Name: Dünnen Film Composite Silikon Elastomere für Zellkultur und Haut Anwendungen: Herstellung und Charakterisierung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-07-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: Lernen Sie die Herstellung und Charakterisierung von dünnen Polymerfilmen aus Silikonelastomeren für Zellkultur und Hautanwendungen. Diese Methode ermöglicht präzise Adhäsionsmessungen und biokompatible Oberflächen.

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Martin Danner ist bekannt für seine Hilfe bei der Vorbereitung von Proben und Definition der Zelle Kultur Verfahren anerkannt. Die Autoren möchten Biesterfeld Spezialchemie GmbH (Hamburg, Deutschland), vor allem Robert Radsziwill für kontinuierliche Unterstützung und Diskussionen zu danken. Die Forschung führt zu diesen Ergebnissen wird finanziell vom European Research Council unter EU Fp7 (FP/2007-2013) ERC Grant Agreement n. 340929.

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Die Autoren haben nichts preisgeben.

Das Design der composite-Strukturen ermöglicht die einfache Anpassung der Materialeigenschaften, wie des Elastizitätsmoduls oder die Dicke der Proben. Elastizitätsmodul von PDMS kann effektiv in einem breiten Spektrum durch das Mischungsverhältnis zwischen den beiden Komponenten zu verändern oder die Herstellung der Mischungen mit einem unterschiedlichen Silikon Elastomer30,31geändert werden. Die beschriebenen Methoden sind nicht beschränkt auf die PDMS in dieser Untersuchung verwendet, aber vor allem die selbstklebende Leistung hängt stark von der spezifischen Art verwendet. Ein wichtiger Schritt innerhalb dieses Protokolls ist der Herstellungsprozess von Verbundfolien (Abbildung 1). Es zeigte sich, dass die Dicke der Filme erheblich beeinträchtigt die Haftung Verhalten der Filme auf verschiedenen Substraten, einschließlich Haut (Abbildung 5 und Abbildung 6). Neben der Foliendicke Zeit und Temperatur während des Trocknungsprozesses wirkt sich die Materialeigenschaften32. Parameter wie die Dicke der Polymeren Schichten müssen daher sorgfältig angepasst und überprüft werden.
Analyse der selbstklebenden Eigenschaften dünner Schichten erfolgte mit Normalkraft Adhäsion Messungen mit zwei Glassubstraten mit verschiedenen Rauheit der Oberfläche bis zu Ra = 0.338 µm (Abbildung 3). Im Allgemeinen wirkt Rauheit deutlich die Haftung von Oberflächen, insbesondere von elastischen Materialien33,34. Die Rauheit des Glases kann leicht variiert werden, durch Schleifen mit Schleifpapier verschiedener Schroffheit Größen, daher erlauben die Herstellung von Substraten, die höhere Rauheit Werte21ausstellen. Darüber hinaus andere Materialien, z.B. Epoxidharz für die Herstellung von Substraten15,35einsetzbar. Dies könnte eine wichtige Modifikation Strategie des vorliegenden Protokolls sein. Zum Beispiel wenn Substrate mit verschiedenen Oberflächen freie Energien benötigt oder spezielle sind Topographien erforderlich. Hier wurden abziehen Stress und der Trennung von den Dünnschichten des PDMS und SSA hergestellt mit einem maßgeschneiderten Setup (makroskopische Adhäsion Messgerät (MAD, Abbildung 4)) analysiert. 36 optische Ausrichtung des Substrats und Eindringkörper ist ein entscheidender Schritt für die Analyse der Messergebnisse. Einstellung des Neigungswinkels muss daher mit dem Goniometer, so präzise wie möglich durchgeführt werden. Dies kann mit ausreichender Genauigkeit erreicht werden, indem Sie manuell das Substrat in Kontakt mit der filmoberfläche bis ein horizontale Kontakt entsteht.
Das aktuelle Protokoll wurde die Haltezeit auf eine Sekunde (Abbildung 5 und Abbildung 7) konstant gehalten. Vor allem für die Untersuchung der Klebstoff Leistung einen elastischen Film auf eine grobe Substratoberfläche stellt eine Erweiterung der Haltezeit Zusatzinformationen. Zum Beispiel wurde eine Zunahme der abziehen Stress mit zunehmendem Haltezeit gemeldeten8. Neben der Messungen in das aktuelle Protokoll, andere Methoden könnte zum Beispiel Peel Tests durchgeführt werden ermöglicht eine umfassendere Untersuchung der Haftung Leistung37.
Die Hafteigenschaften von Verbundfolien ausstellen anderen Film, die Dicke des Klebers weiche Haut ermittelt wurden (Abbildung 7). Unsere Ergebnisse sind in Übereinstimmung mit veröffentlichten Daten zeigen, dass eine Abnahme der Film Dicke führen zu einer Erhöhung der Belastung abziehen wie die Entbindung, d.h., das Verhältnis zwischen Durchmesser und Film Substratdicke, erhöht38,39 . Basierend auf diesen Ergebnissen und die Daten, die in Abbildung 7dargestellt, schließen wir, dass Verbundfolien mit einer Gesamtdicke von ca. 100 µm (Dicke der SSA-Schicht von ca. 60 µm aufgetragen zu einem PDMS-Film mit einer Dicke von ca. 40 µm) günstige Adhäsion p ausstellen Roperties auf rauen Oberflächen.
Als nächstes Experimente im Zusammenhang mit der biologischen Charakterisierung auf unberührten Verbundfolien durchgeführt wurden und Plasma behandelt Verbundfolien (Abbildung 8). Plasmabehandlung von Silikon-Elastomeren ist eine häufig angewandte, vielseitige Technik, um die hydrophilen Eigenschaften von Oberflächen und Förderung der zellulären Anlage und Mobilfunk Verbreitung40,41zu erhöhen. Silikone sind bekannt für ihre geringe Toxizität und hohe-Kompatibilität aber enthält möglicherweise Restmonomere oder Katalysatoren, die physiologische Prozesse, was auch zu Zytotoxizität42,43beeinflussen könnten. In die Experimente, die wir beobachtet haben, weniger als 5 % Zytotoxizität mit LDH Version als Indikator und ein Trypan blau-Ausschluss-Assay. Im vorgestellten Protokoll der gesamten zellulären Bevölkerung getrennt zellulären Aggregate einschließlich Form, die die Oberfläche für die Verbreitung Analyse (Abbildung 9 b) analysiert wurde. Eine Änderung des Protokolls könnte mehr differenzierte Ergebnisse produzieren. Für jede Probe konnte der Überstand mit freistehenden zellulären Aggregate auf einem separaten Reaktionsgefäß übertragen und nicht in Kombination mit der Zellen enzymatisch aus der Polymeroberfläche entfernt. Dies ermöglicht die genaue Beurteilung der Zellen an der Oberfläche befestigt und schließlich offenbaren eine genauere Bestimmung des Einflusses der Polymere auf die zelluläre Klebevorgang. Neben den hier vorgestellten Immunocytochemical Methoden möglicherweise Zellen für die Untersuchung mit Immunoblot Methoden, so dass eine detaillierte quantitative Bewertung der Proteinexpression geerntet werden.
Zusammenfassend haben wir Herstellungsbedingungen für die Herstellung von dünnen Elastomeren Verbundfolien für Anwendungen in der fortgeschrittenen Kultur Zellforschung etabliert. Darüber hinaus besitzen diese Dünnfilme hohen Anpassungsfähigkeit auf Haut, Rauheit, anspruchsvolles Design der Haut Klebstoffe ermöglichen.

