Name: Hydrodynamische Nierenbecken Injektion für nicht-virale Expression von Proteinen in der Niere (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-08T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 26 s
Description: Erfahren Sie die hydrodynamische Nierenbeckeninjektion zur nicht-viralen Proteinexpression in der Niere von erwachsenen Mäusen. Diese Methode ermöglicht reproduzierbare, nierenspezifische Transgenexpression für die Nephrologieforschung.

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Ein Career Development Award vom Department of Veterans Affairs [BX002797] L.E.W. und die National Institutes of Health [R01-DK095867] American Heart Association [15GRNT25700209] unterstützt und j.c. Die National Institutes of Health [DK093660], Department of Veterans Affairs [BX002190] und der Vanderbilt-Zentrum für Nierenerkrankungen unterstützt M.H.W. Dieses Material ist das Ergebnis der Arbeit mit Ressourcen und Nutzung der Einrichtungen im VA Tennessee Valley Healthcare System unterstützt.

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</ol>

Die Autoren haben nichts offen zu legen und kein Interessenkonflikt zu erklären.

In diesem Protokoll wird eine robuste Methode zur Erreichung reproduzierbare Genexpression speziell in der Niere beschrieben. In den Händen eines mäßig erfahrener Chirurgen fanden wir den Prozentsatz der Mäuse, die durch diese Technik im Bereich von 50-100 %, je nach Alter der Maus und die Empfindlichkeit der Anzeige des Transgens transfiziert. Das Niveau der Luciferase-gen-Expression war über Hintergrund für mehrere Monate in den Mäusen erhalten PiggyBac Transposons und für mehrere Wochen bei immungeschwächten ...

Die hydrodynamischen Schweif Vene Injektionstechnik ist eine häufig verwendete Möglichkeit, hohe Genexpression in Maus Leber1,2geworden. Die Nieren sind auch durch diese Technik auf einem viel niedrigeren Niveau, etwa 100-fold weniger3transfiziert. Die hydrodynamischen Nierenbecken-Injektion, die hier beschriebenen bietet eine einfache Möglichkeit zu steuern, die Besonderheit der Orgel Ausdruck durch physische Mittel nach den gleichen hydrodynamischen Grundsätzen, die zuvor in Leber,4,5 festgelegt wurden , Muskel-6und andere Organe7,8. Diese Methode transfects Zellen in lebenden Tieren in Vivo durch Druck und Geschwindigkeit zwingen Flüssigkeit enthaltende DNA in die Zellen gleichzeitig induzieren Schäden an das Organ, das schnell gelöst9. Mit etablierten Operationstechniken, um die Niere über eine Flanke Schnitt10 zusammen mit einer einzigen Injektion von Insulin Spritze zu visualisieren, haben wir erfolgreiche Transfektion von verschiedenen Arten von Nierenzellen, vor allem interstitielle Fibroblasten gefunden, Tubuli und sammeln Kanal11. Sezieren von diesen Mäusen haben gezeigt, dass andere Organe nicht auf Ebenen hoch genug, um durch Luciferase bildgebende Techniken11visualisieren transfiziert sind. Da die Technik nicht-viralen ist, gestattet die Verwendung von Plasmid DNA zur Transfektion schnelle und einfache Zubereitung der Reagenzien zur Injektion erforderlich.
Wir haben lokalisierte hydrodynamische Injektionen verwendet, um auszudrücken das Antioxidans Glutathion S-Transferase A4, der Insulin-ähnliche Wachstumsfaktor-1 Rezeptor und das Hormon Erythropoietin in der Niere, alle mit der erwarteten biologischen Wirkungen11, 12 , 13. detaillierte Auswertung der Route der Verwaltung, Einspritzmenge, DNA-Dosierung und Projektträger Wahl wurde durchgeführt11. Darüber hinaus sowohl die PiggyBac Transposon System- und/oder Cyclophosphamid Behandlung unterdrücken die Immunreaktion auf das Transgen haben gezeigt, dass langfristige gen Ausdruck Ergebnisse11zu verbessern. Andere Forscher haben einen renale Vene Ansatz in der Ratte mit Erfolg, eine hohe Transfektion Effizienz für Zeiträume von mehr als einem Monat14verwendet. Genetische Korrektur der Phänotypen imitiert menschlichen Krankheiten werden jedoch in der Regel durchgeführt bei Mäusen zuerst als ein Proof-of-Concept da am meisten Säugetieren genetische Modelle Mausmodellen. Wir renal Vene Injektion zu Nierenbecken Injektion verglichen und festgestellt, dass die Injektion in das Nierenbecken, die renal Vene für die Genexpression (etwa um das zehnfache höher) und überleben11überlegen war. Das Nierenbecken ist eine ideale Route für die Einreise in die Niere, weil es flexibel genug, um Schwankungen in der Urinproduktion zu tolerieren ist und ist oft in der Lage, seine strukturelle Integrität auch wenn während Hydronephrose geweitet. Injektion in das Nierenbecken erlaubt darüber hinaus Zugriff auf die Niere ohne piercing die Niere Kapsel, so dass die eingespritzte Flüssigkeit sichtbar durch die Nieren besser als Intraparenchymal Injektion erhalten bleiben soll. Andere Maus Organe haben keine Route Eintrag nicht das Gefäßsystem, aber der Harn Raum der Niere ist eine ideale Injektionsstelle. Darüber hinaus führte in der renalen Vene Austritt von Blut in die Bauchhöhle. Das gesamte Niere Volumen der Wildtyp Maus Nieren ist geschätzt worden, durch Magnetresonanz-Bildgebung zu ca. 0,2 cm3, so ist das Volumen einer einzelnen Niere annähernd gleich die Menge der Flüssigkeit injiziert durch hydrodynamische Nierenbecken Injektion (100 µL)15. Hier haben wir all die detaillierten Nuancen des hydrodynamischen Nierenbecken Injektion Protokolls, reproduzierbare Transfektion der Niere zu erreichen zur Verfügung.

