Name: Testen tierische Angst bei Ratten: Auswirkungen der offenen Arm Gesimsen und geschlossenen Arm Wand Transparenz in erhöhter Plus Maze Test (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-29T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: Erfahren Sie, wie Sie Angstverhalten bei Ratten mit dem Elevated Plus Maze messen. Die Armstruktur beeinflusst die Sensitivität bei der Erkennung anxiolytischer Wirkungen erheblich.

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Die Autoren danken Herrn Akihiro Hirano für seine Hilfe bei der Herstellung der kundenspezifischen Apparat. Die Autoren möchte Herr Kosuke Takahashi und Herr Shingo Nakajima für ihre technische Unterstützung zu danken. Diese Arbeit wurde durch Forschung an Risiko von chemischen Substanzen, Gesundheit und Labor Sciences Research Grants, Ministerium für Gesundheit, Arbeit und Wohlfahrt, Japan (H25-KAGAKU-IPPANN-003) und Research Project Grant A durch Institut für Wissenschaft und Technologie Meiji unterstützt. Universität, Japan.

Alle hier beschriebene experimentelle Verfahren wurden von den institutionellen Animal Care und Nutzung Ausschuss der Meiji-Universität (IACUC 14-0002(1)). genehmigt Tiere, die in die repräsentativen Ergebnisse waren wie folgt hergestellt: männliche Sprague-Dawley Ratten wurden von einer Labor-Tier-Firma gekauft und befindet sich in Gruppen von 4 Tieren pro standard Rattenkäfig (W200 D410 × × H250 mm) für mindestens eine Woche vor Beginn der der Behavioral Experiments. Die Unterbringung von Tieren-Zimmer war gepflegt, bei standard Umgebungsbedingungen für Licht (12:12 hell/dunkel-Zeitplan mit auf bei 10:00 h leuchtet), Raumtemperatur (25,0 ± 0,5 ° C), Luftfeuchtigkeit (55 ± 10 %) und Lüftung (10 x / h), und Tiere hatte ad libitum Zugang zu Lebensmitteln ( Oriental Yeast Co. Ltd, Tokyo, Japan) und Wasser. Die Tiere waren in einem standard Rattenkäfig (W410 x D250 x H200 mm, Toyoriko Co., Ltd., Aichi, Japan) mit Papier, Bettwäsche (Alpha-Dri, LSG Corporatin, Tokio, Japan) gehalten.
(1) erhöhte Plus Maze Test
<ol><li>Richten Sie die erhöhten Plus Labyrinth Apparat in einem maßgeschneiderten Container (W1, 500 × D1, 500 × H2, 000 mm) (Abbildung 1A) mit einem Plus-förmigen Metallgerüst 500 mm über dem Boden, den Lauf zu unterstützen so Arme (Abbildung 1 b), in der Container-Decke, Beleuchtung beleuchten Sie die Oberfläche des Labyrinths die erforderliche Lichtstärke (Abbildung 1) und eine digitale Videokamera in der Mitte Decke ermöglichen live video-Überwachung der behavioral Tests (Abbildung 1).</li>
	<li>Die Arme (L500 x W100 mm) auf die Plus-förmigen Rahmen befestigen, und dann fix die quadratischen Mittelbahnsteig (W100 x D100 mm) in der Mitte der vier Arme (Abbildung 1 -F). Hinweis: In unserem Labor haben wir zwei Arten von offenen Armen (L500 x W100 mm) und zwei Arten von geschlossenen Arme (L500 x W100 x H450 mm) (Abbildung 1). Die geschlossene Arme haben entweder transparent oder opak Wände (Abbildung 1), und die offenen Arme sollen mit oder ohne einen kurzen Felsvorsprung (H5 mm, Abbildung 1E). Die quadratischen Mittelbahnsteig (W100 × D100 mm) befindet sich im Zentrum der vier Arme (Abbildung 1 -F). So, die folgenden vier Kombinationen von Waffen zubereitet werden, nach experimentellen Zweck: offene Arme mit leisten + geschlossene Arme mit transparenten Wänden (leisten/Transparent), offenen Armen mit leisten + geschlossene Arme mit undurchsichtigen Wänden (leisten/opak), offenen Armen ohne Vorsprünge + geschlossene Arme mit transparenten Wänden (No-leisten/Transparent) und offenen Armen ohne Vorsprünge + geschlossene Arme mit opaker Wände (No-leisten/opak). Die Oberfläche der Start-und Landebahn Arm ist schwarz, um bessere Tier Verfolgung durch die automatisierte Verhalten-Analyse-Software, wie in Abschnitt 2 beschrieben Verhaltensanalyse zu ermöglichen.</li>
	<li>Stellen Sie auf der Oberfläche des distalen Teils jeder Arm und zentrale Plattform bis ca. 100 Lux Beleuchtungsstärke.</li>
	<li>Vor jedem Test den gesamten Apparat mit 70 % Ethanol-Lösung reinigen und mit destilliertem Wasser abwischen.</li>
	<li>Klicken Sie auf "Record-Taste" auf der Harddisk-Recorder, die digitale Videokamera zu starten, die die Ratte Verhalten für das imaging-Analyse beschrieben in Abschnitt 2, Verhaltensanalyse Video aufzeichnen wird.</li>
	<li>Ein Tier auf der zentralen Plattform für einen offenen Arm und freie Erkundung auf dem Gerät für 5 Minuten.</li>
	<li>Klicken Sie auf den Button"Stop" auf der Harddisk-Recorder für die Aufnahme zu beenden.</li>
	<li>Die Anzahl der Kot und Urinieren nach der Rückkehr der getesteten Tieres in der Tierhaltung-Raum.</li>
	<li>Wiederholen Sie ab Schritt 1.4 bis zum Ende des Experiments. Hinweis: Ein trocken Testlauf erfolgt stets vor Beginn jedes Experiment, um zu überprüfen, dass die experimentelle Einstellungen korrekt eingerichtet sind, bevor alle Versuchstiere den experimentellen Bedingungen ausgesetzt sind. Andernfalls kann einige Tiere, besonders das erste Tier unterschiedliche Umweltbedingungen (z.B. Geräusche möglicherweise induziert durch den Experimentator während der Manipulation und/oder Tier Hinweise, die möglicherweise durch das zuvor getestete Tier links) auftreten. Hinweis: Die Experimentatoren sind in der Nähe der Container, wenn ein Tier getestet wird. Obwohl die Experimentatoren nicht sichtbar sind kann die Ratte noch in der Lage, ihnen über Geruch und/oder Ton zu spüren also.</li>
</ol>(2) Verhaltensanalyse
Hinweis: Verhaltensanalyse erfolgt durch manuelle Beobachtung und Analyse-Software automatisiert.
<ol><li>
Manuelle Beobachtung
	<ol>
<li>Nachdem das Tier auf dem Sims platziert haben, beachten Sie Folgendes: Anzahl der Einträge (ein Eintrag auf den Arm ist definiert als jede Instanz, wenn alle 4 Pfoten auf dem Arm sind), verbrachte Zeit an jedem Arm und Anzahl der gestreckt behandelnden Haltungen gegenüber einen offenen Arm , und sichern Sie die zentrale Plattform in Richtung einer geschlossenen Arm.</li>