In diesem Protokoll werden detaillierte Methoden für die Herstellung von dünnen Elastomer Filme vorgestellt. Die allgemein verfügbaren Arzt Klinge Technik wurde für die Herstellung von dünnen Verbundfolien eingesetzt. Die Herstellungstechnik wurde auf Polyethylenterephtalate (PET) Folien, spätere Produktion dieser Filme in großem Maßstab durchgeführt. Schwerpunkt dieses Protokolls ist die Bewertung der Reproduzierbarkeit, präzise Herstellung von den verschiedenen Schichten der Verbundfolien und Bestimmung der biologischen und Adhäsion Eigenschaften des endgültigen zusammengesetzte Patches. Die Silikon-Elastomer-poly-(dimethylsiloxane) (PDMS) wird weitgehend verwendet in der biomedizinischen Technologie, einschließlich der Herstellung von Haut-Klebstoffen, Mikrofluidik Anwendungen und zusätzliche Forschung Felder1,2,3 ,4. Vor kurzem, eine andere Unterklasse von PDMS, so genannte weiche Haut Klebstoffe (SSAs) wurden eingeführt, insbesondere für sanfte Haut kleben und de-bonding.
Silikon-SSAs sind Vinyl funktionalisiert Elastomere, abweichend von Analog Polymere durch den Mangel an Kieselsäure5zu stärken. Ähnlich wie bei anderen PDMS, SSA kann Elastizitätsmodul in einem breiten Spektrum von modulierenden Vernetzer Konzentration oder heilende Zeit6,7,8angepasst werden. Diese Veränderung des Elastizitätsmoduls von Siliconelastomeren die klebtechnischen Eigenschaften des Materials erheblich beeinträchtigt und hat auch tiefgreifende Auswirkungen auf die prokaryotischen und eukaryotischen Zellen kultiviert auf der Oberfläche9,10 , 11. auf der Zellebene biologische wurde gezeigt, daß Eukaryotische Zellen reagieren auf den Signalpegel Transduktion zu einer Modulation der Matrix Elastizität oder Dicke der Oberfläche9,10,12 ,13,14. Daher ein breites Interesse in Zelle Kultur Anwendungen von Polymeren mit einstellbaren mechanischen Eigenschaften vorhanden. Wichtig ist, bietet intrinsisch niedrige Oberflächenenergie von Siliconelastomeren basiert nicht optimale Bedingungen für die Zellkultur von eukaryotischen Zellen. Sauerstoff-Plasma-Behandlung ist eine weit verbreitete Technik, PDMS niedrige Oberflächenenergie vorübergehend, führt zu einer Steigerung der Haftzugfestigkeit erhöhen verringerte Oberfläche Adsorption von Molekülen, während parallel Anlage, Verbreitung zu fördern und Verbreitung von eukaryotischen Zellen15,16,17,18.
Neben den Materialeigenschaften beeinträchtigt der Oberflächentopographie erheblich, zelluläre Adhäsion und die selbstklebende Interaktion zwischen zwei Materialien19,20,21,22. Rauheit der Oberfläche hat verschiedene Auswirkungen auf die Kontakt zwischen zwei Flächen: Reduktion der Kontaktfläche, hohe gespeicherte elastische Energie rund um Unebenheiten sowie Einfluss auf die Rissausbreitung Haftfestigkeit23, verändern kann 24. Haftung von selbstklebenden Folien auf die menschliche Haut ist ein aufstrebendes Gebiet der Anwendung, z. B. Wundauflagen, Fixierung der EKG-Elektroden oder andere tragbare elektronische Geräte25,26,27, 28. Um den Klebstoff Leistungsmessung von selbst-Klebstoffen in Bezug auf Topographie können Glassubstrate mit unterschiedlichem Grad der Rauheit im normalen Adhäsion Messungen8,21verwendet werden. Hier wurden zwei Glassubstraten ausgewählt, um die Hafteigenschaften von Polymerfolien untersuchen. Zeichneten sich erste, zusammengesetzte Filme mit einer Trägerschicht PDMS im Mischungsverhältnis 10: 1 Gewicht Teile mit unterschiedlichen Mischungsverhältnis von PDMS abgedeckt. In einem zweiten Schritt wurde eine Klebeschicht SSA mit gleichem Gewicht Mengen beider Komponenten und mit unterschiedlichen Schichtdicken auf PDMS Vorfilm vorbereitet.

