoxicillin und Clavulanat Kalium</td><td>WG Intensivdosis</td><td></td><td>: 15mg/kg, IV</td></tr><tr><td>Antibiotika: Piperacillin und Tazobactam</td><td>Fresenius Kabl</td><td></td><td>Dosis: 100mg/kg, PO</td></tr><tr><td>Analgesie: Buprenorphin (verzögerte Freisetzung)</td><td>Zoo Pharm</td><td></td><td>10mg/ml Flasche, Dosis: 0,2mg/kg SC</td></tr><tr><td>Analgesie: Fentanyl Pflaster</td><td>Mylan</td><td></td><td>Dosis: 25-50mcg/h, TD</td></tr><tr><td>Analgesie: Bupivicain 0,25</td>%<td>Hospira</td><td></td><td>Geben Sie SC an der Inzisionsstelle für die Analgesie</td></tr><tr><td>Alkohol 70%</td><td>Humco</td><td>NDC 0395-4202-28</td><td>zum Schrubben von Operationsstellen</td></tr><tr><td>Chlorhexidin-Peeling 2%</td><td>Vet One</td><td>510083</td><td>zum Schrubben von Operationsstellen</td></tr><tr><td>Datex-Ohmeda Aestiva /5 Anästhesiegerät</td><td>GE Healthcare Madison WI.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anästhesiekreislauf für Kinder</td><td>Westmed</td><td>7-8901</td><td>www.westmedinc.com</td></tr><tr><td>Wasserdecke</td><td>Cincinnati Sub Zero</td><td>Blanketrol 2</td><td></td></tr><tr><td>EKG</td><td>Medtronics- Physiocontrol</td><td>LifePak 20</td><td></td></tr><tr><td>Sauerstoffsättigungsmonitor</td><td>GE Healthcare Madison WI.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Temperaturfühler</td><td>GE Healthcare Madison WI.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Elektrische Kautereinheit</td><td>Valley Labs</td><td>Force 2</td><td>Cut-30 Coag-40</td></tr><tr><td>Endotrachealtubus</td><td>Hudson RCI</td><td>HUD510312</td><td>Hudson Marke - geeignete Größe für Tiere</td></tr><tr><td>Intravenöser Katheter, Größe 20 Gauge</td><td>Santa Cruz Biotechnology, Inc</td><td>SC-360097</td><td>Flüssigkeits- und Arzneimittelverabreichung</td></tr><tr><td>Laktierte Ringer Lösung</td><td>Hospira</td><td>NDC 0409-7953-03</td><td></td></tr><tr><td>Macro IV Tropfset 15 Tropfen/ml</td><td>Hospira</td><td>12672-28</td><td></td></tr><tr><td>OP-Kittel</td><td>Kimberly Clark</td><td>90142</td><td></td></tr><tr><td>Utility-Abdecktücher</td><td>Kimberly Clark</td><td>89731</td><td></td></tr><tr><td>Laparotomie-Abdecktuch für Erwachsene</td><td>Medline</td><td>DYNJP3004</td><td></td></tr><tr><td>Sterile OP-Handschuhe</td><td>Cardinal Health (Allegiance)</td><td>22537-570</td><td>Größe 7 - geeignete Größe verwenden für Nadelmatte für Chirurgen</td></tr><tr><td>- steril</td><td>Medline</td><td>NC30MBR</td><td></td></tr><tr><td>Kauterstift</td><td>Medline</td><td>ESPB 2000</td><td></td></tr><tr><td>Saugschlauch</td><td>Medline</td><td>DYND50251</td><td></td></tr><tr><td>Saugspitze; Yankauer</td><td>Medline</td><td>DYND50130</td><td></td></tr><tr><td>Saugkanister</td><td>Cardinal Health (Allegiance)</td><td>65651-220</td><td></td></tr><tr><td>Ameroid-Konstriktoren Größen 2,5 mm -3,5 mm</td><td>Research Instruments SW, Inc.</td><td>760-764-9411</td><td>Typen: Edelstahl, Titan oder Kunststoff</td></tr><tr><td>3-Wege-Absperrhahn</td><td>Cardinal Health (Allegiance)</td><td>455991</td><td>Für Thoraxdrainage</td></tr><tr><td>Magensonde - 18 Fr</td><td>Cardinal Health (Allegiance)</td><td>DC4418</td><td>Für Thoraxdrainage</td></tr><tr><td>60cc Spritze</td><td>Cardinal Health (Allegiance)</td><td>SY35060LL</td><td>Für Thoraxdrainage</td></tr><tr><td>3cc</td><td>Spritze Cardinal Health (Allegiance)</td><td>SY35003LL</td><td>Für die postoperative Analgesie-Injektion</td></tr><tr><td>Hautklammergerät - 35W</td><td>Ethicon&nbsp; Endo-Surgery</td><td>PMW 35</td><td>Hautverschluss</td></tr><tr><td>Skalpellklinge - Größe #10</td><td>Cardinal Health (Allegiance)</td><td>32295-010</td><td></td></tr><tr><td>Mini Silikon Gefäßschlaufen 1 Pak</td><td>Aspen Surgical</td><td>011001PBX</td><td>zur Anhebung der Zirkumflexarterie zum Anlegen von Ameroid</td></tr><tr><td>1 (Polypropylen) Taper</td><td>Ethicon</td><td>BB #8425H</td><td>geschlossenen Rippen</td></tr><tr><td>2-0 (Polypropylen) Taper</td><td>Ethicon</td><td>SH #8523</td><td>Schließen Sie die Muskelschichten</td></tr><tr><td>4-0 (Polypropylen) Taper</td><td>Ethicon</td><td>BB #8581H</td><td>geschlossenes Perikard</td></tr><tr><td>20 Gauge Nadel</td><td>Cardinal Health (Allegiance)</td><td>81-200219</td> antimikrobielles Tuch für <td>postoperative Analgesie-Injektion</td></tr><tr><td></td><td>3M</td><td>6640EZ</td><td></td></tr><tr><td>Finochietto Rippenretraktor - Säuglingsgröße</td><td>Codman</td><td>50-8057</td><td></td></tr><tr><td>Potts-Smith Schere</td><td>Roboz</td><td>RS-6043</td><td></td></tr><tr><td>Babcock Pinzette</td><td>Roboz</td><td>RS-8022</td><td></td></tr><tr><td>Pean hämostatische Pinzette gebogen</td><td>Codman</td><td>30-4565</td><td></td></tr><tr><td>Skalpellgriff #7</td><td>Codman</td><td>11-5534</td><td></td></tr><tr><td>Brown Adson Pinzette</td><td>Roboz</td><td>RS-5231</td><td></td></tr><tr><td>Debakey Pinzette</td><td>Roboz</td><td>RS-7562</td><td></td></tr><tr><td>Mayo Schere</td><td>Roboz</td><td>RS-6870SC</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum Präparierschere</td><td>Codman</td><td>36-5011</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum Präparierschere</td><td>Codman</td><td>36-5016</td><td></td></tr><tr><td>Mayo-Hegar Nadelhalter</td><td>Codman</td><td>36-2017</td><td></td></tr><tr><td>Ryder Nadelhalter</td><td>Codman</td><td>36-3012</td><td></td></tr><tr><td>Kelly hämostatische Pinzette</td><td>Roboz</td><td>RS-7130</td><td></td></tr><tr><td>Reynolds hämostatische Pinzette</td><td>Roboz</td><td>RS-7211</td><td></td></tr><tr><td>Weitlander Retraktor</td><td>Roboz</td><td>RS-8612</td><td></td></tr><tr><td>Yorkshire Hausschweine</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

ein chronischer kardialer ischämie-modell bei schweinen, die mit einem ameroid constrictor

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

Herz-Kreislauf-Krankheit bleibt die häufigste Todesursache in den Vereinigten Staaten. Es gibt zahlreiche Ansätze zur Behandlung dieser Krankheiten, aber unabhängig von den Ansatz, eine in Vivo Modell ist notwendig, um jede Behandlung zu testen. Das Schwein ist eines der am häufigsten verwendeten großen Tiermodelle für kardiovaskuläre Erkrankungen. Sein Herz ist sehr ähnlich in der Anatomie und Funktion die eines Menschen. Die Ameroid-Platzierung-Technik erstellt einen ischämischen Bereich des Herzens, die viele nützliche Anwendungen an einem Myokardinfarkt Studium hat. Dieses Modell wurde für chirurgische Forschung, pharmazeutische Studien, bildgebende Verfahren und Zelltherapien eingesetzt.
Es gibt mehrere Möglichkeiten des Verursachens eines ischämischen Bereich im Herzen. Jeder hat seine vor- und Nachteile, aber die Platzierung einer Ameroid constrictor bleibt die am weitesten verbreitete Technik. Die wichtigsten Vorteile bei der Verwendung der Ameroid sind die Prävalenz in der bestehenden Forschung, seine Verfügbarkeit in verschiedenen Größen, um Platz für die Anatomie und Größe des Schiffes zu eingeengt werden, die Operation ist ein relativ einfaches Verfahren, und die Post-Operative Überwachung ist minimal, da gibt es keine externen Geräte zu pflegen. Dieser Artikel bietet einen detaillierten Überblick über die richtige Technik für die Platzierung von Ameroid Constrictor.

