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Stenose der minderwertigen Vena Cava: ein Mausmodell der tiefen Venenthrombose
Stenose der minderwertigen Vena Cava: ein Mausmodell der tiefen Venenthrombose
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Stenosis of the Inferior Vena Cava: A Murine Model of Deep Vein Thrombosis

Stenose der minderwertigen Vena Cava: ein Mausmodell der tiefen Venenthrombose

Full Text
25,892 Views
05:37 min
December 22, 2017

DOI: 10.3791/56697-v

Holly Payne1, Alexander Brill1

1Institute of Cardiovascular Sciences, College of Medical and Dental Sciences,University of Birmingham

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Wir beschreiben hier Stenose in der minderwertigen Vena Cava als ein Mausmodell der tiefen Venenthrombose. Dieses Modell rekapituliert Blut fließen Einschränkung, einer der wichtigsten Auslöser von venösen Thrombosen in den Menschen.

Das übergeordnete Ziel dieses chirurgischen Eingriffs ist es, eine Stenose der unteren Hohlvene zu schaffen, um eine Durchblutungsverzerrung für die Einleitung einer tiefen Venenthrombose nachzuahmen. Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen im Bereich der Venenthrombose zu den Mechanismen der Entstehung tiefer Venenthrombosen zu beantworten. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie eine Durchblutungsstörung simuliert, einen Schlüsselmechanismus für die Thromboseauslösung in den Venen.

Die

visuelle Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da die Trennung der unteren Hohlvene von der Aorta und das Schaffen des Lochs zwischen diesen Geweben verbal schwer zu erklären sind. Beginnen Sie damit, den Bauch einer acht bis 12 Wochen alten, betäubten 19 bis 25 Gramm schweren Maus zu rasieren und legen Sie die Maus in Rückenlage auf ein Heizkissen. Desinfizieren Sie die exponierte Haut mit einem sterilen Wattestäbchen dreimal mit einer antibakteriellen Lösung.

Bestätigen Sie den angemessenen Sedierungsgrad durch fehlendes Ansprechen auf das Einklemmen der Zehen und bedecken Sie die Maus mit einem sterilen Tuch mit einem Loch über der Operationsstelle. Machen Sie unter einem Präpariermikroskop einen Schnitt entlang der Bauchmittellinie, beginnend 1,5 Zentimeter unterhalb des Brustbeins, und verwenden Sie Wattestäbchen, um den Darm auf der linken Seite des Tieres nach außen zu verlegen. Decken Sie das Darmgewebe mit steriler Gaze ab, die in 37 Grad heißer Kochsalzlösung getränkt ist.

Platzieren Sie Geweberetraktoren, um den Schnitt zu erweitern und die untere Hohlvene (IVC) und ihre Seitenäste kaudal zur linken Nierenvene zu lokalisieren. Ziehe mit einer Pinzette am Fettgewebe, das die Seitenäste umgibt, nach oben und verwende dann eine zweite Pinzette, um einen Tunnel unter dem Ast zu graben. Und ligieren Sie alle Seitenäste so nah wie möglich an der IVC mit 7-0 inerten Prolene-Nähten.

Halten Sie das umgebende Gewebe mit einer Pinzette fest und ziehen Sie die IVC nach oben und links, um in dem kleinen Bereich zwischen der IVC und der Aorta, genau zwischen der IVC und der linken Nierenvene, Spannung zu erzeugen. Führen Sie eine zweite Pinzette zwischen der Aorta und der IVC ein und öffnen und schließen Sie die Pinzette nicht mehr als drei- bis fünfmal, um ein Loch zu bohren. Es ist sehr wichtig, das Loch genau an der Stelle zu bohren, an der die IVC mit der linken Nierenvene zusammentrifft.

Platzieren Sie mit der linken Hand ein zwei Zentimeter langes Stück 7-0 inertes Prolen-Naht in die linke Seite der Bauchhöhle, in der Nähe der IVC, und ziehen Sie die IVC nach oben und wieder nach links. Führen Sie die zweite Pinzette in das Loch zwischen der Aorta und der IVC ein, so dass die Spitzen auf der anderen Seite der IVC erscheinen, und ziehen Sie die Naht zurück durch das Loch. Machen Sie einen lockeren provisorischen Knoten und setzen Sie einen 30 Gauge Nadelabstandshalter, zu einem Haken gebogen, in den Knoten ein.

Nachdem Sie den Knoten festgezogen haben, entfernen Sie den Abstandshalter und verwenden Sie ein Wattestäbchen, um den Darm wieder in die Bauchhöhle zu bringen. Verschliessen Sie das Peritoneum mit einer 6-0 VICRYL-Naht und verschließen Sie die Haut mit Metallklammern. Injizieren Sie der Maus subkutan 0,5 Milliliter 37 Grad Celsius Glucosalin.

Setzen Sie dann die Maus in einen einzelnen Käfig in einer 25 Grad Celsius heißen Kammer, in der sich Futter und Gelwasser befinden, und überwachen Sie sie, bis sie sich vollständig erholt. Die Induktion einer Stenose in der IVC führt zu einer Verzerrung und Stagnation des Blutflusses, die zur Entwicklung eines Thrombus führt, der strukturell den beim Menschen beobachteten tiefen Venenthromben ähnelt und makroskopisch leicht sichtbar gemacht werden kann. Darüber hinaus wird in diesem IVC-Stenosemodell ein erhöhtes D-Dimer, ein Produkt des Fibrinabbaus, im Plasma beobachtet, was auf das Vorhandensein eines aktiven thrombotischen Prozesses hinweist, der dem beim Menschen beobachteten ähnelt.

Obwohl die meisten Versuchstiere in diesem Modell Thromben produzierten, ist ein großer Nachteil die Variabilität innerhalb der Größe der Thromben, die zwischen den Tieren beobachtet wird. Einmal gemeistert, kann diese Technik in 15 Minuten abgeschlossen werden, wenn sie richtig ausgeführt wird. Nach ihrer Entwicklung ebnete diese Technik den Weg für Forscher auf dem Gebiet der Venenthrombose, um die Mechanismen der TVT im Mausmodell zu erforschen.

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Ausgabe 130 tiefe Venenthrombose Mausmodell minderwertige Vena Cava Immunologie Stenose

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