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DOI: 10.3791/57553-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Invasive Instrumentierung des fetalen Lamms bietet genaue physiologische Messungen der Übergang Zirkulation in einem Modell, das genau das neugeborene Kind imitiert.
Dieses Modell kann helfen, Schlüsselfragen im Bereich der Wiederbelebung von Neugeborenen und der Geburtsasphyxie zu beantworten. Der Hauptvorteil dieses Modells besteht darin, dass wir die physiologischen Veränderungen während des Übergangs vom Fötus zum Neugeborenen mit unseren bekannten Instrumenten genau untersuchen können. Die Auswirkungen dieser Technik erstrecken sich sowohl auf die Therapie der Geburtsasphyxie als auch auf die hypoxische ischämische Enzephalopathie.
Forscher, die neu in dieser Methode sind, könnten Schwierigkeiten haben, da es viele Schritte gibt, die speziell für diese Spezies und unser beabsichtigtes instrumentelles Ziel entwickelt wurden. Die visuelle Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da bei der Platzierung der pulmonalen und duktalen Flusssonden während des Eingriffs mit offenem Brustkorb besondere Sorgfalt geboten ist. Um den Kaiserschnitt durchzuführen, verwenden Sie einen Kauterisationskauter, um einen 15 bis 18 Zentimeter großen Bauchhautschnitt über der Linea alba eines anästhesierten schwangeren Mutterschafs zu machen, um die Faszie freizulegen, und verwenden Sie eine stumpfe Schere, um den Schnitt zu erstellen und zu verlängern.
Nachdem Sie den Kopf des Fötus lokalisiert und nach außen gebracht haben, halten Sie den Kopf mit einer Hand fest und verwenden Sie den Kauter, um einen 10 Zentimeter langen Schnitt durch die Gebärmutterwand über der Stirn des Tieres zu machen. Verwenden Sie einen 3 1/2 bis 4 1/2 Millimeter langen Endotrachealtubus mit Manschette, um das teilweise exponierte Tier zu intubieren und die Manschette aufzublasen, neigen Sie dann den Kopf zur Seite, damit die überschüssige fetale Lungenflüssigkeit passiv abfließen kann, und verschließen Sie den Endotrachealtubus, um die spontane Atmung einzuschränken. Für die Instrumentierung der Halsgefäße ist die Haut zu zelten und eine subkutane Analgesie auf jeder Seite des Halses des fötalen Tieres etwa sechs Zentimeter entfernt vom Kopf neben der Luftröhre zu verabreichen und einen einzelnen, drei Zentimeter langen Hautschnitt auf jeder Seite des Halses durch Kauter vorzunehmen.
Isolieren Sie die rechte Vena jugularis externa und die rechte Arteria carotis communis durch stumpfe Dissektion der Faszie und legen Sie zwei 20 Zentimeter lange Seidennähte mit einem Abstand von einem Zentimeter unter beide Gefäße. Heben Sie jede Naht vorsichtig an, um den Blutfluss einzuschränken, und verwenden Sie eine chirurgische Irisschere, um einen teilweisen ein bis zwei Millimeter breiten Querschnitt in das Gefäß zwischen den Nähten zu machen. Führen Sie einen 15- oder 17-Gauge-Katheter zur Blutdrucküberwachung und Blutentnahme in die rechte Halsschlagader kaudal in Richtung des Aortenbogens ein.
Führen Sie einen 14- oder 16-Gauge-Katheter mit vorgespültem Katheter sieben bis 10 Zentimeter kaudal in die Halsvene in Richtung des rechten Vorhofs ein, um Flüssigkeit und Medikamente zu verabreichen. Führen Sie dann einen zweiten Katheter etwa fünf Zentimeter rostral ein, um Blut aus dem Hirnkreislauf zu sammeln. Verlängern Sie als Nächstes den linken Schnitt um ein bis zwei Zentimeter in eine T-Form.
Isolieren Sie die Halsschlagader und platzieren Sie eine zwei Millimeter große perivaskuläre Flusssonde um das Gefäß, um den Blutfluss zu messen. Stabilisieren Sie die Sonde mit einer flexiblen, ein Zentimeter großen Polymerhülse und platzieren Sie die Kabelleitung der Durchflusssonde so in den T-förmigen Schnitt, dass das Kabel parallel zum Gefäß verläuft. Schließen Sie dann den Hautschnitt und binden Sie das Kabel mit einer Schlaufe zusammen, um eine korrekte Position und ein minimales Risiko einer Verschiebung zu gewährleisten.
Für eine gute Gefäßinstrumentierung verlängern Sie die linke Vordergliedmaße hinter dem Hals, um das fötale Lamm herauszuziehen, wobei die linke Seite der Brust vollständig freigelegt wird, und decken Sie das Tier mit einer Polyethylenfolie ab, um Wärmeverlust zu vermeiden. Infiltrieren Sie subkutan drei Milliliter Analgesie entlang des vierten Interkostalraums und verwenden Sie einen Kauter, um einen sechs Zentimeter langen Hautschnitt in dieselbe Region zu setzen. Verwenden Sie eine stumpfe, gebogene Pinzette, um den Interkostalmuskel vorsichtig zu durchstechen, indem Sie die Spitzen unter der dritten Rippe kreisen und zwischen dem nächsten Interkostalraum herauskommen.