<table><tbody><tr><td>AnaSed Xylazin</td><td>Patterson Veterinary</td><td>07-808-1947</td><td>Anästhetikum - Nicht kontrollierte Substanz</td></tr><tr><td>BD Insulinspritze 0,5 mL 29G 1/2 Zoll</td><td>Cardinal Health</td><td>309306</td><td>Erforderliche Spritzen</td></tr><tr><td>Buprenex</td><td>Apotheker/Tierarzt</td><td></td><td>Analgesie - Kontrollierte Substanz</td></tr><tr><td>Dynarex Einweg-Handtuchtuch</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>19-310-671</td><td>Über dem Wärmekissen</td></tr><tr><td>platzieren EndoFree Plasmid Maxi Kit</td><td>Qiagen</td><td>12362</td><td>Nur endotoxinfreie Plasmid-DNA verwenden</td></tr><tr><td>Endosafe Gel-Gerinnsel LAL Schnelle Positivkontrolle</td><td>Charles River</td><td>PC200</td><td>Positivkontrolle für Endotoxin-Test</td></tr><tr><td>Endosafe Gel-Clot LAL Schnelltest-Einzeltestfläschchen</td><td>Charles River</td><td>R13500</td><td>Endotoxin-Test</td></tr><tr><td>Extra feine Mikro-Präparierschere</td><td>Roboz Surgical Instrument</td><td>RS-5882</td><td>Chirurgisches Werkzeug</td></tr><tr><td>Fisherbrand Instant Sealing Sterilisationsbeutel - 9"</td> <td>Thermo Fisher Scientific</td><td>01-812-51</td><td>Zum Autoklavieren von chirurgischen Instrumenten</td></tr><tr><td>Gaymar Wärmepumpe</td><td>Paragon Medical</td><td>TP-700</td><td>Wasserzirkulierende Wärmepumpe</td></tr><tr><td>Germinator 500</td><td>Roboz Chirurgisches Instrument</td><td>DS-401</td><td>Zur Wiederverwendung von chirurgischen Instrumenten während der Operation</td></tr><tr><td>Graefe Pinzette</td><td>Roboz Chirurgisches Instrument</td><td>RS-5136</td><td>Chirurgisches Werkzeug</td></tr><tr><td>Graefe Gewebezange</td><td>Roboz Chirurgisches Instrument</td><td>RS-5153</td><td>Chirurgisches Werkzeug</td></tr><tr><td>Halsey Nadelhalter, 5" Länge</td><td>Roboz Chirurgisches Instrument</td><td>RS-7841</td><td>Chirurgisches Werkzeug</td></tr><tr><td>Heizkissen - 15" x 21" - benötigen mindestens 3</td><td>Paragon Medical</td><td>TP22G</td><td>Zur Verwendung mit der Gaymar Wärmepumpe</td></tr><tr><td>IsoFlo (Isoflurane, USP)</td><td>Abbott Animal Health</td><td>5260-04-05</td><td>Für Bildgebung und Euthanasie</td></tr><tr><td>Isotec Isoflurane Delivery System Vaporizer</td><td>Smiths Medical</td><td>VCT3K2</td><td>Für Bildgebung und Euthanasie</td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Apotheker/Tierarzt</td><td></td><td>Anästhetikum - Kontrollierte Substanz</td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimberly-Clark Professional</td><td>34120</td><td>Laborgewebe</td></tr><tr><td>Lebendbild-Software</td><td>Caliper Life Sciences</td><td></td><td>Für die Bildgebung von lebenden Tieren</td></tr><tr><td>Luciferin</td><td>Perkin Elmer</td><td>122796</td><td>Für die Bildgebung von lebenden Tieren</td></tr><tr><td>Nanodrop 2000</td><td>Thermo Scientific</td><td>ND-2000-US-CAN</td><td>Spektralphotometer für die DNA-Messung</td></tr><tr><td>Prevantics Tupfer</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>23-100-110</td><td>Für die Vorbereitung von Hautoperationen</td></tr><tr><td>Prolene 5-0 Nähte Taper 30"</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>NC0256891</td><td>Nicht resorbierbare Nähte für die Haut</td></tr><tr><td>Puralube Marke Opthalmic Salbe</td><td>Patterson Veterinary</td><td>07-888-2572</td><td>Um die Augen während der Operation feucht zu halten</td></tr><tr><td>Trans IT - QR Hydrodynamische Verabreichungslösung</td><td>Mirus Bio</td><td>MIR-5240</td><td>Hydrodynamischer Verabreichungspuffer zur Verdünnung von DNA</td></tr><tr><td>Vicryl 5-0 Nähte J303H</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>NC9816710</td><td>Resorbierbare Nähte für die Muskelschicht</td></tr><tr><td>Wahl Mini Arco Clipper</td><td>Med-Vet International</td><td>8787-1550</td><td>Rasierer für die Hautvorbereitung</td></tr><tr><td>Xenogen IVIS 200</td><td>Caliper Life Sciences</td><td></td><td>Für die Bildgebung lebender Tiere</td></tr></tbody></table>

