Re Arterialized Ratte teilweise Leber Transplantation mit einem in Vivo Schiff-orientierte 70 % Hepatektomie

In diesem Artikel wird ein Protokoll vorgestellt, das eine rearterialisierte Leberpartialtransplantation von Ratten beinhaltet. Konkret wurden 70 % der Leber in vivo mit der aktualisierten Technik der gefäßorientierten Hepatektomie reseziert. Die Leberarterie wurde durchgehend rekonstruiert.

Die Manschettentechnik wurde modifiziert, um die Anastomosenzeit der unteren Hohlvene zu verkürzen. Isofluran, gemischt mit null Komma fünf Litern Sauerstoff pro Minute, wurde verwendet, um die Inhalationsanästhesie einzuleiten und aufrechtzuerhalten. Schneiden Sie einen kleinen Querschnitt am Oberbauch.

Verlängern Sie dann den Querschnitt in der Nähe des Rippenrandes am Oberbauch. Kehren Sie um und befestigen Sie die obere Bauchwand an der Schädelseite. Als nächstes kehren Sie den Xiphoid-Prozess auch auf die Schädelseite um.

Schneiden Sie nacheinander das falciforme Band, das Koronarband und ein dreieckiges Band ab. Befreien Sie die linke Zwerchfellvene mit einer Mikrozange vom Zwerchfell. Ligatieren Sie es dann mit Sechs-Null-Seidennähten doppelligatisierend.

Befreien Sie das hepatoösophageale Band und die Arterie. Dann doppelligieren Sie es und teilen Sie es. Legen Sie den ersten Leberhilum der Leber frei.

Präparieren Sie zunächst vorsichtig die hintere Wand des Stammes communis der Pfortader. Ligatieren Sie es dann doppelt und teilen Sie es mit dem entsprechenden Gallengang und der Leberarterie zusammen. Zweitens die Pfortader des rechten Mediumlappens vorsichtig präparieren, doppelligieren und teilen.

Drittens: Doppelte Ligatur und Teilung der Leberarterie und des Gallengangs des rechten Mediumslappens mit Sechs-Null-Seidennähten. Ligustieren Sie die Leber des linken lateralen Lappens mit einer umständlichen Drei-Null-Seidennaht. Entfernen Sie die Lebermasse mit einer Mikroschere über der Ligatur.

Klemmen Sie die linke mediane Lebervene mit einer hämostatischen Zange ein, die entlang der Fissur medianus platziert wird. Entfernen Sie das gesamte Leberparenchym über der Pinzette mit einer Mikroschere. Legen Sie die Piercingnaht unter die Pinzette, die die linke mittlere Lebervene umgibt.

Binden Sie dann einen quadratischen Knoten, um ihn zu ligieren. Platzieren Sie außerdem zwei weitere Piercing-Nähte, um den Rest des Schnitts zu schließen. Platzieren Sie danach eine hämostatische Zange in einem Abstand von zwei bis fünf Zentimetern, um die rechte mittlere Lebervene zu verschließen.

Entfernen Sie sämtliches Leberparenchym oberhalb der Pinzette. Legen Sie die erste Lochnaht, die in das Leberparenchym eindringt, unter die Pinzette, um die mittlere mittlere Lebervene zu umgeben. Binden Sie dann einen quadratischen Knoten, um ihn zu ligieren.

Legen Sie eine zweite Piercingnaht unter die Pinzette, um die mittlere mediane Lebervene zu umgeben. Ligatieren Sie es dann mit der gleichen Methode. Legen Sie zwei weitere Piercing-Nähte unter die hämostatische Zange der Mücke, um den Rest des Schnitts des Mediumslappens mit diesen Piercing-Nähten zu schließen.

Der Reststumpf des Mediumslappens konnte sich über die Hohlvene ausbreiten. Schneiden Sie das Retroperitoneum auf, um die untere Lebervena cava freizulegen. Präparieren und ligieren Sie die rechte Nebennierenvene, die von hinten in die untere Lebervene abfließt.