<table><tbody><tr><td>2-Propanol, 97%</td><td>Stockmeier Chemie</td><td>1000452610000</td><td>Isopropanol</td></tr><tr><td>Schleifdiamnod Handpad</td><td>Bohle</td><td>MO 5007522</td><td>Körnung: 220</td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Capricorn Scientific</td><td>ACC-1B</td><td></td></tr><tr><td>Albumin Fraktion V</td><td>Roth</td><td>0163.2</td><td>BSA</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 Phalloidin</td><td>ThermoFischer Scientific</td><td>A12379</td><td>hoch </td></tr><tr><td>giftig Aquamount</td><td>Polysciences</td><td>18606-20</td><td>wasserlösliches Einbettmedium</td></tr><tr><td>CytoTox-ONE Homogener Membranintegritätsassay</td><td>Promega</td><td>G7890</td><td></td></tr><tr><td>DPBS, ohne Ca2+, Mg2+</td><td>ThermoFischer Scientific</td><td>14190094</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum gold</td><td>GE Health Care Life Science</td><td>A15-151</td><td>FBS</td></tr><tr><td>Goniometer OCA35</td><td>Dataphysics</td><td></td><td>zur Bestimmung des statischen Wasserkontaktwinkels</td></tr><tr><td>Hoechst Farbstoff 33342</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B1155-100MG</td><td>BisBenzimid H 33342 Trihydrochlorid, hochgiftig</td></tr><tr><td>Mikroskop Axiovert 25</td><td>Zeiss</td><td></td><td>Mikroskop zur Zellkulturdokumentation</td></tr><tr><td>Mikroskop Eclipse LV100ND</td><td>Nikon</td><td></td><td>Mikroskop zur Bestimmung der Schichtdicke</td></tr><tr><td>Paraformaldehyd, wässrige Lösung 16%</td><td>Elektronenmikroskopie Sciences</td><td>RT 15710</td><td>Elektronenmikroskopie</td></tr><tr><td>Penicillin und Streptomycin Lösung</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4333-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Phenom XL Rasterelektronenmikroskop (REM)</td><td>Phenom</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Poly-(Vinylalkohol) 4-88, MW 31000</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>81381-1KG</td><td>Mowiol 4-88</td></tr><tr><td>Polydimethylsiloxane, Sylgard 184</td><td>Dow Corning</td><td>(400)000108351397</td><td>PDMS</td></tr><tr><td>RPMI 1640 Basalmedium</td><td>ThermoFischer Scientific</td><td>21875034</td><td></td></tr><tr><td>Weichhautkleber (SSA)</td><td>Dow Corning</td><td>(400)000108251792</td><td>MG 7-9800 Weichhautkleber (SSA)</td></tr><tr><td>Schnellmischer DAC 600.2 VAC-P</td><td>Hauskind</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stylus profilomter</td><td>Zeiss</td><td></td><td>Modell: SURFCOM 1500SD3</td></tr><tr><td>Tecan Infinite M200 pro</td><td>Tecan</td><td></td><td>Fluoreszenzplatten-Reader</td></tr><tr><td>Triton X 100</td><td>Calbiochem</td><td>648466</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue Lösung</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8154-100ML</td><td>hochgiftige</td></tr><tr><td>Trypsin/EDTA-Lösung</td><td>PAN-Biotech</td><td>P10-023500</td><td>0,05 % Trypsin, 0,02 % EDTA in PBS</td></tr><tr><td>UV-Kleber</td><td>Bohle</td><td>BO MV76002</td><td>mittlerer Viskosität</td></tr></tbody></table>

