Eine Einführung in den Zellstoffwechsel

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Cell Biology
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JoVE Science Education Cell Biology
An Introduction to Cell Metabolism

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10:19 min
April 30, 2023

Overview

In Zellen sind kritische Moleküle durch Zusammenfügen von Einzelteilen wie Aminosäuren oder Nukleotide eingebaut oder in kleinere Bestandteile zerlegt. Verantwortlich für diese Reaktionen werden bzw. wie anabole und katabole bezeichnet. Diese Reaktionen benötigen oder Energie in der Regel in Form von einem “energiereichen” Molekül namens ATP zu produzieren. Zusammen, diese Prozesse “Cell Metabolism” bilden, und sind Markenzeichen von gesunden, lebenden Zellen.

Jupiters Einführung in Zellstoffwechsel Bewertungen kurz die reiche Geschichte dieses Feldes, von frühen Studien zur Photosynthese bis hin zu neueren Entdeckungen im Zusammenhang mit der Erzeugung von Energie in allen Zellen. Dies wird gefolgt von einer Diskussion über einige wichtigen Fragen, die die Wissenschaftler untersuchen, Stoffwechsel und gängige Methoden, die sie anwenden, um diese Fragen zu beantworten. Schließlich werden wir untersuchen, wie aktuelle Forscher sind studierte Veränderungen im Stoffwechsel, die Stoffwechselstörungen, oder dass begleiten nach Exposition gegenüber Umwelt-Stressoren auftreten.

Procedure

Zellstoffwechsel bezieht sich auf die lebenswichtigen Stoffwechselreaktionen, die innerhalb einer Zelle auftreten. Bei “Stoffwechsel” die meisten Leute denken, verbinden sie es mit der “Verbrennung” oder brechen hinunter von Nährstoffen. Jedoch umfasst Stoffwechsel in der Zelle Biologie “Katabolismus”, die das brechen hinunter von Molekülen und “Anabolismus”, die die Synthese von neuen biologischen Verbindungen. Diese Prozesse Zellen mit Energie versorgen und deren Komponenten, bzw. den Aufbau.

Dieses Video wird in der großen Entdeckungen vertiefen, die für unser Verständnis des Zellstoffwechsels beigetragen haben. Wir begleiten diese mit einer Untersuchung der Schlüsselfragen im Feld, und einige der Techniken zur derzeit Stoffwechselwege zu studieren.

Lass uns tauchen Sie ein in die reiche Geschichte des zellulären Stoffwechsels.

Zwischen 1770 und 1805 durchgeführt vier Chemiker Schlüsselexperimente, die geholfen haben, um zu erklären, wie Pflanzen produzieren “Masse” zu wachsen. Ihre Arbeit führte zu die grundlegenden Photosynthese-Reaktion, die ergab, dass in der Sonne, Pflanzen in Kohlendioxid und Wasser und Sauerstoff und organischem Material produzieren. Später in den 1860er Jahren festgestellt Julius von Sachs, dass dieses organische Material Stärke, war die der Zucker Glucose besteht.

So produzieren Pflanzen Zucker. Aber wir verbrauchen es. So was passiert mit dem Zucker in unserem Körper? Eine mögliche Antwort kam in den 1930er Jahren, als Gustav Embden, Otto Meyerhof und Jacob Parnas Glykolyse, der Weg beschrieben, die Glukose in Pyruvat abbaut. Wir wissen jetzt, dass die Glykolyse auch Adenosintriphosphat oder ATP produziert.

ATP Struktur wurde 1935 in Meyerhof Labor von Karl Lohmann ermittelt. Meyerhof und Lohmann vorgeschlagen, dass ATP könnte “Speichern” Energie, die durch Fritz Lipmann 1941 bestätigt wurde, identifiziert die energiereichen Bindungen in ATP und eine Theorie, durch die diese Anleihen während der Biosynthese genutzt werden könnte.

Parallel festgestellt Hans Krebs, dass die Oxidation von Glukose oder Pyruvat durch eine Reihe von Säuren, stimuliert werden könnte, die zyklische Reaktionen bilden die Tricarboxylic Säure Zyklus, abgekürzt als den TCA-Zyklus gehören. Sein Hauptbeitrag wurde darauf hingewiesen, dass Oxalacetat und Pyruvat, Citrat, konvertiert werden, könnte die Oxidation Serie ihrer zyklische Form gab.

