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DOI: 10.3791/56407-v
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Hier präsentieren wir eine Mikroskopie-basiertes Protokoll für hochauflösende Bildgebung und eine dreidimensionale Rekonstruktion der Maus neurovaskuläre Einheit und Blut - Hirn-Schranke mit Gehirn frei schwebenden Abschnitten. Diese Methode ermöglicht die Visualisierung, Analyse und Quantifizierung der intrazellulären Organellen an der BBB.
Das übergeordnete Ziel dieser Methode ist es, ein mikroskopiebasiertes Protokoll für die hochauflösende Bildgebung und 3-dimensionale Rekonstruktion der Blut-Hirn-Schranke der Maus bereitzustellen. Es kombiniert die Immunfluoreszenz von frei schwebenden Schnitten mit konfokaler Mikroskopie, um subzelluläre Organellen innerhalb der Endothelzellen des Gehirns zu analysieren. Diese Methode ergänzt die Präparation von frei schwebenden Schnitten des Gehirns, die Immunfluoreszenzfärbung, die Bildaufnahme und die Analyse von Parametern für die hochauflösende Mikroskopie der Blut-Hirn-Schranke. Der Hauptvorteil der Technik besteht darin, dass sie die Quantifizierung subzellulärer Organellen innerhalb der Zellen der neurovaskulären Einheit ermöglicht. Das Verfahren wird von Roberto Villase vorgeführt
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