Nach Analyse der Daten von Ameroid Platzierung Operationen in unserer Einrichtung über einen zwei-Jahres-Zeitraum erhalten, fanden wir die Überlebensrate auf 80 % betragen. Das Verfahren wurde an 25 Yorkshire-Schweine mit einem Gewicht zwischen 12-15 kg durchgeführt. Der 25 Schweine überlebt 20 zum Follow-up-Verfahren, 2 fibrilliert und starb kurz nach schließen, 2 für schwerer Herzinsuffizienz und Lungenödem euthanasiert wurden, und 1 einen Narkose Tod während einer Follow-up-Röntgenbild hatte. Autopsie ergab ein Infarzierte Gebiet der linken Herzkammer in die Tiere, die innerhalb von 24 Stunden des Verfahrens starb. Es wird vermutet, aber konnten nicht bestätigt werden, dass die Arterie aufgrund des Vorhandenseins von den Ameroid seit das Lumen der Ameroid geknickt noch offen war. Die Ameroids von Tieren, die durch Herzinsuffizienz eingeschläfert wurden gewonnen wurden untersucht. 18 Tage gab es insgesamt Verschluss des lumens.
Die Überlebenden Tiere wurden durch Magnet-Resonanz-Tomographie (MRT) bei 28 Tage Post-Ameroid Platzierung zur Messung der Herzfunktion und Größe der ischämischen Fläche abgebildet. Abbildung 2 und Abbildung 3 zeigen die MRT-Aufnahmen ein Schwein mit einem Titan ummantelt Ameroid und ein Schwein mit einem Kunststoff eingehüllte Ameroid bzw. eingeholt. Nach dem Imaging, wurde eine zweite Thorakotomie für eine Zelle Injektion oder Schein-Verfahren durchgeführt. Tiere folgten, so lange wie 16 Wochen Post-Ameroid Platzierung.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56190/56190fig1.jpg"> 
Abbildung 1: Bilder vom Schwein Herz während des Eingriffs Ameroid Platzierung. (A) das Schwein Herz zeigt die LAD, LCX und stumpfen marginal Arterie (OM). (B) Bild der seziert LCX Arterie vor der Ameroid-Platzierung. (C) Bild die richtige Platzierung von Ameroid um die LCX mit der Eröffnung der Ameroid mit Blick nach oben oder vom Herzen. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56190/56190fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56190/56190fig2.jpg"> 
Abbildung 2: MRI-Bild von Schweineherz mit einem Titan ummantelt Ameroid. MRI-Bild von einem Schweineherz, vier Wochen nach der Platzierung einer Titan eingehüllte Ameroid constrictor auf die LCX-Arterie getroffen. Der Pfeil zeigt auf das Artefakt, erstellt von der Titan. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56190/56190fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56190/56190fig3.jpg"> 
Abbildung 3: MRI-Bild von einem Schweineherz mit einem Kunststoff ummantelt Ameroid. MRI-Bild von einem Schweineherz, vier Wochen nach der Platzierung einer Kunststoff eingehüllte Ameroid constrictor auf die LCX-Arterie getroffen. Der Pfeil zeigt auf die Ameroid Constrictor. Kein Artefakt wird beobachtet. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56190/56190fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>

Dieses Protokoll soll die Platzierung eines verzögerten einengenden Geräts (ein Ameroid Constrictor) um einer Koronararterie in einem Schweine-Modell veranschaulicht. Dieses Gerät erzeugt einen ischämischen Bereich des Herzens, die nützlich für das Studium neue bildgebende Diagnoseverfahren und neue Behandlungsmethoden.