Im Jahr 1946 erläutert Lipmann und Nathan Kaplan weiter die Reaktion, die Umwandlung von Pyruvat zu Citrat mit ihrer Entdeckung von Coenzym a. Wir wissen jetzt, dass Pyruvat interagiert mit diesem Enzym Acetyl-Coenzym A, zu bilden, die den TCA-Zyklus startet.

Später, zwischen den 1950er und 1970er Jahren festgestellt Forscher, dass Elektronen freigegeben während des TCA-Zyklus zu Proteinkomplexe befindet sich in den Mitochondrien in einen Weg die Elektronentransport-Kette namens “durchgeführt” können. Wichtig ist, im Jahr 1961 Peter Mitchell vorgeschlagen, dass die Übertragung von Elektronen zwischen diesen komplexen produziert ein Proton “Gradient”, die die Produktion von die meisten von einer Zelle ATP fahren konnte.

Zusammengenommen, die Entdeckungen der Photosynthese, haben Glykolyse, den TCA-Zyklus und der Elektronentransport-Kette die Grundlage, auf die heutige Studien des Zellstoffwechsels jetzt Rest gebildet.

Obwohl diese historische Entdeckungen immense Einblick in Stoffwechselwege zur Verfügung gestellt haben, haben sie auch mehrere Fragen angespornt. Betrachten wir einige von denen, die unbeantwortet bleiben.

Heute suchen Forscher wie Stoffwechselwege von ökologischen Stressoren wie Giftstoffen oder Strahlung betroffen sind. Vor allem gibt es Interesse an wie solche Faktoren die abnormale Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies wie freie Radikale, die Sauerstoffatome ergeben, so dass sie hochreaktive ungepaarte Elektronen besitzen. Diese Moleküle können andere Zellbestandteile schädigen und oxidativem Stress führen.

Oxidativer Stress hat in zellulären Seneszenz und Tod, und auch in der Initiierung und Progression von Krebs in Verbindung gebracht. Daher sind Zellbiologen interessiert bei der Bestimmung, wie diese reaktive Spezies einer Zelle normalen physiologischen Prozesse wie Zellteilung auswirken. Mit diesen Informationen können sie weiter die Rolle dieser Arten in pathologische Ereignisse ableiten.

Schließlich mehrere Forscher interessieren sich Stoffwechselstörungen – Bedingungen, in denen bestimmte Stoffwechselreaktionen gestört sind. Dazu gehören Krankheiten wie Diabetes, wo der Körper nicht in der Lage ist, Zucker zu verstoffwechseln. Forscher versuchen derzeit identifizieren Faktoren wie Gene oder Umwelt Hinweise, die zu solchen Krankheiten beitragen. Dies hilft ihnen letztlich bei der Entwicklung wirksamer Therapien für Patienten.

Nun, da Sie ein paar Fragen auf dem Gebiet des zellulären Stoffwechsels gehört haben, betrachten wir die experimentellen Techniken, die Wissenschaftler verwenden, um sie zu lösen.

Das ultimative Ziel vieler katabole Prozesse in lebenden Zellen ist zum Generieren von ATP, die Primärenergie Lagerung von Zellen verwendet wird. Daher können Techniken wie die Probe, ATP Biolumineszenz, die ATP in einer Probe mit Hilfe des eine Lumineszenz Reaktion quantifiziert, Einblick in die Stoffwechselaktivität der Zellen.

Andere Methoden konzentrieren sich auf spezifische Stoffwechselwege. Beispielsweise können die Forscher den Stoffwechsel von Glykogen in seinen Monomer Glucose auswerten. Eine Möglichkeit, dies zu tun ist, Glukose aus Glykogen in Produkten, die reagieren mit Erkennung von Sonden und induzieren eine Farbänderung oder Fluoreszenz abgeleitet zu verarbeiten. Auf diese Weise können Forscher berechnen, wie viel Glykogen in ihre Proben ursprünglich vorhanden war.

Im Gegensatz dazu kann abnorme Stoffwechsel durch Messung von reaktiven Sauerstoffspezies erkannt werden. Im Allgemeinen verwenden die Forscher eine Sonde, die nach “angegriffen” von einem Mitglied dieser Spezies fluoresziert. Diese Tests direkt die Menge an reaktiven Sauerstoff-Metabolite zu quantifizieren und ermöglichen somit bei der Erkennung von oxidativem Stress.