Befreien Sie die rechte Nierenarterie und die rechte Nierenvene. Führen Sie eine rechte Nephrektomie durch, nachdem Sie die rechte Nierenvene und die rechte Nierenarterie ligiert haben. Mobilisieren Sie den Gallengang communis ab dem ersten Leberhilum mit einer Mikrozange.

Ligatieren Sie dann den gemeinsamen Gallengang am Kammpunkt der polaren Vene und des gemeinsamen Gallengangs. Schneiden Sie einen Querschnitt an der Innenwand des Gallengangs. Setzen Sie einen 22-Gauge-Gallenstent sofort in das Lumen des Gallengangs ein.

Befestigen Sie den Gallenstent mit einer umlaufenden Sechs-Null-Seidennaht. Durchschneiden Sie den gemeinsamen Gallengang zwischen den beiden Sechs-Null-Seidennähten. Befreien Sie die Pylorusvene mit einer Mikrozange, dann doppelligieren und teilen Sie sie.

Als nächstes wird die Milzvene doppelt ligatisiert und auf die gleiche Weise geteilt. Befreien Sie vorsichtig die Arteria hepatica communis und es sind zwei Bifurkationen. Die Gastroduodenalarterie wird mit Sechs-Null-Seidennähten an der Bifurkation der Arteria hepatica communis zur Arteria gastroduodenalis doppelt

Injizieren Sie 50 IE Heparin in einen Milliliter Kochsalzlösung über die Penisvene. Klemmen Sie die untere Lebervena, die Pfortader und die Arteria hepatica communis mit drei gekrümmten Mikro-Klemmen Sie einen kleinen Schnitt an der Innenwand der Pfortader, um einen 22-Gauge-Katheter einzuführen. Übergießen Sie das Leberteiltransplantat mit Kochsalzlösung bei vier Grad Celsius über den Katheter unter einem Druck von 20 Zentimetern Wasser.

Schneiden Sie die Brusthöhle und die intrathorakale Hohlvene mit einer chirurgischen Schere schnell auf, um das Blut abzuleiten und zu vergießen. Verwenden Sie eine Mikroschere, um die linke Zwerchfellvene zwischen den beiden Ligaturen, die zuvor platziert wurden, zu durchtrennen. Als nächstes wird die suprahepatische Hohlvene in der Nähe des Zwerchfells durchtrennt, um die Gefäßbahnen so lange wie möglich zu erhalten. Schneiden Sie die Pfortader auf Höhe der Milzvene ab und durchschneiden Sie die Arteria hepatica communis in der Nähe des ausgewählten Rumpfes.

Schneiden Sie die Nebennierengefäße auf der destillierten Seite der Ligatur ab. Teilen Sie dann die infrahepatische Hohlvene auf Höhe der linken Nierenvene. Ziehen Sie die Pfortadervene durch das Lumen der Manschette, die mit einem 12-Gauge-Katheter hergestellt wurde.

Befestigen Sie vorübergehend den Puffstiel und die Pfortader. Drehen Sie die Wand des Portalgefäßes um, um die Außenfläche der Manschette abzudecken. Befestigen Sie die Gefäßwand und die Manschette mit einer umlaufenden Sechs-Null-Seidennaht.

Setzen Sie die infrahepatische Hohlvenenmanschette auf die gleiche Weise ein. Penetrieren Sie die Gefäßwand der suprahepatischen Hohlvene von außen nach innen mit zwei Sieben-Null-Polypropylen-Nähten entlang der Drei-Uhr- bzw. Neun-Uhr-Richtung. Wiederholen Sie die Verfahren in 6.1, 6.2 und 6.7 am Empfänger, mit Ausnahme der rechten Nephrektomie.

Mobilisieren, verdoppeln und teilen Sie den Gallengang communis bei der ersten Bifurkation im Leberhilum. Die Leberarterie mit einer Mikroschere transektieren und vorbereiten, anschließend eine Doppelligatur mit einer Sechs-Null-Seidennaht. Ziehen Sie die Empfängerleber mit zwei Wattestäbchen auf die linke Seite zurück.