Ein chronischer kardialer Ischämie-Modell bei Schweinen, die mit einem Ameroid Constrictor

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Das übergeordnete Ziel dieses chirurgischen Verfahrens zur Implantation einer verzögerten Konstriktorvorrichtung um eine Koronararterie bei einem Schwein besteht darin, ein Modell der kardialen Ischämie zu entwickeln, das für die Entwicklung und Bewertung neuer Behandlungsmethoden von Herzerkrankungen nützlich ist. Diese Methode zur Induktion einer kardialen Ischämie beim Schwein ist im Bereich der kardiovaskulären Forschung von großem Wert, da sie es den Forschern ermöglicht, die Wirksamkeit neuer diagnostischer Bildgebungsverfahren sowie neuer Behandlungsmethoden von Herz-Kreislauf-Erkrankungen zu untersuchen. Der Hauptvorteil des verzögerten Konstriktors liegt darin, dass er in verschiedenen Größen erhältlich ist, um sich der Anatomie und der Größe des zu konstriktierenden Gefäßes anzupassen.Außerdem ist die Operation vergleichsweise einfach, und es ist keine postoperative Wartung des Geräts erforderlich. Die Durchführung der Prozedur zeigen Kenneth Jeffries und Arthur Zetts. Beide sind Mitarbeiter des Animal Surgery and Resources Core.Nachdem das Schwein anesthesiert, katheterisiert und rasiert wurde, bringen Sie es in den Operationssaal. Positionieren Sie es dort auf der rechten Seite liegend auf dem Operationstisch und verbinden Sie die Endotrachealtube mit dem Anästhesiegerät. Ventilieren Sie das Schwein maschinell, beginnend mit einem Atemzugvolumen von 10 Milliliter pro Kilogramm.Danach den Ventilator auf einen Atemwegsdruck von etwa 15 Zentimetern Wassersäule einstellen, jedoch niemals über 30 gehen, da sonst die Lunge beschädigt wird. Die Atemfrequenz zwischen 10 und 20 Atemzügen pro Minute einstellen und nach Bedarf anpassen, um die endtidale Kohlendioxidkonzentration bei 28 bis 35 Millimeter Quecksilber zu halten. Danach das linke Vorderbein nach vorne ausstrecken und am Operationstisch fixieren.Dann befestigen Sie alle erforderlichen Sonden zur Überwachung der Körpertemperatur, des Elektrokardiogramms, der Pulsoximetrie und dergleichen. Bereiten Sie nun die Operationsstelle durch dreimaliges Wechselschrubben mit 2% Chlorhexidin und 70% Alkohol vor. Wenden Sie eine kreisförmige Bewegung an, beginnend in der Mitte und sich nach außen bewegend.Nach der Desinfektion legen Sie die Operationsstelle ab und führen Sie den Eingriff fort. Beginnen Sie die Operation, indem Sie das Herz durch eine linke Thorakotomie freilegen. Führen Sie mit einem Skalpell Nr. 10 einen acht bis neun Zentimeter langen Schnitt parallel zu den vierten und fünften Interkostalräumen durch.Als Nächstes wurden gebogene Metzenbaum-Scheren und Brown-Adson-Stopfer verwendet, um durch den M. latissimus dorsi und den M. serratus ventralis zu schneiden. Gegebenenfalls wurde eine Elektrokauterisierung durchgeführt, um die Blutstillung aufrechtzuerhalten. Anschließend wurde mit der Metzenbaum-Schere entlang des vorderen Abschnitts der vierten Rippe in den Pleuraraum zwischen der vierten und fünften Rippe durch die Interkostalmuskulatur eingedrungen.Kurz vor dem Betreten der Körperhöhle schalten Sie den Ventilator vorübergehend aus. Öffnen Sie dann die Körperhöhle mit einer verringerten Gefahr, versehentlich die Lunge zu beschädigen. Sobald die Körperhöhle geöffnet ist, schalten Sie den Ventilator wieder ein.Verwenden Sie als Nächstes einen kleinen Finochietto-Retraktor, um die Rippen zu spreizen und das Herz freizulegen. Benutzen Sie dann Debakey-Stopfer, um das Perikard zu fassen und anzuheben. Verwenden Sie nun Potts-Scheren, um eine kleine Öffnung im Perikard anzulegen, wodurch Luft in den Perikardraum eindringen kann.Setzen Sie den Schnitt mit der Potts-Schere am Übergang der A. coronaria sinistra (LAD) und der A. circumflexa (LCX) fort. Ziehen Sie dann mit Babcock-Decker den linken Vorhofohr vor. Trennen Sie anschließend mit Debakey-Decker und einer kleinen rechten Winkelklemme die A. circumflexa (LCX) vom umgebenden Gewebe ab, entweder vor oder proximal zum ersten ersten Randsastell (obtusen Marginalast).Als