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DOI: 10.3791/56324-v
Lauren E. Woodard1,2,3, Richard C. Welch2, Felisha M. Williams2, Wentian Luo2, Jizhong Cheng3, Matthew H. Wilson1,2,3
1Department of Veterans Affairs,Tennessee Valley Healthcare System, 2Departments of Medicine and Pharmacology,Vanderbilt University Medical Center, 3Department of Medicine,Baylor University College of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol describes a method to inject plasmid DNA into the mouse kidney via the renal pelvis to produce transgene expression specifically in the kidney. This technique allows for reproducible protein expression in the adult mouse kidney, addressing key questions in nephrology.
Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zum Injizieren von Plasmid DNA in der Mausniere über das Nierenbecken, Transgene Ausdruck speziell in der Niere zu produzieren.
Das übergeordnete Ziel dieses chirurgischen Eingriffs ist es, die Proteinexpression aus Plasmid-DNA in der adulten Mausniere zu erzeugen. Diese Methode ist ein neues Werkzeug, um Schlüsselfragen in der Nephrologie zu beantworten, z. B. wie sich die Expression eines interessierenden Proteins auf die adulte Niere auswirkt. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie die Proteinexpression auf reproduzierbare Weise erzeugt, insbesondere in der Niere, im Gegensatz zu anderen Methoden, die auch in anderen Organen eine Genexpression erzeugen können.
Die visuelle Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da die Injektion des Nierenbeckens eine sorgfältige Exposition erfordert und schnell erfolgen muss, damit die Plasma-DNA in die Zellen gelangen kann. Beginnen Sie mit der Resuspendierung der Plasmid-DNA im hydrodynamischen Verabreichungspuffer. Legen Sie die Maus auf ein wasserumgewälztes Heizkissen, das mit einem blauen Pad bedeckt ist.
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