Schneiden Sie das Band im hinteren Teil der Leber von der suprahepatischen Hohlvene bis zur rechten Nebennierenvene ab. Führen Sie ein Gummiband durch den Rückenraum der suprahepatischen Hohlvene ein. Kreuzklemmen Sie die infrahepatische Hohlvene über der Nierenvene mit einer Gefäßklemme und die Pfortader über der Pylorusvene.

die suprahepatische Hohlvene und das Zwerchfell und klemmen die Teile des Zwerchfells zusammen mit der intrathorakalen Hohlvene. Schneiden Sie die Gefäßwand der suprahepatischen Hohlvene vorsichtig entlang des oberen Randes des Leberparenchyms ein, um die Gefäßwand so lange wie möglich zu erhalten. Die Pfortader an der ersten Bifurkation im hepatischen Hilum mit einer Mikroschere durchschneiden.

Durchschneiden Sie die untere Hohlvene und das Parenchym des rechten unteren Lappens und nicht in der Gefäßwand, um einen Abschnitt des umlaufenden Leberparenchyms um die Hohlvene herum zu belassen. Halten Sie die Schneide im rechten unteren Lappen in einem Abstand von vier Millimetern zur unteren Lebervene. Platzieren Sie das partielle Lebertransplantat isotopisch in der Bauchhöhle.

Die Gefäßwand der suprahepatischen Hohlvene wird von innen nach außen in Drei-Uhr- und Neun-Uhr-Richtung mit zwei prästaten Stay-Nähten durchstochen. Ziehen Sie die Stay-Nähte nach rechts und links, nachdem Sie sie mit ihren eigenen Enden zu einem Knoten gebunden haben. Die suprahepatische Hohlvene von außen nach innen, nahe dem Knoten in Drei-Uhr-Richtung, durchstechen.

Anastomosieren Sie die hintere Wand der suprahepatischen Hohlvene, indem Sie die Naht innerhalb des Gefäßlumens von der Drei-Uhr-Richtung bis zur Neun-Uhr-Richtung führen. An der Ecke der Neun-Uhr-Richtung stechen Sie die Gefäßwand von innen nach außen, nahe dem Knoten, um die Nadel aus dem Gefäßlumen einzuführen. Verwenden Sie diese Naht, um die Innenwand mit einer Laufnaht außerhalb des Gefäßlumens von der Neun-Uhr-Richtung in die Drei-Richtung-Richtung zu anastomosieren.

Zum Schluss binden Sie die Naht dreimal mit dem eigenen Ende zusammen. Platzieren Sie zwei Sieben-Null-Stay-Nähte aus Polypropylen am Ende der Pfortader des Empfängers, gemäß der Beschreibung in sieben Komma zwei. Ziehen Sie zwei Stay-Nähte in die entgegengesetzte Richtung, um die Gefäßwand zu verlängern.

Injizieren Sie etwa einen Milliliter Kochsalzlösung in das Gefäßlumen der Pfortader, um Luftblasen herauszudrücken. Führen Sie die Pfortadermanschette beim Öffnen mit einer Mikrozange schnell in das Gefäßlumen der Pfortader im Empfänger ein. Sichern Sie die Manschettenanastomose mit einer umlaufenden Sechs-Null-Seidennaht.

Lösen Sie dann nacheinander die Klammern an der suprahepatischen Hohlvene und der Pfortader. Injizieren Sie einen Milliliter Kochsalzlösung in das Gefäßlumen, um Luftblasen herauszudrücken. Führen Sie die Manschette in das zylindrische Gefäßlumen der unteren Lebervena cava ein.

Befestigen Sie die Manschettenanastomose schnell mit einer Sechs-Null-Seidennaht. Lösen Sie die beiden Gefäßklemmen in der unteren Lebervena, um die Profusion wieder aufzunehmen. Schneiden Sie dann das umgebende Leberparenchym oberhalb der umlaufenden Seidennaht mit einer Mikroschere vorsichtig ab.