		<li>Dauer und Häufigkeit der Stoppuhr und Graf für 5 min, ab wann die Türen des Behälters geschlossen sind oben festgelegten Verhaltensweisen zu messen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Automatisierte Analyse
	<ol>
<li>Mit dem verfügbaren Software-Programm, Folgendes aufzuzeichnen: Abstand reiste, Zeit verbrachte in verschiedene Positionen auf offenen Armen (mittleren proximalen und distalen Segmente von der zentralen Plattform), und eine Analyse von Minute zu Minute der Zeit aufgewendet offen und geschlossen Arme.</li>
		<li>Klicken Sie auf den startButton"" der automatisierten Analyse-Software zur gleichen Zeit, als die manuelle Beobachtung beginnt (die Aufzeichnung stoppt automatisch wenn Aufnahme Dauer festgelegt ist). Hinweis: In dieser Studie verwendete Verhaltensanalyse-Software verfolgt das Tier über den Kontrast mit dem Hintergrund-Feld; das Tier, das eine feste Größe zugeordnet ist, wird als das hellere Objekt identifiziert und die Fortbewegung der Mittelpunkt kann somit für Tier-Tracking verwendet werden.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Nestler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+Brain%27s+Reward+Circuitry+in+Depression%3A+Transcriptional+Mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Role of the Brain's Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms.</a> Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).</li>
<li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+mouse+behavior%3A+interactions+with+laboratory+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).</li>
<li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+%27fear%27-motivated+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn+Schmiedebergs+Arch+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).</li>
<li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+open%3Aclosed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).</li>
<li>Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+illumination%2C+closed+wall+transparency+and%2For+extramaze+space+influence+both+baseline+anxiety+and+response+to+diazepam+in+the+rat+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze.</a> Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).</li>
<li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).</li>
<li>Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+vision+and+proprioception+in+the+aversion+of+rats+to+the+open+arms+of+an+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Processes%22%5BJournal%5D)">The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze.</a> Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethopharmacological+analysis+of+behaviour+of+rats+using+variations+of+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze.</a> Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+validation+of+the+elevated+plus+maze+constructed+with+transparent+walls%5BTitle%5D)+AND+%22Braz+J+Med+Biol+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls.</a> Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).</li>
<li>Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+elevated+plus-maze+test+with+opaque+or+transparent+walls+in+the+detection+of+mouse+strain+differences+and+the+anxiolytic+effects+of+diazepam%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam.</a> Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).</li>
<li>Fernandes, C., File, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+open+arm+ledges+and+maze+experience+in+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).</li>
<li>Horii, Y., Kawaguchi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+detection+sensitivity+of+anxiolytic+effects+of+diazepam+by+ledge-free+open+arm+with+opaque+walled+closed+arm+elevated+plus+maze+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats.</a> Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).</li>
<li>Santos, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+effect+of+acute+sibutramine+in+female+rats+in+the+elevated+T-maze+and+elevated+plus-maze+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Clin+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).</li>
<li>Lynn, D. A., Brown, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ontogeny+of+anxiety-like+behavior+in+rats+from+adolescence+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood.</a> Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).</li>
<li>Horii, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+Hatano+high-avoidance+rats+show+high+avoidance+and+high+anxiety-like+behaviors+as+compared+with+male+low-avoidance+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Anim%22%5BJournal%5D)">Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats.</a> Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).</li>
<li>Walf, A. A., Frye, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+elevated+plus+maze+as+an+assay+of+anxiety-related+behavior+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents.</a> Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).</li>
<li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+investigation+of+anxiety+and+maternal+responsiveness+of+postpartum+female+rats+in+a+pup+elevated+plus+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze.</a> Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).</li>
<li>Albani, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavior+in+the+elevated+plus+maze+is+differentially+affected+by+testing+conditions+in+rats+under+and+over+three+weeks+of+age%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age.</a> Front Behav Neurosci. 9, 31(2015).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Mit steigender Anzahl von Patienten mit psychiatrischen Erkrankungen, einschließlich der Angststörung, ist es wichtig, innovative Studien zur Verbesserung des Verständnisses der Grundmechanismus der Angst entwickeln. Um dies zu erreichen, ist es auch wichtig, die experimentellen Verfahren zu optimieren. Damit zur Verbesserung der Anwendung der erhöhten plus Labyrinth Test, wir haben bewiesen, dass die Wirkung von Arm-Funktionen auf die experimentellen Ergebnisse mit Ratten.
Die erhöhte plus La...

