Ein einfaches Hocheffizienzprotokoll für die Isolierung von Pankreas-Isleten von Mäusen

Dieses Protokoll erfordert die Verwendung eines einzigen Dichtegradienten, der es im Vergleich zu komplexeren konventionellen Islet-Isolationsmethoden deutlich arbeitsintensiver und kostengünstiger macht. Der Hauptvorteil dieses Protokolls ist, dass das Enzym direkt an die Bauchspeicheldrüse abgegeben wird, was zu einer verbesserten Gewebeverdauung und einer erhöhten Islet-Ausbeute führt. Beginnen Sie, indem Sie die Gliedmaßen der Maus in der Supine-Position kleben und den Körper mit 70% Ethanol besprühen.

Mit CoverglassZangen und gekrümmten chirurgischen Scheren, machen Sie einen etwa drei Zentimeter horizontalen Bauchhautschnitt und ziehen Sie die Haut auf, um die Bauchwand freizulegen. Machen Sie einen vertikalen Schnitt von drei bis vier Zentimetern am Bauchperitoneum, um die Bauchspeicheldrüse vollständig freizulegen und die Maus unter ein Sezierendes Mikroskop zu stellen. Drücken Sie den Leberlappen überlegen, um den Gallengang freizulegen, der als blassrosa Röhre erscheint, und bewegen Sie den Darm sanft von der rechten Lenden- und Iliasregion nach rechts von der Bauchhöhle, um den Gallengang und die Leberarterie freizulegen.