hydrodynamische nierenbecken injektion für nicht-virale expression von proteinen in der niere

Hydrodynamic Renal Pelvis Injection for Non-viral Expression of Proteins in the Kidney

Hydrodynamische Injektion schafft eine lokale, Hochdruck-Umfeld, um verschiedenen Geweben mit Plasmid-DNA und anderen Substanzen zu transfizieren. Hydrodynamische Schweif Vene Injektion, ist zum Beispiel eine etablierte Methode, die durch die Leber transfiziert werden kann. Dieses Manuskript beschreibt eine Anwendung der hydrodynamischen Prinzipien durch Injektion von der Mausniere direkt mit Plasmid DNA für Nieren-spezifische Genexpression. Mäuse werden betäubt und die Niere durch eine Flanke Inzision, gefolgt von einer schnellen Injektion ein Plasmid DNA-haltigen Lösung direkt in das Nierenbecken ausgesetzt ist. Die Nadel ist für zehn Sekunden gehalten und Ortsbild Einschnitt vernäht. Am nächsten Tag live Animal Imaging, Western-Blot oder Immunohistochemistry, Genexpression assay verwendet werden oder anderen Assays geeignet, um das Transgen Wahl dienen zur Erkennung des Proteins des Interesses. Veröffentlichten Methoden der Genexpression zu verlängern zählen Transposon-vermittelten Transgen Integration und Cyclophosphamid behandelt, um die Immunantwort auf das Transgen hemmen.

