Eine schnelle und Facile Pipeline für die Erzeugung von Genomic Punkt Mutanten in C. Elegans verwenden CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist die Generierung genomischer Punktmutationen in C.Elegans unter Verwendung von einzelsträngigen Oligonukleotid-Homologie-gerichteten Reparatur-Templates und CRISPR/Cas9-Ribonukleoproteinen. Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselfragen im Bereich der Neurowissenschaften zu beantworten, wie z. B. die Bestimmung der pathologischen Folgen der genetischen Varianz im Zusammenhang mit neurodegenerativen Erkrankungen. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass genomische Punktmutationen schnell erzeugt werden können, was die funktionelle Untersuchung genetischer Varianz im Rahmen einer endognösen regulatorischen Kontrolle ermöglicht und gleichzeitig die Vorbehalte einer Proteinüberexpression vermeidet.

Um die sgRNA-Zielauswahl durchzuführen, öffnen Sie die hier gezeigte Webseite. Geben Sie ca. 60 Basenpaare der Sequenz ein, die die gewünschte Bearbeitung von Interesse flankieren. Nachdem Sie das C.Elegans-Genom und das an den Protospacer angrenzende Motiv gemäß dem Textprotokoll ausgewählt haben, klicken Sie auf Senden.