Zu guter Letzt analysieren Forscher Stoffwechsel organismal Ebene durch “Metabolic Profiling.” Mit Hilfe moderner Methoden wie high-Performance liquid Chromatography, HPLC, und Massenspektrometrie oder MS können Wissenschaftler Metaboliten in biologischen Proben anwesend zu quantifizieren und feststellen, ob bestimmte Stoffwechselwege ins Stocken geraten oder Überfunktion sind.

Mit all diesen Tools zur Verfügung Mal sehen, wie Wissenschaftler setzen sie für Versuchszwecke.

Einige Wissenschaftler wenden diese Methoden, um neue Wege zur diagnose von Stoffwechselstörungen zu entwickeln. Hier wurde ein Protokoll entwickelt, um die peripheren mononukleären Blutzellen oder PBMCs, vom Patienten Blutproben bei der Beurteilung ihres Inhalts Glykogen zu isolieren. Mithilfe einer Glykogen-Stoffwechsel-spezifische Färbung Assay erhielten Forscher Einblicke in die Menge an Glykogen in diesen Proben vorhanden. In Zukunft könnten Anwendungen, diese Technik dazu beitragen, Patienten mit Glykogen-Stoffwechsel-Erkrankungen zu diagnostizieren.

Andere Forscher sind diese Tools verwenden, um die Wirkung der Umweltbelastung auf Stoffwechsel untersuchen. In diesem Experiment gemessen Wissenschaftler reaktiven Sauerstoff-Spezies in den Zebrafish Embryos mit einem chemischen namens Rotenon behandelt, oder nach Schaden an ihren Schwänzen. Dies geschah mit Hilfe einer Sonde, die rot, wenn Sie von reaktiven Sauerstoffspezies gezielt fluoresziert. Nachfolgende Beurteilung des ganzen Embryonen ergab erhöhte Produktion von diesen Molekülen als Reaktion auf Verletzungen und chemische Belichtung, was eine schützende Rolle dieser Metaboliten.

Schließlich untersuchen Zellbiologen auch die metabolischen Eigenschaften von Krebszellen. Forscher sammelten hier den Inhalt der menschlichen Darmkrebszellen, und dieser Extrakt zu metabolic profiling mit HPLC und MS. Dies konnten Forscher identifizieren Metaboliten in das erkrankte Gewebe vorhanden.

Sie habe nur Jupiters Einführungsvideo zu zellulären Stoffwechsels beobachtet. Viele komplexe Wege beschreiben die Stoffwechselaktivität der Zellen, und jetzt wissen Sie, wie diese Wege wurden entdeckt, und wie Forschungen noch versuchen zu entschlüsseln, die unbekannten Komponenten. Denken Sie daran, den Stoffwechsel ist gut, aber zuviel an etwas schädlich sein kann. Wie immer vielen Dank für das ansehen!

Transcript

Cell metabolism refers to the vital metabolic reactions that occur within a cell. When most people think of “metabolism,” they associate it with the “burning” or breaking down of nutrients. However, in cell biology metabolism encompasses “catabolism,” which is the breaking down of molecules, and “anabolism,” which is the synthesis of new biological compounds. These processes provide cells with energy, and help build their components, respectively.

This video will delve into the major discoveries that have contributed to our understanding of cell metabolism. We’ll follow this up with an examination of key questions in the field, and some of the techniques currently used to study metabolic pathways.

Let’s dive into the rich history of cellular metabolism.

Between 1770 and 1805, four chemists performed key experiments, which helped to explain how plants produce “mass” to grow. Their work led to the basic photosynthesis reaction, which established that in sunlight, plants take in carbon dioxide and water, and produce oxygen and organic material. Later in the 1860’s, Julius von Sachs determined that this organic material was starch, which is composed of the sugar glucose.

So, plants produce sugar. But, we consume it. So what happens to the sugar in our bodies? A potential answer came in the 1930’s, when Gustav Embden, Otto Meyerhof, and Jacob Parnas described glycolysis, the pathway that breaks down glucose into pyruvate. We now know that glycolysis also produces adenosine triphosphate or ATP.

ATP’s structure was determined in 1935 in Meyerhof’s laboratory by Karl Lohmann. Meyerhof and Lohmann proposed that ATP could “store” energy, which was confirmed by Fritz Lipmann in 1941, who identified the energy-rich bonds in ATP and provided a theory by which these bonds could be harnessed during biosynthesis.

In parallel, Hans Krebs found that the oxidation of glucose or pyruvate could be stimulated by a number of acids, all of which are a part of cyclic reactions forming the tricarboxylic acid cycle, abbreviated as the TCA cycle. His major contribution was noting that oxaloacetate and pyruvate could be converted to citrate, which gave this oxidation series its cyclical form.