Die Zahl von Patienten mit affektiven Störungen, einschließlich-Angststörung und Depression, steigt. Obwohl die Entwicklung dieser Erkrankungen genetische und umweltbedingte Faktoren beinhaltet, sind detaillierte pathogenen Mechanismen noch nicht vollständig verstandenen1. Forschung muss daher konzentrieren sich auf die Aufdeckung der zugrunde liegenden Mechanismen von affektiven Störungen sowie die Entwicklung von wirksamen Medikamenten, die weniger Nebenwirkungen haben.
Verhaltens-Tests für Versuchstiere eignen sich für die Untersuchung von höheren Gehirnfunktion, einschließlich Emotion. Wie das Verhalten der Tiere sehr variabel ist, unterscheiden sich experimentelle Ergebnisse oft zwischen Labors, auch wenn eine identische Inzucht Belastung verwendet2war. Forscher müssen also auch die grundlegenden Funktionen der experimentelle Geräte zu verstehen, die sie ergreifen, um zuverlässige und präzise Ergebnisse im Labor zur Verfügung zu stellen.
Die erhöhte plus Labyrinth Test wurde ursprünglich gegründet, um emotionale Reaktivität in Nagetieren3,4zu prüfen. Den gesamten Apparat in der Regel befindet sich 500 mm über dem Boden und besteht aus zwei offenen und geschlossenen zweiarmig, die eine plus Form zu machen. Messungen der Arm Exploration (einschließlich der Dauer und Häufigkeit der Einträge an jedem Arm), Abstand reiste und bestimmte Verhaltensweisen wie gestreckt behandelnden Haltung des unterworfenen Tiere werden Beobachtungsdaten Zeiten aufgezeichnet. Durch diese Maßnahmen wird die tierische Angst als ein experimentelles Ergebnis geschätzt.
Die erhöhte plus Labyrinth-Test dient in der ganzen Welt, aber nicht alle Labore verwenden die gleichen Apparat Design5,6, und diese Unterschiede können die experimentellen Ergebnisse beeinflussen. Unterschiede sind z. B. das Vorhandensein oder Fehlen von Felsvorsprüngen entlang der offenen Armen und/oder die Nutzung von transparent oder opak Wände für geschlossene Arme5,6. Die Vorsprünge entlang offenen Armen und die Verwendung von transparenten Wänden für geschlossene Arme wurden entwickelt, um Tiere fallen aus dem Apparat7zu verhindern und Verhaltensbeobachtungen innerhalb der geschlossenen Arme, jeweils8,9zu erleichtern. Zwar gab es einige Studien, die wie einzelne Arm Struktur Unterschiede untersucht die tierische Angst1,2,5,10,11 erkennen beeinträchtigen können , die kombinierten Auswirkungen offen (mit/ohne kurze Kante) und geschlossenen (transparenten/undurchsichtigen Wänden) Arm Features auf das Verhalten der Tiere ist noch nicht untersucht.
In einem kürzlich veröffentlichten Bericht diskutierten wir die Wirkung dieser Kombinationen von Arm-Designs auf Angst-ähnliches Verhalten in Ratten12. In Kürze öffnen Sie Arm leisten deutlich erhöhte Angst-ähnliches Verhalten bei Ratten, während transparente Arme können auch dieses Verhalten gesunken. Darüber hinaus überprüft wir höhere Empfindlichkeit des Effekts eine angstlösende Medikament in einer Kombination aus keine-zulasten offenen Arm + opak ummauerten geschlossenen Arm im Vergleich mit einer Kombination aus zulasten offenen Arm + transparente ummauerten geschlossenen Arm. In diesem Bericht werden wir vorstellen unser Protokoll für die erhöhte plus Labyrinth Test, zusammen mit Diskussion der wichtigsten Ergebnisse aus dem vorherigen Bericht. Wir glauben, dass dieser Bericht enthalten nützliche Informationen für diejenigen, die beschäftigt haben oder planen, verwenden Sie die erhöhte plus Labyrinth in ihren Studien.