Die Chirurgie und Injektion Technik sind einfach durchzuführen, einmal gemeistert, erfordert keine große Ausrüstung oder teuren Materialien. Wenn neue zur Flanke-Schnitt Niere Chirurgie, einen Trainingstag auf mehrere Mäuse geplant für Euthanasie dürfen in denen die Mäuse sind nicht wiederhergestellten nach der Operation, weil der erste Versuch dieser Operation wesentlich länger als normal dauern kann. Alternativ können Forscher mit ähnlichen Techniken vertraut ganz einfach finden. Befolg...

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zum Injizieren von Plasmid DNA in der Mausniere über das Nierenbecken, Transgene Ausdruck speziell in der Niere zu produzieren.

Hydrodynamische Nierenbecken Injektion für nicht-virale Expression von Proteinen in der Niere

Hydrodynamic injection creates a local, high-pressure environment to transfect various tissues with plasmid DNA and other substances. Hydrodynamic tail ...

Das übergeordnete Ziel dieses chirurgischen Eingriffs ist es, die Proteinexpression aus Plasmid-DNA in der adulten Mausniere zu erzeugen. Diese Methode ist ein neues Werkzeug, um Schlüsselfragen in der Nephrologie zu beantworten, z. B. wie sich die Expression eines interessierenden Proteins auf die adulte Niere auswirkt. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie die Proteinexpression auf reproduzierbare Weise erzeugt, insbesondere in der Niere, im Gegensatz zu anderen Methoden, die auch in anderen Organen eine Genexpression erzeugen können.Die visuelle Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da die Injektion des Nierenbeckens eine sorgfältige Exposition erfordert und schnell erfolgen muss, damit die Plasma-DNA in die Zellen gelangen kann. Beginnen Sie mit der Resuspendierung der Plasmid-DNA im hydrodynamischen Verabreichungspuffer. Legen Sie die Maus auf ein wasserumgewälztes Heizkissen, das mit einem blauen Pad bedeckt ist.Rasieren Sie mit einem Rasierer, der für die Pflege von Haustieren entwickelt wurde, die linke Seite des Rückens der Maus von der Schulter bis zum Hinterteil und von der Flanke bis zur Wirbelsäule. Reinigen Sie lose Haare und Ablagerungen und tragen Sie Tiersalbe auf beide Augen auf, um eine Austrocknung der Hornhaut zu verhindern. Bereiten Sie nun 100 Mikroliter mit 10 bis 50 Mikrogramm verdünnter Plasmid-DNA in einer separaten Spritze für jede betäubte Maus vor und stellen Sie sicher, dass keine Luftblasen vorhanden sind.Die Nadel sollte ohne Sicherung dauerhaft befestigt werden. Leeren Sie vor der Operation sterile chirurgische Instrumente, ohne sie auf ein steriles Tablett zu berühren, das auf dem Wärmekissen platziert ist. Nehmen Sie nun die Maus und platzieren Sie sie in einem beleuchteten Sichtfeld.Nehmen Sie 3,15 % Chlorhexidingluconat und 70 % Isopropylalkohol Antiseptika aus der Verpackung und legen Sie sie in die Nähe des Tieres. Tragen Sie sterile OP-Handschuhe und tupfen Sie das Tier von der Einschnittstelle aus dreimal in kreisenden Bewegungen mit einem neuen Chlorhexidinalkohol-Tupfer ab. Suchen Sie nun die Inzisionsstelle.Kneifen Sie die Haut mit einer Pinzette zusammen und schneiden Sie die Hautschicht mit einer Schere etwa einen Zentimeter von der Wirbelsäule entfernt unterhalb des Brustkorbs ab. Machen Sie einen weiteren Zentimeter tiefer in der Muskelschicht. Lokalisieren Sie die Niere und legen Sie sie, ohne sie zu berühren, vorsichtig aus der Bauchhöhle frei, indem Sie mit den Fingern einen gleichmäßigen, sanften Druck auf den Bauch ausüben.Die Niere freizulegen ist manchmal schwierig. Üben Sie sanften Druck auf den Bauch und die Wirbelsäule aus, um eine Schädigung der Milz zu vermeiden. Wenn andere Organe als die Niere austreten, führen Sie diese bei Bedarf mit einer geschlossenen Pinzette vorsichtig in die Körperhöhle zurück.Trennen Sie dann die Niere vorsichtig vom umgebenden Fett, gerade so weit, dass das Nierenbecken sichtbar ist, das als kleiner weißer Punkt zu sehen ist. Nachdem Sie das Nierenbecken sichtbar gemacht haben, drücken Sie mit einer geschlossenen Pinzette auf die rechte Seite der Niere, so dass das Nierenbecken im Blick bleibt. Fassen Sie dann die geladene Insulinspritze in der rechten Hand, indem Sie sie parallel zur Arbeitsfläche halten, und führen Sie die Nadel vorsichtig in das Nierenbecken ein.Sobald die Nadel eingeführt ist, injizieren Sie die Lösung schnell, innerhalb von drei Sekunden. Lassen Sie die Nadel etwa 10 Sekunden lang an Ort und Stelle, um einen Rückfluss der Lösung zu verhindern. Entfernen Sie dann langsam und vorsichtig die Nadel und bringen Sie das Organ wieder