In 1946, Lipmann and Nathan Kaplan further elucidated the reaction converting pyruvate to citrate with their discovery of coenzyme A. We now know that pyruvate interacts with this enzyme to form acetyl-coenzyme A, which launches the TCA cycle.

Later, between the 1950’s and 1970’s, researchers determined that electrons released during the TCA cycle could be “carried” to protein complexes located in mitochondria in a pathway called the electron transport chain. Importantly, in 1961 Peter Mitchell proposed that the transfer of electrons between these complexes produces a proton “gradient,” which could drive the production of the majority of a cell’s ATP.

Taken together, the discoveries of photosynthesis, glycolysis, the TCA cycle, and the electron transport chain have formed the foundation upon which today’s studies of cellular metabolism now rest.

Although these historical discoveries have provided immense insight into metabolic pathways, they have also spurred several questions. Let’s review some of those that remain unanswered.

Today, researchers are looking at how metabolic pathways are affected by environmental stressors like toxins or radiation. In particular, there is interest in how such factors result in the abnormal production of reactive oxygen species like free radicals, which possess unpaired electrons on oxygen atoms, making them highly reactive. These molecules can damage other cellular components and result in oxidative stress.

Oxidative stress has been implicated in cellular senescence and death, and also in the initiation and progression of cancer. Therefore, cell biologists are interested in determining how these reactive species affect a cell’s normal physiological processes, such as cell division. With this information, they can further deduce the role of these species in pathological events.

Finally, several researchers are interested in metabolic disorders—conditions in which specific metabolic reactions are disrupted. These include diseases like diabetes, where the body is unable to metabolize sugar. Researchers are currently trying to identify factors, such as genes or environmental cues, which contribute to such diseases. This will ultimately help them in developing more effective therapies for patients.

Now that you’ve heard a few pressing questions in the field of cellular metabolism, let’s review the experimental techniques scientists are using to address them.

The ultimate goal of many catabolic processes in live cells is to generate ATP, which is the primary energy storage molecule used by cells. Therefore, techniques like the ATP bioluminescence assay, which quantifies ATP in a sample with the help of a luminescence reaction, can provide insight into cells’ metabolic activity.

Other methods focus on specific metabolic pathways. For example, researchers can evaluate the metabolism of glycogen into its monomer glucose. One way to do this is to process glucose derived from glycogen into products that will react with detecting probes and induce a color change or fluorescence. In this way, researchers can calculate how much glycogen was originally present in their samples.

In contrast, abnormal metabolism can be detected by measuring reactive oxygen species. Commonly, researchers use a probe that fluoresces after being “attacked” by a member of these species. These assays directly quantify the amount of reactive oxygen metabolites, and therefore help in the detection of oxidative stress.

Finally, researchers analyze metabolism at the organismal level by “Metabolic Profiling.” With the help of advanced methods like high performance liquid chromatography or HPLC, and mass spectrometry or MS, scientists can quantify metabolites present in biological samples, and determine if certain metabolic pathways are stalled or overactive.

With all of these tools at their disposal, let’s see how scientists are putting them to experimental use.

Some scientists are applying these methods to develop new ways to diagnose metabolic disorders. Here, a protocol was developed to isolate peripheral blood mononuclear cells, or PBMCs, from patient blood samples in order to assess their glycogen content. By using a glycogen metabolism-specific staining assay, researchers gained insight into the amount of glycogen present in these samples. In future applications, this technique could help diagnose patients with glycogen metabolic diseases.

Other researchers are using these tools to study the effect of environmental stress on metabolism. In this experiment, scientists measured reactive oxygen species in zebrafish embryos treated with a chemical called rotenone, or following damage to their tails. This was done with the help of a probe that fluoresces red when targeted by reactive oxygen species. Subsequent assessment of whole embryos revealed increased production of these molecules in response to injury and chemical exposure, suggesting a protective role of these metabolites.

Finally, cell biologists are also studying the metabolic characteristics of cancer cells. Here, researchers collected the contents of human colon cancer cells, and subjected this extract to metabolic profiling using HPLC and MS. This allowed researchers to identify metabolites present in this diseased tissue.

You’ve just watched JoVE’s introductory video to cellular metabolism. Many complex pathways describe the metabolic activity of cells, and now you know how these pathways were discovered, and how researches are still trying to decipher the unknown components. Remember, metabolism is good, but excess of anything can be harmful. As always, thanks for watching!