Öffnen Sie die Pinzette, um ein Stück Zero-Seide zu greifen, und ziehen Sie die Naht durch den Schnitt zurück, um die Rippe zu umschließen, und klemmen Sie dann die Bänder um die Rippe. Ziehen Sie dann vorsichtig beide Seidenkrawatten hoch und führen Sie einen Applikator mit Baumwollspitze in die Brust unter dem vierten Interkostalraum ein, um den Brustinhalt zu schützen, während Sie den Interkostalraum mit Kauter und stumpfer Dissektion auf sechs bis acht Zentimeter erweitern. Legen Sie einen Rippenspreizer in die Brustöffnung, um die linken oberen Lungenlappen und des Herzens freizulegen, die vom Perikard bedeckt sind.
Umhüllen Sie die Lunge mit einer zwei mal zwei Zoll großen Gaze und schieben Sie freiliegendes Gewebe vorsichtig aus dem Operationsbereich weg. Heben Sie mit einer Pinzette das Perikard an und schneiden Sie entlang der Lungenhauptarterie, wobei Sie darauf achten, den Vagusnerv nicht zu durchtrennen. Verwenden Sie einen Applikatorstab, um zu verhindern, dass der rechte Vorhof den seitlichen Schnitt des Perikards entlang des Vagusnervs beeinträchtigt.
Jetzt, da das Perikard offen ist, kommt die Lungenhauptarterie zum Vorschein, die sich in den Ductus arteriosus und den linken und rechten Ast der Lungenarterie aufteilt. Ein effektiver Übergang bei der Geburt wird durch die Untersuchung der Flussänderung bewertet, wenn das Blut in die Lunge gelangt, anstatt die fetale Zirkulation durch den Ductus fortzusetzen. Lokalisieren Sie die Kerbe der duktalen Lungenarterie und bewegen Sie die Gemini-Pinzette vorsichtig um und hinter die linke Lungenarterie, um die Arterie vorsichtig zu umschließen, wobei Sie die Kerbe der rechten Lungenarterie vermeiden und die Pinzette nur dann vorschieben, wenn kein Widerstand vorhanden ist.
Wenn die Spitze der Pinzette auf der anderen Seite des Gefäßes zu sehen ist, öffne die Spitzen gerade weit genug, um ein Ende eines vorangefeuchteten Stücks Nabelband zu greifen, und ziehe die Pinzette vorsichtig zurück, um das Band in Position zu bringen. Kabelbinder werden um die Gefäße gelegt, um das Einsetzen einer Durchflusssonde vorzubereiten. Heben Sie das Nabelband vorsichtig an, damit die L-Halterung einer vier bis acht Millimeter großen perivaskulären Durchflusssonde entlang der durch das Band geschaffenen Öffnung um jedes Gefäß geführt werden kann, und lenken Sie das Band zur Rückseite der Sonde, um die Durchflusssonde an ihren Platz zu bringen.
Wenn das Ende der L-Halterung sichtbar ist, sichern Sie den Schiebeverschluss und schneiden Sie vorsichtig ein Ende des Nabelbandes in der Nähe der Sonde ab, indem Sie das andere Ende des Bandes vorsichtig ziehen, um es aus dem Gefäß zu entfernen. Die Instrumentierung ist abgeschlossen, die Messung dieser Flüsse nach der Geburt gibt Aufschluss über die Lungenfunktion und den effektiven Übergang zur Luftatmung. Verwenden Sie eine konische Nadel und eine 2-0 synthetische Monofilnaht, um die Brust in Schichten zu schließen, und eine Schneidenadel und eine 2-0 Seidennaht, um die Kabel der Strömungssonden mit einer Schlaufe an der Außenhaut zu befestigen.
Um das Versuchsprotokoll zu starten, überprüfen Sie, ob der Endotrachealtubus verschlossen ist, und binden und durchtrennen Sie die Nabelschnur. Bringen Sie das Lamm in einen Strahlungswärmer und legen Sie Nabel-, Venen- und Arterienkatheter an. Nach dem Erstickungsstillstand beginnen Sie mit den Richtlinien für das Wiederbelebungsprogramm für Neugeborene mit 30 Sekunden Beatmung, gefolgt von einer Drei-zu-Eins-Thoraxkompression und der Verabreichung von Adrenalin alle drei Minuten.
Nach der Instrumentierung können hämodynamische Variablen aufgezeichnet, analysiert und interpretiert werden. Häufige Blutproben können entnommen werden, um z. B. den pH-Wert und den Sauerstoffpartialdruck der Proben zu verschiedenen Zeitpunkten während des Wiederbelebungsverfahrens beurteilen zu können. Gelegentlich kann es vorkommen, dass die Katheter oder Durchflusssonden nicht richtig funktionieren oder sich lösen, was die Datenerfassung und -analyse verhindert.
Einmal gemeistert, kann die Instrumentierung in zwei Stunden abgeschlossen werden. Es ist auch wichtig, mit einem geschulten Team mit zugewiesenen Rollen zusammenzuarbeiten, um sicherzustellen, dass alle Aufgaben konsistent erledigt werden. Das Tier in diesem Modell hat einen Übergangskreislauf und eine flüssigkeitsgefüllte Lunge, die menschliche Neugeborene nach der Entbindung simuliert, und ist daher ein hervorragendes Modell für die Untersuchung der Physiologie von Neugeborenen.
Dieses perinatale Lammmodell ähnelt einem depressiven Neugeborenen im Kreißsaal. Studien zu diesem Modell werden die Wiederbelebung von erstickten Neugeborenen weltweit optimieren.
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