Transurethrale Instillation Verfahren bei erwachsenen männlichen Maus

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die transurethrale Kathetereinführung für die intravesikale Abgabe von Wirkstoffen in die Harnblase und/oder Prostata von adulten männlichen Mäusen zu verwenden. Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselfragen auf dem Gebiet der Blasenpathologie zu beantworten, wie die zugrunde liegenden Mechanismen untersucht werden können, die an Erkrankungen der unteren Harnwege bei Männern beteiligt sind. Die Hauptvorteile dieser Technik bestehen darin, dass sie zur Induktion von Tiermodellen für die Blasenpathologie und zur Bewertung der Wirksamkeit der intravesikulären Behandlung verwendet werden kann.

Transurethra-Instillation bei Männern ist aufgrund der natürlichen Krümmung der Harnröhre, der Dünnheit der Harnröhrenwand und der Notwendigkeit einer wiederholten Instillation von Wirkstoffen eine Herausforderung. Bevor Sie mit dem Eingriff beginnen, wählen Sie die PE-Schlauchgröße basierend auf dem Zielorgan und dem Alter des Tieres aus und schneiden Sie ein etwa 2,5 Zoll langes Stück aus dem Schlauch ab. Stumpfen Sie die scharfe Kante einer Nadel vergleichbarer Größe auf einem handelsüblichen Ölstein und führen Sie die Nadel vorsichtig in das Lumen eines Endes des Schlauchs ein.

Tauchen Sie dann die Nadel und den Schlauch in 70 % Ethanol und spülen Sie beide Teile mit Ethanol, um zu bestätigen, dass keine Leckage vorliegt. Massieren Sie anschließend mit sanftem Druck den Unterbauch der Maus, um die Blasenentleerung herbeizuführen. Legen Sie dann das betäubte Tier auf eine warme Heizdecke.

Bestätigen Sie nach dem Platzieren des Nasenkonus, dass es keine Reaktion auf das Einklemmen der Zehen gibt, und ziehen Sie die Vorhaut zurück. Üben Sie mit Daumen und Zeigefinger einer Hand Druck auf die Schamregion aus und ziehen Sie mit Daumen und Zeigefinger der anderen Hand die Eichel heraus. Entfernen Sie den Schlauch und den Katheter vom Ethanol.

Spülen Sie den Schlauch und die Nadel mit steriler Kochsalzlösung aus und laden Sie die Nadel auf eine 1-ml-Spritze, die das gewünschte Inokulum enthält. Schmieren Sie die Spitze des Katheters und die Eichel mit sterilem chirurgischem Gleitmittel. Fassen Sie die Spitze des Penis vorsichtig mit einer stumpfen Pinzette und üben Sie sanften Druck auf die Eichel aus, um den Harnröhrengang zu öffnen.

Führen Sie den PE-Schlauch vorsichtig mit einem Stativ-Fingergriff in den Meatus ein und stellen Sie den Winkel der Nadel so ein, dass er der Krümmung der Harnröhre folgt. Wenn der Schlauch das entsprechende Organ erreicht hat, drücken Sie den Kolben, um das volle experimentelle Volumen des Inokulums einzuflößen. In diesen repräsentativen Bildern wurde ein PE-52-Schlauch verwendet, um die transurethrale Instillation eines blauen Farbstoffs in die Harnblase der Maus zu erleichtern, und ein PE-10-Schlauch wurde verwendet, um die Samenbläschen und die vordere Prostata eines zweiten Tieres einzufärben.

Eine histologische Untersuchung der Harnleiter oder Nieren wird jedoch dringend empfohlen, um zu bestätigen, dass keine indirekte Kontamination der Harnleiter oder Nieren durch transurethrale Instillationen vorliegt. Einmal gemeistert, kann diese Technik innerhalb von 10 bis 15 Minuten durchgeführt werden, wenn sie richtig ausgeführt wird. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie eine Transurethra-Katheterisierung bei einer erwachsenen männlichen Maus durchgeführt wird.