Penetrieren Sie die Gefäßwand der Arteria hepatica communis im Lebertransplantat von außen nach innen mit zwei Elf-Null-Polypropylen-Nähten in der Drei-Uhr- bzw. Neun-Uhr-Richtung. Den Blutfluss der Arteria hepatica communis und der Arteria gastroduodenalis im Empfänger mit zwei gekrümmten Mikrotransektieren Sie die richtige Leberarterie des Empfängers an ihrer Wurzel, um das Gefäßlumen freizulegen. Vergrößern Sie das Gefäßlumen der richtigen Leberarterie beim Empfänger, indem Sie einen Teil der Gefäßwand in Längsrichtung schneiden, um den Durchmesser der Arteria hepatica communis im Lebertransplantat aufzunehmen.

Spülen Sie das Gefäßlumen mit Kochsalzlösung. Anastomosieren Sie die Arteria hepatica communis des Lebertransplantats, um die richtige Leberarterie mit der Laufnahttechnik von einem Ende zur anderen zu vergrößern. Führen Sie einen Querschnitt an der Vorderwand des Gallengangs beim Empfänger durch.

Ziehen Sie den Gallenstent im Leberteiltransplantat nach unten, um ihn in das Lumen des Gallengangs des Empfängers einzuführen. Teilen Sie den Querschnitt. Befestigen Sie den Stent mit einer umlaufenden Seidennaht von sechs Nullen.

Binden Sie die beiden umlaufenden Seidennähte mit sechs Nullen im Gallengang aneinander, um die Spannung der Anastomose zu verringern. Nach der Operation werden alle Empfänger subkutan mit 0,1 Milligramm Buprenorphin und Cefuroxim 16 Milligramm pro Kilogramm behandelt. Insgesamt wurde in 31 Fällen eine generische arterielle arterielle Leberpartielle Lebertransplantation bei Ratten nach diesem Protokoll durchgeführt.

Alle Empfänger überlebten bis zum Ende der Beobachtungszeit. Das Körpergewicht des Empfängers begann sich nach dem vierten postoperativen Tag zu erholen. Die Steigung des Körpergewichts lag nach dem sechsten postoperativen Tag nahe an der der Lewis-Ratte, was indirekt auf eine Genesung des Empfängers hindeutete.

Histologisch wurde bei den Empfängern eine leichte Proliferation des Gallengangs beobachtet und die leberlobuläre Architektur des Empfängers war intakt. Es wurde keine Nekrose oder offensichtliche Anzeichen einer Pseudodilatation beobachtet. Der Serumspiegel der Alaninaminotransferase lag am 30. postoperativen Tag im normalen Bereich.

Bei diesen Empfängern wurden keine Fälle von gelbem Urin durch Gelbsucht beobachtet, was durch tägliche Überprüfung der Käfigeinstreu angezeigt wurde, was auf die Durchgängigkeit des Gallenstents hindeutete. Der normale Serumspiegel von Bilirubin am postoperativen Tag 30 bestätigte den Erfolg bei der Rekonstruktion des Gallengangs. Die durchschnittliche Dauer der anhepatischen Phase betrug 22,03 plus oder minus 2,3 Minuten.

Die Manschettenanastomose der Pfortader dauerte 4,68 plus/minus 0,77 Minuten, während die Manschettenanastomose der unteren Lebervena nur 2,05 plus/minus 0,71 m/minütig dauerte. Im Vergleich dazu ersparte die Manschettenanastomose der Pfortader, die Manschettenanastomose der unteren Lebervena cava dem Personal das Platzieren von Stay-Nähten und verkürzte dadurch die Anastomosenzeit weiter. Während der 70%igen Hepatektomie wurden zwei Fälle von Blutungen im verbleibenden Stumpf des Mediumslappens beobachtet, unter 31 Fällen von gefäßorientierter Hepatektomie.

Im vorherigen Experiment wurde in acht von 18 Fällen von Parenchym Blutungen im Reststumpf des Mediumslappens beobachtet, was die gefäßorientierte Hepatektomie konservierte. Dieses Ergebnis deutete auf eine geringere Blutungsrate im verbleibenden Leberstumpf des Mediumslappens hin, nachdem eine gefäßorientierte 70%ige Hepatektomie angewendet wurde. Durch die Anwendung dieses Protokolls der partiellen Lebertransplantation bei Ratten wurde nach der Mikrochirurgie ein niedriger Leberenzymspiegel und eine intakte lobuläre Leberarchitektur sowie eine hohe Überlebensrate erreicht.