in die Bauchhöhle zurück, indem Sie die Inzisionsstelle mit einer geschlossenen Pinzette sanft dehnen.Vernähen Sie nun die Muskelschicht mit resorbierbaren Fünf-O-Nähten und platzieren Sie zwei bis vier unabhängige Knoten. Vernähen Sie die Hautschicht auf ähnliche Weise mit nicht resorbierbaren Nylonnähten mit fünf oder sechs O und setzen Sie zwei bis vier unabhängige Knoten. Um die Transfektionseffizienz zu beurteilen, führen Sie 10 Mikrogramm eines Luziferase-exprimierenden Plasmids in die verdünnte DNA ein, um sie am nächsten Tag zu injizieren, um eine Bildgebung bei lebenden Tieren durchzuführen.Setzen Sie den ersten Käfig mit den Mäusen in die Kammer und verschließen Sie sie. Nach der Betäubung injizieren Sie jeder Maus intraperitoneal 100 Mikroliter aufgetautes Luciferin und notieren Sie die Zeit. Wählen Sie die richtige Benutzer-ID aus und klicken Sie in der oberen Menüleiste auf Akquisition und wählen Sie automatisch speichern zwei aus dem Dropdown-Menü.Initialisieren Sie das System, indem Sie auf Initialisieren klicken. Warten Sie, bis die Initialisierung abgeschlossen ist, und ändern Sie das Sichtfeld auf D, um fünf Mäuse abzubilden. Stellen Sie sicher, dass die Tiere in der gewünschten Reihenfolge platziert sind und dass sie mit dem Rücken zur Kamera zeigen, um die Niere sichtbar zu machen.Drücken Sie dann fünf Minuten nach der Injektion auf Erfassen, um das Bild aufzunehmen. Entfernen Sie die Mäuse nach der Aufnahme aus dem bildgebenden Gerät. Drehen Sie das Gas aus.Reinigen Sie die Kammer, die Nasenkämme und den Bildgebungstisch. Um die Daten zu analysieren, klicken Sie nach dem Klicken auf ROI-Tools auf das Kreissymbol und wählen Sie eines aus dem Dropdown-Menü aus, um den neuen ROI im Bild zu platzieren, wie durch ein rotes Oval mit vier Quadraten um das Symbol herum angezeigt. Um die Größe des ROI anzupassen, platzieren Sie den Cursor über einem roten Quadrat und ziehen Sie, um den violetten Bereich über der injizierten Niere zu umschließen.Klicken Sie nun mit der rechten Maustaste auf diesen ROI und wählen Sie "ROI duplizieren" aus, um den ROI im aktuellen Fenster zu duplizieren und ihn auf die nächste Maus zu verschieben. Nachdem Sie alle ROIs aus dem Menü direkt über dem Bild platziert haben, ändern Sie die Einheiten von Zählungen zu Photonen mit Strahldichte. Erstellen Sie abschließend eine Tabelle mit den Messungen, indem Sie die ROI-Daten aus der Werkzeugpalette exportieren, indem Sie auf ROI-Werkzeuge und dann auf das Bleistiftlinealsymbol klicken.Dargestellt ist die spezifische Genexpression von Reporterplasmiden in der Niere. Allen Mäusen wurde ein pTet-Plasmid injiziert, das eine verstärkte Glühwürmchen-Luziferase exprimierte, während den Mäusen zwei, drei und fünf ebenfalls pEF1-alpha-Tdtomato-Plasmid injiziert wurde, das das rot fluoreszierende Protein tdtomato exprimierte. Im Allgemeinen liegt die Ausstrahlung bei jungen Mäusen innerhalb einer Größenordnung.Es ist möglich, dass einige Mäuse keine nennenswerte Ausstrahlung zeigen, entweder aufgrund einer geringen Transfektionseffizienz oder des Fehlens des Transgens selbst. Die Injektion von hydrodynamischem Puffer dient als Kontrolle. Es wird keine Plasmidexpression beobachtet, wenn nur der hydrodynamische Puffer verabreicht wird.In den ersten Tagen nach der Transfektion wird es wahrscheinlich eine geringe Anzahl von Zellen geben, die positiv für das Transgen gefärbt sind. Diese Zellen sind in Flecken in den Bereichen lokalisiert, die von der Injektionsflüssigkeit infiltriert werden. In diesem Bild stammen die grünen Signale von den proximalen Tubuli, die für Lotus tetragonolobus Agglutinin gefärbt sind, und die roten Signale von den transfizierten Zellen, die das Tdtomato-Reportergen exprimieren.Sobald die Operation gemeistert ist, kann sie in weniger als 10 Minuten durchgeführt werden, aber die Anästhesie braucht Zeit, um sie einzuleiten und sich davon zu erholen. Zwei geschulte Mitarbeiter, die eng zusammenarbeiten, könnten also nur etwa 10 bis 15 Mäuse pro Tag töten. Wenn Sie dieses Verfahren versuchen, ist es wichtig, daran zu denken, junge Mäuse zu verwenden.Die hydrodynamische Technik funktioniert bei älteren fibrotischen Organen nicht so gut. Im Anschluss an dieses Verfahren können andere Methoden durchgeführt werden, wie z. B. die Analyse von Blut-, Urin- und Nierengewebeproben, um die Expression des interessierenden Gens zu beurteilen. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man das Nierenbecken mit Plasmid-DNA injiziert, um eine nierenspezifische Proteinexpression zu erreichen.

