Präklinische Bewertung der Bioaktivität der Anti-Krebs Cumarin OT48 Sphäroide, Kolonie Bildung Assays und Zebrafisch Xenotransplantate

Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselfragen im Bereich der Wirkstoffforschung zu beantworten, um die Anti-Krebs-Wirkung zu identifizieren und einen besseren mechanistischen Einblick in neuartige Moleküle unter Verwendung von in vitro- und in vivo 3D-Kultursystemen zu gewinnen. Der Hauptvorteil dieser Technik ist die Vielfalt der pharmakologischen Wirkung von Verbindungen in einem physiologisch relevanteren in vivo-Modell. Zu Beginn werden 20.000 A549-Zellen pro Quadratzentimeter in 15 Milliliter RPMI 1640 Zellkulturmedium, ergänzt mit 10 % FBS und 1 % Antibiotika, in einem 75 Quadratzentimeter großen Kolben abgefüllt.

Inkubieren Sie die Kultur bei 37 Grad Celsius und 5 % CO2. Verwenden Sie am Tag des Experiments ein Hämozytometer, um die Zellkonzentration zu bestimmen. Sammeln Sie 50.000 Zellen in einem 1,5-Milliliter-Mikrozentrifugenröhrchen durch Zentrifugation bei 400 g für sieben Minuten und resuspendieren Sie die Zellen in 100 Mikrolitern sterilem 1x PBS.