<table><tbody><tr><td>Kundenspezifischer Behälter (W1500 & mal; D1500 und mal; H2000 mm)</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Handgefertigt von Herrn Akihiro Hirano</td></tr><tr><td>Beleuchtung</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Handgefertigt von Herrn Akihiro Hirano</td></tr><tr><td>Elevated plus Labyrinth</td><td>Gerät NA</td><td></td><td>NA Handgefertigt von Herrn Akihiro Hirano</td></tr><tr><td>Digitale Videokamera</td><td>Watec</td><td>WAT-250D2</td><td>Jede geeignete Videokamera kann an einen Festplattenrekorder angeschlossen werden, um Tracking-Profile aufzuzeichnen.</td></tr><tr><td>Festplattenrekorder</td><td>TOSHIBA</td><td>RD-R200</td><td>An die digitale Videokamera kann jeder geeignete Festplattenrekorder angeschlossen werden.</td></tr><tr><td>Sprague-Dawley-Ratten</td><td>Charles River Laboratories Japan, Inc.</td><td>NA</td><td>Alle geeigneten Ratten können für Ihre Studie verwendet werden</td></tr><tr><td>Standard-Rattenkäfig</td><td>Toyoriko</td><td>TP-105</td><td>Jeder geeignete Rattenkäfig kann für Ihre Studie verwendet werden</td></tr><tr><td>Instrument zur Messung der Lichtintensität</td><td>AS ONE</td><td>1-5818-02</td><td>Jedes geeignete Instrument zur Messung der Lichtintensität</td></tr><tr><td>EthoVision XT Version 8.0</td><td>Noldus</td><td>NA</td><td>Jede geeignete Software zur Messung des Tierverhaltens</td></tr><tr><td>Diazepam</td><td>Taiyo Pharmaceutical Industry</td><td>1124402A2061</td><td>Jedes geeignete Medikament kann für Ihre Studie verwendet werden</td></tr><tr><td>Tween 80</td><td>Wako Pure Chemical Industries</td><td>9005-65-6</td><td>Jedes geeignete Medikament kann für Ihre Studie verwendet werden</td></tr></tbody></table>