hydrodynamic-renal-pelvis-injection-for-non-viral-expression-proteins

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Quelle: Gupta, K. et al. Intrarenale Injektion von Escherichia coli in einem Rattenmodell der Pyelonephritis.  J. Vis. Exp. (2017).Dieses Video demonstriert die intrarenale Injektion von E. coli in das Nierenbecken einer anästhesierten Ratte, um eine lokale Niereninfektion auszulösen, und modelliert eine akute Pyelonephritis. Sie hebt wichtige chirurgische Schritte und aseptische Techniken hervor, die notwendig sind, um ein reproduzierbares In-vivo-Infektionsmodell für die nachgelagerte Analyse...

Intrarenale Injektion von E. coli in das Nierenbecken einer Ratte

Source: Van Lidth de Jeude, et al. A Protocol for Lentiviral Transduction and Downstream Analysis of Intestinal Organoids. J. Vis. Exp. (2015).This video demonstrates the process of producing viral particles through transfection of embryonic kidney cells with plasmid–polyethylenimine complexes, which leads to viral genome expression, particle assembly, and virus collection in the medium.

Polyethylenimine-Mediated Transfection of Embryonic Kidney Cells for Recombinant Virus Production

In diesem Video präsentieren wir das Protokoll für die hydrodynamische Injektion von Plasmiden in das Nierenbecken der Mausniere zur Nukleinsäuretransfektion. Diese Technik ermöglicht die organspezifische Abgabe von Plasmiden, indem sie das Prinzip des hohen hydrostatischen Drucks nutzt, der die Plasmide gewaltsam in die spezifische Stelle treibt, ohne Gewebeverletzungen zu verursachen.

