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DOI: 10.3791/57365-v
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Hier bieten wir eine Methode zum Identifizieren und isolieren große Zahlen von GM-CSF myeloische Zellen unter Verwendung von high-Speed Zellsortierung angetrieben. Fünf verschiedene Populationen (gemeinsame myeloischen Vorläuferzellen, Vorläuferzellen der Granulozyten/Makrophagen, Monozyten, Monocyte abgeleitet Makrophagen und Monocyte abgeleitet DCs) können identifiziert werden, basierend auf Ly6C und CD115 Ausdruck.
Diese Methode kann es Forschern ermöglichen, eine ausreichende Anzahl von Zelltypen zu gewinnen, um zentrale Fragen der Entwicklungsimmunologie zu beantworten. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie auf wenigen ausgewählten Markern beruht, um eine große Anzahl von Zellen zu isolieren, die traditionell ex vivo in geringer Anzahl vorkommen. Die Implikation dieser Technik erstreckt sich auch auf die therapeutische Knochenmarktransplantation, da sie die Isolierung einer großen Anzahl von Vorläuferzellen ermöglicht.
Um das Protokoll zu beginnen, sättigen Sie die Hinterbeine und den Oberkörper einer zuvor präparierten Maus mit 75 % Ethanol und machen Sie mit einer gebogenen Gewebeschere flache Schnitte durch die Haut um das Hüftgelenk. Entfernen Sie dann die Hinterbeine und streifen Sie sie. Ziehen Sie die Haut mit einer Pinzette fest von der Hüfte nach unten in Richtung Knöchel, so dass der Muskel zum Vorschein kommt, und entfernen Sie mit einer Schere den Hautlappen.
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