testen tierische angst bei ratten: auswirkungen der offenen arm gesimsen und geschlossenen arm wand transparenz in erhöhter plus maze test

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

Die erhöhte plus Labyrinth-Test ist ein behavioral Test zur Beurteilung tierische Angst bei Nagetieren. Obwohl dieser Test auf dem Gebiet der Verhaltensforschung allgemein angewendet wird, werden oft widersprüchliche Ergebnisse aus verschiedenen Labors angeboten. Ermittlung der Gründe für die unterschiedlichen Ergebnisse, konzentrierten wir uns zuvor auf Arm-Features, die Laboratorien, die meisten vor allem die Anwesenheit/Abwesenheit leisten an den Seiten mit ausgebreiteten Armen und der Transparenz/Undurchsichtigkeit der geschlossenen Arm Wände unterscheiden. In einem früheren Bericht wir verwendet einen benutzerdefinierten gestaltete Container Ratte Verhalten auf verschiedene Kombinationen von offenen und geschlossenen Arm Designs unter sonst gleichen Versuchsbedingungen zu vergleichen, und zeigte, dass Unterschiede im Arm Funktionen experimentelle stören Ergebnisse. In Kürze öffnen Sie Arm leisten deutlich erhöhte Angst-ähnliches Verhalten bei Ratten, während transparente Arme können auch dieses Verhalten gesunken. Darüber hinaus haben wir eine höhere Empfindlichkeit des Effekts eine angstlösende Medikament in einer Kombination aus keine-zulasten offenen Arm + opak ummauerten geschlossenen Arm im Vergleich mit einer Kombination aus zulasten offenen Arm + transparente ummauerten geschlossenen Arm überprüft. In diesem Bericht stellen wir Ihnen unser Protokoll für die erhöhte plus Labyrinth Test, zusammen mit der Diskussion der wichtigsten Ergebnisse aus den vorherigen Bericht und unsere experimentelle Erfahrung. Wir glauben, dass dieser Bericht enthalten nützliche Informationen für Forscher, die beschäftigt haben oder planen, verwenden Sie die erhöhte plus Labyrinth in ihren Studien.

In der vorangegangenen Studie verglichen wir die kombinierte Wirkung der offenen Arm Simsen und Transparenz der geschlossenen Arm Wände auf der explorativen Verhaltensweisen auf der Labyrinth-12. Ratten deutlich viel weniger Zeitaufwand auf offenen Armen ohne Vorsprünge als auf offenen Armen mit leisten (F [1, 60] = 13,49, P = 0,0005) (Abbildung 2A). Ähnliche Ergebnisse wurden auch für die Anzahl der Einträge in offenen Armen ...

Ratten Angst-ähnliches Verhalten getestet durch die erhöhte plus Labyrinth hängt stark von der Testumgebung. Hier zeigen wir, wie Geräte-Einstellungen, besonders Arm Struktur, Verhalten auf das Labyrinth beeinflussen, und wir erklären ein zuverlässiges Protokoll, um Wirkungen angstlösende Medikamente zu erkennen. Dieser Bericht wird Angst Forschung beitragen.

