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Virus-Lieferung von CRISPR führt zu der murinen Prostata für gen-Änderung
Virus-Lieferung von CRISPR führt zu der murinen Prostata für gen-Änderung
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JoVE Journal Cancer Research
Virus Delivery of CRISPR Guides to the Murine Prostate for Gene Alteration

Virus-Lieferung von CRISPR führt zu der murinen Prostata für gen-Änderung

Full Text
9,179 Views
06:21 min
April 27, 2018

DOI: 10.3791/57525-v

Maria Riedel1, Martin F. Berthelsen1, Latifa Bakiri2, Erwin F. Wagner2, Martin K. Thomsen1

1Department of Clinical Medicine,Aarhus University, 2GDD, Cancer Cell Biology Program,National Cancer Research Center (CNIO)

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Dieses Protokoll beschreibt eine neu gegründete Methode für Virus-Lieferung an der murinen Prostata. Mit CRISPR/Cas9 Technologie, Überexpression des Gens oder Cre-Rekombinase-Lieferung, die Technik erlaubt orthotopen Veränderung der Genexpression und implementiert eine neue Maus-Modell für Prostatakrebs.

Das übergeordnete Ziel dieses chirurgischen Eingriffs ist es, die Genexpression in der murinen Prostata durch virale Verabreichung von CRISPR-Cas9-Guides zur Induktion von Prostatakrebs zu verändern. Diese Methode kann dazu beitragen, neue Fragen in der Prostatakrebsbiologie in Bezug auf die Analyse und Validierung neuer Gene in einem in vivo-Setting zu beantworten. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie eine schnelle Geneditierung mehrerer Gene ermöglicht, indem nur eine Teilmenge der Prostatazellen angesprochen wird, wie es im menschlichen Szenario zu sehen ist.

Jemand, der neu in dem Verfahren ist, kann anfangs Schwierigkeiten haben, wegen der Organgröße und der Präzision, die für einen erfolgreichen chirurgischen Abschluss erforderlich ist. Um ein Gesamtvolumen von 5 Millilitern Anästhetikum frisch zuzubereiten, mischen Sie 0,15 Milliliter eines mg pro Milliliter Medetomidinhydrochlorid, 0,4 Milliliter von 5 mg pro Milliliter Midazolam und 0,25 Milliliter von 10 mg pro Milliliter Butorphenol. Fügen Sie dann 4,2 Milliliter steriles Salzwasser hinzu.

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Cancer Research Ausgabe 134 Prostatakrebs Genom-Bearbeitung Gentherapie gen-Veränderung Virus-Lieferung Virus Injektion CRISPR/Cas9 Adeno-assoziierten Virus in Vivo Tumor Modell Tumorentstehung

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