dünnen film composite silikon elastomere für zellkultur und haut anwendungen: herstellung und charakterisierung

Thin Film Composite Silicon Elastomers for Cell Culture and Skin Applications: Manufacturing and Characterization

In diesem Protokoll präsentieren wir Methoden, um dünne Elastomer Verbundfolien für fortgeschrittene Zelle Kultur Anwendungen und für die Entwicklung der Haut Klebstoffe zu fabrizieren. Zwei verschiedene Poly--(dimethyl siloxanes) (PDMS und weiche Haut Klebstoff (SSA)), werden seit in tiefe Untersuchung von biologischen Wirkungen und Hafteigenschaften. Die Verbundfolien bestehen aus einer flexiblen Trägerschicht und eine selbstklebende Deckschicht. Beide Schichten wurden durch Arzt Klinge Applikationstechnik hergestellt. In der vorliegenden Untersuchung ist der Klebstoffe Verhalten der Verbundfolien als Funktion der Schichtdicke oder eine Variation des Elastizitätsmoduls der obersten Ebene untersucht worden. Der Elastizitätsmodul des PDMS wurde geändert durch Variation der Ausgangspunkt, um Vernetzer Mischungsverhältnis. Darüber hinaus die Dicke der SSA Filmen variierte von ca. 16 µm bis ca. 320 µm. Scanning Electron Microscopy (SEM) und optische Mikroskopie für Dickenmessung verwendet worden. Die Hafteigenschaften der Elastomer-Filme hängen stark von der Schichtdicke, der Elastizitätsmodul von Polymeren und Oberflächeneigenschaften. Also, normale Haftung dieser Filme auf Glassubstraten mit glatten und rauen Oberflächen untersucht worden ist. Abziehen-Stress und Arbeit der Trennung sind abhängig von dem Mischungsverhältnis von Siliconelastomeren.
Außerdem variierte die Dicke der weiche Hautkleber auf eine Unterstützende Trägerschicht platziert um Patches für Haut Anwendungen zu produzieren. Zytotoxizität, Verbreitung und zelluläre Adhäsion L929 murine Fibroblasten auf PDMS Filme (Mischungsverhältnis 10:1) und SSA-Filme (Verhältnis 50: 50 mischen) wurden durchgeführt. Wir haben hier zum ersten Mal die Gegenüberstellung von zusammengesetzten Dünnfilmen beide Polymere hergestellt gezeigt und die Untersuchung ihrer biologischen und Klebstoff Eigenschaften präsentieren.