Testen tierische Angst bei Ratten: Auswirkungen der offenen Arm Gesimsen und geschlossenen Arm Wand Transparenz in erhöhter Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

Das übergeordnete Ziel dieses Experiments ist es, die Angst bei Ratten unter Verwendung des entsprechenden erhöhten Plus-Labyrinths zu messen. Das wichtigste Ergebnis dieser Studie ist, dass sich die Nachweisempfindlichkeit der anxiolytischen Arzneimittelwirkung in Abhängigkeit von den Merkmalen des erhöhten Kreuzlabyrinthapparates ändern kann. Diese Studie kann den Forschern helfen, die Labyrinth-Apparatur im Labor entsprechend ihrem experimentellen Ziel einzurichten und eine hervorragende Datenaufzeichnung zu gewährleisten.Das Verfahren wird von einem Gastwissenschaftler aus meinem Labor demonstriert. Richten Sie zunächst das erhöhte Plus-Labyrinth-Gerät in einem maßgeschneiderten Schrankbehälter ein. Das plusförmige Metallgerüst des Labyrinths sollte etwa einen halben Meter über dem Boden angehoben werden.Halten Sie eine gleichmäßige Helligkeit im gesamten Labyrinth bei der erforderlichen Intensität aufrecht. Montieren Sie am Überkopfpunkt eine digitale Videokamera, um die Tests aufzuzeichnen und zu überwachen. Befestigen Sie nun die Labyrintharme am Rahmen.Es gibt zwei Arten von offenen Armen, entweder mit oder ohne 5-mm-Leisten an den Seiten. Es gibt auch zwei Arten von geschlossenen Armen. Die Wände können lichtdurchlässig oder undurchsichtig sein.Befestigen Sie die quadratische Mittelplattform zwischen den Armen. Die Oberflächen der zentralen Plattform und des Labyrintharms sind schwarz gefärbt, um die Tierverfolgung durch die automatisierte Verhaltensanalyse zu verbessern. Jetzt, da die Arme an Ort und Stelle sind, können Sie die Beleuchtungsintensität so einstellen, dass an der Oberfläche des distalen Endteils jedes Arms und an der zentralen Plattform etwa 100 Lux vorhanden sind.Reinigen Sie vor jedem Test das gesamte Gerät mit 70%iger Ethanollösung und wischen Sie es anschließend mit destilliertem Wasser ab. Klicken Sie auf die Aufnahmetaste am Festplattenrekorder, um mit der Erfassung von Bildern von der digitalen Videokamera zu beginnen. Wenn das Gerät funktioniert, führen Sie den Test durch.Beginnen Sie den Test, indem Sie die Ratte auf die zentrale Plattform stellen, so dass sie einem offenen Arm zugewandt ist, und schließen Sie die Schranktüren. Lassen Sie dann fünf Minuten lang die Apparatur frei erkunden. Das Versuchsergebnis kann variieren, je nachdem, ob die Ratte mit offenem oder gekreuztem Arm beurteilt wird.Es ist besser, Ratten immer beim ersten Betreten des geschlossenen Arms auf den offenen Arm zu legen, um ein Erfrieren zu verhindern. Stoppen Sie die Aufzeichnung nach fünf Minuten, um den Test zu beenden. Setze die Ratte dann wieder in ihren Käfig zurück und zähle die Anzahl der Fäkalien und Urinierungen im Labyrinth, bevor du sie reinigst.Führen Sie die Verhaltensanalyse immer sowohl mit manueller Beobachtung als auch mit automatisierter Analysesoftware durch. Notieren Sie auf dem Video manuell die Anzahl der Eingänge, die die Ratte in die Arme des Labyrinths macht. Ein Eintrag ist definiert als jeder Moment, in dem alle vier Pfoten auf dem Arm sind.Notiere auch die Zeit, die du in jedem Arm verbracht hast, und die Anzahl der gestreckten Haltungen, die du einnimmst, während die Ratte auf der zentralen Plattform mit dem Gesicht zu einem