Hydrodynamische Injektion des Nierenbeckens: Eine Technik zur direkten Abgabe von DNA in Nierenzellen des Mausmodells

In diesem Video demonstrieren wir die intrarenale Verabreichung von Medikamenten bei Ratten über die Nierenarterie. Diese Methode ist vorteilhaft bei der Verbesserung des Wirkstoff-Targetings, der Wirkstoffwirksamkeit und der Minimierung der systemischen Toxizität.

Intrarenale Verabreichung von Medikamenten bei Ratten: Eine Methode zur Verabreichung von therapeutischen Arzneimitteln in die Rattenniere durch intraarterielle Injektion

Hier präsentieren wir ein Protokoll zur Verwendung von Schicksalskarten und Abstammungsverfolgungen, um gezielte Injektionen in einzelne Blastomere durchzuführen, aus denen die Niere von Xenopus laevis-Embryonen entsteht.

Technik auf Zielmikroinjektions an die Entwicklungs<em&gt; Xenopus</em&gt; Kidney

Renal Verletzungen von Nephrotoxinen entstehen, die Medikamente im Bereich von Antibiotika zu Chemotherapeutika gehören, können in komplexen Erkrankungen, deren Pathogenese zur Folge bleibt unvollständig verstanden. Dieses Protokoll zeigt, wie Zebrabärbling für Krankheitsmodelle dieser Bedingungen verwendet werden, die zur Identifizierung von renoprotektive Maßnahmen angewendet werden können.

Nephrotoxin Mikroinjektion in Zebrabärbling akuten Nierenschädigung zu Modell

Die Verabreichung von Medikamenten für die Wiederherstellung der Nierenfunktion erfordert die Kontrolle der Lokalisierung und Verteilung der therapeutischen Verbindung. Hier beschreiben wir im Detail eine einfache Technik für intrarenalen Abgabe von Arzneimitteln in Ratten. Dieses Verfahren kann ohne Mortalität und hoher Reproduzierbarkeit leicht durchgeführt werden.

Die intravaskuläre Lieferung von Biologics zur Rattenniere

Dieses Manuskript beschreibt ein chirurgisches Modell der Pyelonephritis bei Ratten unter Verwendung einer direkten intrarenalen Infektion durch Escherichia coli in das Nierenbecken. Das experimentelle Verfahren kann genutzt werden, um die Pathogenese der Pyelonephritis sowie die damit einhergehende Entzündung und Fibrose zu untersuchen.

Intrarenale Injektion von Escherichia coli In einem Rattenmodell der Pyelonephritis

Dieses Manuskript beschreibt eine Methode zur gezielten Abgabe an eine einzelne Niere über einen Katheter, der in der infraroten Bauchaorta in der Maus platziert ist.

Direkte Medikamentenabgabe an die Niere über die Nierenarterie

In dieser Arbeit bringen wir exogene künstlich synthetisierte miRNA-Nachahmungen in die Niere durch Schwanzveneninjektion eines nicht-viralen Vektors und Polyethylenimin-Nanopartikel in verschiedenen Mausmodellen für Nierenerkrankungen. Dies führte zu einer signifikanten Überexpression der Ziel-miRNA in der Niere, was in mehreren Mausmodellen zu einer Hemmung des Fortschreitens der Nierenerkrankung führte.

Abgabe von exogenen künstlich synthetisierten miRNA-Nachahmungen an die Niere unter Verwendung von Polyethylenimin-Nanopartikeln in verschiedenen Mausmodellen für Nierenerkrankungen

Dieser Bericht beschreibt die lokalisierte Injektionsmethode von AAV-Vektoren über das Nierenbecken für einen effektiven und sicheren Gentransfer in die Mausniere.

Effektive und sichere Genabgabe an die Mausniere durch langsame retrograde Injektion von Adeno-assoziierten Virusvektoren in das Nierenbecken

Erfahren Sie die hydrodynamische Nierenbeckeninjektion zur nicht-viralen Proteinexpression in der Niere von erwachsenen Mäusen. Diese Methode ermöglicht reproduzierbare, nierenspezifische Transgenexpression für die Nephrologieforschung.

Hydrodynamische Nierenbecken Injektion für nicht-virale Expression von Proteinen in der Niere

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