Ein Protokoll für die Herstellung von Polymeren Dünnschicht Verbundstrukturen besitzen unterschiedliche Youngs Moduli oder dicken wird vorgestellt. Filme sind für fortgeschrittene Zelle Kulturwissenschaft oder als Haut Klebstoffe hergestellt.

Dünnen Film Composite Silikon Elastomere für Zellkultur und Haut Anwendungen: Herstellung und Charakterisierung

In this protocol, we present methods to fabricate thin elastomer composite films for advanced cell culture applications and for the development of skin ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist die Herstellung und Charakterisierung von polymeren Dünnschicht-Kompositstrukturen für fortgeschrittene Zellkulturstudien oder als Hautklebstoffe. Diese Methode kann dazu beitragen, wichtige Fragen zu beantworten, wie elastomere Verbundwerkstoffe eingesetzt werden können, um auch auf unebenen Oberflächen eine optimale Haftung zu erzielen. Die Hauptvorteile dieser Techniken liegen darin, dass sie einfach und universell einsetzbar sind.Dies ermöglicht die Fertigung in großem Maßstab mit einer sehr hohen Präzision. In der Regel werden Personen, die mit dieser Methode noch nicht vertraut sind, Schwierigkeiten haben, da die Adhäsionsmessungen intensives Training und Übung erfordern, um die erforderliche Präzision zu erreichen. Die Zellkulturverfahren und die Plasmaanwendung werden von Angela Rutz, einer Technikerin aus unserem Labor, demonstriert.Zur Herstellung des PDMS 1,1 Gramm der Prepolymermischung in einem Drehzahlmischer bei 2350 U/min unter Vakuum mischen und drei Minuten lang entgasen. Zur Vorbereitung der PDMS-Trägerschicht verwenden Sie eine automatisch gesteuerte Rakelauftragsmaschine. Legen Sie die Rakel auf ein mit 100 % Isopropanol gereinigtes Stück PET-Folie und stellen Sie mit den Mikropositionierschrauben die Dicke der Trägerschicht ein.Laden Sie das PDMS in eine 10-Milliliter-Einmalspritze. Füllen Sie den Behälter der Rakel mit dem Polymer und beginnen Sie die Bewegung der Klinge mit einer Geschwindigkeit von etwa 2 Millimetern pro Sekunde. Wenn das Stück PET-Folie beschichtet ist, geben Sie die Folie für eine Stunde in einen 95 Grad Celsius heißen Ofen.Um die oberste Schicht der Verbundfolie vorzubereiten, entfernen Sie mit einer Klinge dünne Streifen von den langen Seiten der Trägerschicht. Damit die Rakel auf die PET-Folie geschoben werden kann, tragen Sie die zweite Schicht PDMS wie zuvor beschrieben auf. Lege dann die Folie in den Ofen.Um die Proben für die Adhäsionsmessungen vorzubereiten, schneiden Sie die Folien auf der PET-Folie mit einer Rasierklinge in vier Quadratzentimeter große Stücke und befestigen Sie die Stücke mit UV-Kleber auf einem Objektträger. Beleuchten Sie die Stücke drei Minuten lang mit UV-Licht und montieren Sie die erste polymere Probe auf den Probenhalter. Verwenden Sie das Goniometer, um den Neigungswinkel einzustellen, bis das Substrat mit der Polymerfolie in Kontakt kommt, und zwar bei einer vollständig parallelen Ausrichtung beider Oberflächen, wie auf den Kamerabildern dargestellt.Die optische Ausrichtung des Substrats zur Probe ist für die Interpretation der Messergebnisse von entscheidender Bedeutung. Daher muss die Einstellung des Neigungswinkels so genau wie möglich mit dem Neigungsmesser durchgeführt werden. Bewegen Sie das ausgerichtete Substrat auf die Polymerfilmoberfläche, bis eine Vorspannspannung von 13 plus oder minus fünf Kilopascal erreicht ist, und starten Sie das benutzerdefinierte Softwarepaket, das in LabView geschrieben wurde.Stellen Sie dann die erforderlichen Messparameter ein, um die Adhäsionseigenschaften von drei unabhängig hergestellten Proben an sechs verschiedenen