offenen Arm und dem Rückzug in einen geschlossenen Arm sitzt. Führen Sie diese Messungen während des fünfminütigen Tests mit einer Stoppuhr und einem Zähler durch. Um eine automatisierte Analyse durchzuführen, öffnen Sie die Videoaufzeichnung in einem kommerziellen Softwareprogramm.Die Software verfolgt das Tier im Labyrinth und nutzt dabei den Kontrast zwischen dem Tier und dem dunklen Boden. Weisen Sie das Tier zunächst einem Kontrast-Blob einer bestimmten Größe zu und weisen Sie dann die Mitte des Blobs als Tracking-Punkt zu. Lassen Sie die Software anschließend für den vollen fünfminütigen Test die zurückgelegte Strecke, die Zeit, die Sie in verschiedenen Positionen mit offenen Armen verbracht haben, und die Gesamtzeit, die Sie mit offenen und geschlossenen Armen verbracht haben, aufzeichnen.Manchmal kann die automatisierte Analyse nicht zwischen Eintritten und Nicht-Eintritten in die Arme unterscheiden. Daher empfehlen wir, neben der automatisierten Analyse immer auch eine manuelle Beobachtung durchzuführen. Die Ergebnisse des Erkundungsverhaltens von Ratten auf dem erhöhten Plus-Labyrinth mit unterschiedlichen offenen und geschlossenen Armdesigns zeigen, dass Ratten mehr Zeit auf offenen Armen mit Vorsprüngen verbringen als auf offenen Armen ohne Vorsprünge.Sie machten auch mehr Eingriffe in diese Arme, so dass Vorsprünge wahrscheinlich das Erkundungsverhalten auf offenen Armen erhöhen. Ratten zeigten an geschlossenen Armen mit transparenten Wänden signifikant weniger gestreckte Haltung als an geschlossenen Armen mit undurchsichtigen Wänden. Dies deutet darauf hin, dass transparente geschlossene Armwände angstähnliches Verhalten verringerten.Ratten verbrachten auch mehr Zeit auf den distalen Segmenten der offenen Arme, wenn die geschlossenen Arme transparente Wände hatten, als wenn die geschlossenen Arme undurchsichtige Wände hatten. Darüber hinaus war die distale Erkundung des offenen Arms in Labyrinthen ohne Leisten und undurchsichtige Armkombinationen signifikant geringer als in Leisten und transparenten Armkombinationen. Daher kann die Detektionsempfindlichkeit je nach Kombination der verwendeten Armdesigns verändert werden.Um die Unterschiede in der Nachweisempfindlichkeit zwischen verschiedenen Arten von Armdesigns zu überprüfen, wurde ein weiteres Experiment mit dem Anxiolytikum Diazepam durchgeführt. Kurz gesagt, die Wirkung der hochdosierten Diazepam-Behandlung wurde in der undurchsichtigen Wandapparatur ohne Vorsprünge festgestellt, nicht jedoch in der transparenten Wandapparatur mit Vorsprüngen. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, daran zu denken, alle Tiere unter den gleichen Versuchsbedingungen zu behandeln und sicherzustellen, dass alle Tiere zu Beginn jedes Tests mit demselben offenen oder geschlossenen Arm konfrontiert werden.Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie verstehen, wie Sie das erhöhte Kreuzlabyrinth einrichten. Es ist wichtig, sich daran zu erinnern, dass die experimentellen Ergebnisse je nach Armdesign variieren können. Wir empfehlen Ihnen daher, geeignete Arme für Ihre Versuchsziele zu verwenden.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Die erhöhten Plus-Labyrinth-Test ist eine der am häufigsten verwendeten Tests zur Messung von Angst-ähnliches Verhalten bei Mäusen. Hier präsentieren wir einen Film zeigen, die Modalitäten für die Durchführung des Tests.