Nächstes platzieren Sie zwei Vessel-Schleifen unter die präparierte LCX-Arterie, jeweils eine an jedem Ende, und bereiten Sie die Positionierung eines Ameroid-Konstriktors vor. Wählen Sie einen Konstriktor, der das Gefäß eng umschließt, ohne das Gefäß anfangs einzuschnüren. Halten Sie den Ameroid-Konstriktor mit kleinen rechtwinkligen Pinzetten fest und heben Sie die Vessel-Schleifen an, um die LCX-Arterie vorsichtig durch die Öffnung des Konstriktors zu führen.Drehen Sie den Konstriktor nun vorsichtig, sodass die Öffnung nach oben zeigt, und entfernen Sie die Gefäßschlaufen. Approximieren Sie anschließend das Perikard erneut und verschließen Sie es mit 4-0-Polypropylen-Nähten. Führen Sie dann drei bis vier Polyester-Nähte der Größe fünf um die Rippen, die später zusammengezogen werden, um die Rippen erneut zu approximieren.Danach, um den negativen intrathorakalen Druck wiederherzustellen, führen Sie einen 12-French-Thoraxdrainageschlauch in den Pleuraraum zwischen den Verschlusslagen ein, in der Regel zwei Interkostalräume kaudal zur Thorakotomiestelle. Bevor Sie fortfahren, überprüfen Sie die Lunge auf Atelektasen. Falls Anzeichen einer Unterinflation festgestellt werden, blähen Sie die Lunge manuell erneut auf, und zwar bis zu einem Druck von 30 Millimeter Quecksilber.Schließen Sie nun die Rippen mit den vorab platzierten Nähten. Anschließend verschließen Sie den Brustkorb mit Polypropylen-Nähten der Stärke 1 für die interkostale Schicht und verwenden Polypropylen-Nähte der Stärke 0 für die Serratus- und fasziale Schicht. Verwenden Sie danach Polypropylen-Nähte der Stärke 2-0 für die subkutane Schicht, gefolgt von Polypropylen-Nähten der Stärke 3-0 für die subkutikulare Schicht.Schließen Sie die Haut abschließend mit Heftklammern oder Naht. Bringen Sie nun einen Dreiweghahn an der Endstelle des Thoraxdrains an und evakuieren Sie die Luft aus dem Thorax mithilfe einer 40 bis 60 ml-Spritze, bis ein Unterdruck erreicht ist. Drehen Sie das Tier anschließend auf das Brustbein oder die gegenüberliegende Seite, um sämtliche Luft aus dem Thoraxraum zu entfernen.Sobald der Brustkorb einen Unterdruck aufrechterhält, legen Sie eine um die Einstichstelle der Thoraxdrainage gelegte Naht aus Polypropylen der Stärke 3-0 in Form einer Zugschnürnaht an. Unter Aufrechterhaltung der Zugspannung an der Zugschnürnaht wird die Drainage unter Beibehaltung des Unterdrucks aus der Brusthöhle gezogen. Anschließend wird die Zugschnürnaht festgezogen und gesichert.Schließlich Bupivacain um die Inzisionsstelle zur langwirksamen lokalen Anästhesie verabreichen. Die Ameroid-Platzierungseingriffe wurden über einen Zeitraum von zwei Jahren an 25 Yorkshire-Schweinen mit einem Gewicht zwischen 12 und 15 Kilogramm durchgeführt. Zwanzig überlebten bis zur Nachuntersuchung, zwei erlitten eine Fibrillation und starben kurz nach der Naht, zwei wurden aufgrund schwerer Herzinsuffizienz und pulmonalem Ödem euthanasiert, und eines verstarb anästhesiebedingt während einer Nachkontroll-Radiographie.Überlebende Tiere erhielten eine zweite Thorakotomie und wurden anschließend bis zu 16 Wochen lang weiterbeobachtet. 28 Tage nach der Platzierung des Ameroid-Rings wurden die Tiere mittels MRT untersucht, um ihre Herzfunktion und die Größe des ischämischen Bereichs zu bestimmen. Der Ameroid-Ring war entweder in Titan oder in Kunststoff eingefasst.Wenn die Technik einmal beherrscht ist, kann sie bei sachgemäßer Durchführung in 60 bis 90 Minuten durchgeführt werden. Bei der Durchführung dieses Verfahrens ist es wichtig, sich daran zu erinnern, eine sorgfältige, aber ausreichende Präparation im Bereich der Arterie vorzunehmen. Eine zu geringe Präparation kann eine Verkrümmung der Arterie verursachen, während eine zu aggressive Gewebemobilisation zu starker Narbenbildung in deren Umgebung führen kann.Nach ihrer Entwicklung bot diese Technik den Forschern auf dem Gebiet der kardiovaskulären Forschung eine Möglichkeit, neue Methoden zur Behandlung von Herzerkrankungen zu erforschen.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

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