Stellen auf jeder Folienoberfläche zu messen. Um die Filme für die optische Mikroskopie vorzubereiten, schneiden Sie die Polymerprobe mit einer Rasierklinge in 0,25 Quadratzentimeter große Stücke und befestigen Sie die Stücke am Rand eines Objektträgers. Legen Sie dann den Objektträger in vertikaler Ausrichtung unter ein aufrechtes Mikroskop und messen Sie die Dicke des Filmquerschnitts.Um ein Zellkulturexperiment vorzubereiten, schneiden Sie zunächst mit einem Skalpell etwa fünf mal fünf Millimeter große Stücke aus der PET-Stützschicht ab und übertragen die Stücke mit einer Pinzette auf einzelne 12 Millimeter große Glasabdeckgläser. Schieben Sie die Deckgläser in die Reaktionskammer eines Plasmageräts und schließen Sie den Gerätedeckel. Die Kammer wird evakuiert, bis ein Druck von 1,6 mal 10 bis minus einer Sekunde Millibar erreicht ist, und die Filme drei Minuten lang mit Plasma behandelt.Belüften Sie dann die Reaktionskammer und überführen Sie die Proben in einzelne Vertiefungen einer 24-Well-Platte. Waschen Sie anschließend eine 70 bis 80 % konfluente L929-Zellkultur 30 Sekunden lang mit kalzium- und magnesiumfreiem DPBS in einem Laminar-Flow-Schrank. Gefolgt von einer fünfminütigen Inkubation mit zwei Millilitern einer geeigneten proteolytischen und kollagenolytischen Lösung bei 37 Grad Celsius und 5 % CO2.Wenn sich die Zellen abgelöst haben, fügen Sie acht Milliliter Serumzusatz hinzu und geben Sie die Zellen in ein konisches 15-Milliliter-Röhrchen. Nach der Zählung säen Sie dann 60.000 Zellen pro Milliliter Medium pro Vertiefung der 24-Well-Platte mit den Polymerproben aus und legen Sie die Platte drei Tage lang in den Zellkultur-Inkubator, bevor Sie Phasenkontrastbildaufnahme und -fixierung durchführen. Abhängig von der Dicke der Deckschicht wird mit zunehmender Schichtdicke eine Abnahme der Abzugsspannung beobachtet, unabhängig von der Textur der Substratoberfläche.Der Trennaufwand ist jedoch bei rauen Substratoberflächen im Vergleich zu glatten Untergründen in der Regel etwas geringer. Wenn der Ablösemechanismus aufgezeichnet wird, wird auf den dünnsten Schichten nur eine geringe Kavitation beobachtet, während auf den dickeren Schichten das Auftreten von fingerartigen Rissen zu beobachten ist. Zellkulturexperimente zeigen, dass Zellen, die auf unberührten Polymeren ausgesät wurden, ein schlechtes Bindungs- und zelluläres Ausbreitungsverhalten aufweisen, während die konfluente Monoschicht bei Zellen beobachtet wird, die auf plasmabehandelten Oberflächen kultiviert wurden.Im Allgemeinen sind die Laktat-Dehydrogiease-Spiegel für Zellen, die auf beiden Polymermaterialien kultiviert wurden, mit einer Zytotoxizität von weniger als 5 % vergleichbar. Einmal gemeistert, kann die Herstellung der polymeren Folienverbundwerkstoffe in etwa drei Stunden abgeschlossen werden. Obwohl die anschließende Analyse mit einem normalen Haftversuch eine Schulung erfordert, ist er ein sehr leistungsfähiges Werkzeug, um die Klebeeigenschaften der Folien zu untersuchen.Nach dem Anschauen dieses Videos sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man dünne polymere Verbundfolien herstellt und diese mit spezifischen Adhäsionstests und zellbiologischen Werkzeugen analysiert. Vergessen Sie nicht, dass die Arbeit mit Chemikalien und biologischen Materialien äußerst gefährlich sein kann. Treffen Sie daher geeignete Vorsichtsmaßnahmen, wie z. B. das Befolgen der vorgeschriebenen Sicherheitsverfahren, das Tragen persönlicher Schutzausrüstung und den Umgang mit diesen Materialien in einer Sicherheitswerkbank.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

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