Proliferation und Differenzierung der murinen Myeloid Precursor 32D/G-CSF-R Zellen

Das übergeordnete Ziel dieses Experiments ist es, die myeloischen 32D-G-CSF-R-Zellen der Maus genetisch zu modifizieren, indem das interessierende Gen überexprimiert oder stummgeschaltet wird und der Effekt dieser Veränderungen auf die Proliferation und neutrophile Differenzierung der Zelllinie bestimmt wird. Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen auf dem Gebiet der Hämatologie zu beantworten, z. B. wie das gewünschte Protein am Wachstum und der Differenzierung myeloischer Vorläuferzellen beteiligt sein kann. Der Hauptvorteil dieser Zelllinie besteht darin, dass sie über eine unbegrenzte Proliferationskapazität verfügt, anfällig für genetische Manipulationen ist, die Kosten relativ niedrig sind und ein gewisses Maß an biologischer Vereinfachung ermöglichen, das bei bestimmten experimentellen Ansätzen erforderlich ist.

Petr Danek, Doktorand in meinem Labor, wird das Verfahren heute vorführen. Bereiten Sie 250 Milliliter RPMI-1640 Medium vor, ergänzt mit hitzeinaktiviertem 10%igem fötalem Rinderserum und 10 Nanogramm pro Milliliter murinem Interleukin-3. Bereiten Sie dann 50 Milliliter Differenziermedium vor.