Elevated Plus Maze für Mäuse

Die plus-maze Maßnahmen Angst-ähnliches Verhalten bei Nagern. Es gibt zwei gegenüberliegenden geschlossenen und zwei gegenüberliegenden offenen Armen, ängstlich Nagetieren vermeiden offenen Armen. Der zentrale Bereich ist weder offen noch vollständig geschlossen, so hier verbrachte Zeit ist mehrdeutig und schwer zu interpretieren. Hier eine Modifikation der plus-maze-Protokoll eliminiert dieses Gebiet beschrieben.

Die sukzessive Gassen Test von Angst bei Mäusen und Ratten

Cognitive Impairment, die aus der strahlentherapeutischen Management von Hirntumoren stellt eine klinisch hartnäckigen Bedingung, dass schädliche Auswirkung auf die Lebensqualität. Die Fähigkeit, kritisch zu bewerten potenzieller Interventionen zur Besserung Strahlung induzierten kognitiven verringert, hängt letztlich von der Fähigkeit, rigorose quantitative Einschätzungen der Erkenntnis zu unternehmen.

Quantifizierung Kognitive Dekrementiert von Cranial Strahlentherapie verursachten Schäden

Die Trockenland Barnes Labyrinth wird häufig zur räumlichen Navigation Fähigkeit in Reaktion auf leicht aversive Reize zu messen. In aufeinander folgenden Tagen, Leistung (zB Latenz, um das Entweichen Käfig zu suchen) der Probanden verbessert, was auf normalen Lernen und Gedächtnis. Unterschiede zwischen Ratten und Mäusen erfordern Gerät und Methodik Veränderungen, die hier beschrieben werden.

Barnes Maze Teststrategien mit kleinen und großen Nager-Modelle

Es wird ein Protokoll zur Verwendung eines Open Field Maze bereitgestellt, um auf die allgemeine Bewegungsaktivität, Angst und Emotionalität in einem Labormausmodell zuzugreifen.

Die Nutzung der Open Field Maze auf Bewegungsapparat und Angst-ähnliches Verhalten bei Mäusen messen

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll zur Änderung des Angst von Nagetier Tiermodellen untersucht. Die erhöhten plus Labyrinth (EPM) Test, zusammen mit einem Video tracking-Software bietet eine zuverlässige Methode, um die Wirkung der verschiedenen möglichen anxiolytische Behandlungen in präklinischen Labor Szenarien zu dokumentieren.

Erhöhte Plus Labyrinth Test in Kombination mit Video Tracking-Software um die angstlösende Wirkung von exogenen ketogene Ergänzungen zu untersuchen

Mit optogenetischer Manipulation bestimmter neuronaler Populationen oder Hirnregionen kann das Verhalten bei frei beweglichen Tieren mit hoher zeitlicher und räumlicher Auflösung verändert werden. Durch den Einsatz verschiedener optogenetischer Werkzeuge in Kombination mit chronisch implantierten optischen Fasern kann eine Vielzahl neuronaler Modulationen und Verhaltenstests durchgeführt werden.

Optogenetische Manipulation der neuronalen Aktivität, um das Verhalten bei frei beweglichen Mäusen zu modulieren

Hier wird ein durch soziale Isolation (SI) induziertes Angstmausmodell vorgestellt, das Wildtyp-C56BL / 6J-Mäuse verwendet, um Stress und angstähnliches Verhalten mit minimaler Handhabung und ohne invasive Verfahren zu induzieren. Dieses Modell spiegelt moderne Lebensmuster sozialer Isolation wider und ist ideal für die Untersuchung von Angstzuständen und verwandten Störungen.

Soziales Isolationsmodell: Ein nichtinvasives Nagetiermodell für Stress und Angst

Dieses Manuskript stellt eine Reihe von hochgradig reproduzierbaren Verhaltenstests vor, um ein Mausmodell mit Angelman-Syndrom zu validieren.

Verhaltenscharakterisierung eines Angelman-Syndrom-Mausmodells

Dieses Protokoll skizziert ein CUMS-Modell (Chronic Unpredictable Mild Stress) für Depressionen, das auf der mongolischen medizinischen Theorie basiert, zusammen mit Methoden zur Validierung von Verhaltenstests.

Chronisch unvorhersehbarer milder Stress bei Ratten basierend auf der mongolischen Medizin

Erfahren Sie, wie Sie Angstverhalten bei Ratten mit dem Elevated Plus Maze messen. Die Armstruktur beeinflusst die Sensitivität bei der Erkennung anxiolytischer Wirkungen erheblich.

Testen tierische Angst bei Ratten: Auswirkungen der offenen Arm Gesimsen und geschlossenen Arm Wand Transparenz in erhöhter Plus Maze Test (Video) | JoVE Journal

Testen tierische Angst bei Ratten: Auswirkungen der offenen Arm Gesimsen und geschlossenen Arm Wand Transparenz in erhöhter Plus Maze Test

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