Name: Induktion eines nephrotischen Syndroms bei Mäusen durch retrobulbären Injektion von Doxorubicin und Verhinderung von Volume Retention von verzögerter Freisetzung Aprotinin (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 38 s
Description: Lernen Sie die Induktion eines nephrotischen Syndroms bei Mäusen durch retrobulbäre Doxorubicin-Injektion. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung von Natriumretention und Proteasurie.

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Diese Studie wurde unterstützt durch ein Stipendium der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG, AR 1092/2-1).

Alle Methoden wurden nach der nationalen Institute der Gesundheit Guide für die Pflege und Verwendung von Labortieren und das deutsche Recht für das Wohlergehen der Tiere durchgeführt, und sie wurden von den lokalen Behörden (Regierungspräsidium Tübingen) genehmigt.
1. Induktion von experimentellen Nephrotisches Syndrom von Doxorubicin Einspritzung des retrobulbären Sinus
<ol><li>Bereiten Sie eine 0,5 mL Spritze mit einer montierten 30G Kanüle durch die Markierung der Stop-Stellung des Kolbens.</li>
	<li>Injektionsvolumen von Doxorubicin für männliche (7,25 µL/g Körpergewicht (bw) gleich 14,5 µg/g bw Doxorubicin) und weiblichen Mäusen (6.9 µL/g bw gleich 13,8 µg/g bw Doxorubicin) entsprechend dem Körpergewicht von morgens zu berechnen. Hinweis: Die angegebene Dosis eignet sich für die Induktion eines nephrotischen Syndroms. Geringfügige Änderungen in der Dosierung führen zu einem entscheidenden verschiedene Nephropathie reicht von milden chronischen Nierenerkrankung mit nur kleinen Änderungen in glomeruläre Filtrationsrate (12,6 µg/g bw Doxorubicin) zu akuten Nierenversagens Scheitern (15,4 µg/g bw Doxorubicin)7, 15.</li>
	<li>Den berechneten Betrag von Doxorubicin Lösung (2 µg/µL) in einem 37 ° C warmen Raum warm. Achtung: Doxorubicin ist schädlich, wenn geschluckt und können Krebs verursachen. Immer tragen Sie Handschuhe, wenn mit Doxorubicin arbeiten und vermeiden Sie jeden Kontakt mit der Haut.</li>
	<li>Vorausfüllen von der Spritze mit Doxorubicin Lösung bis der Markierungspunkt und die Waage auf NULL gesetzt. Füllen Sie die Spritze mit der Einspritzmenge und überprüfen Sie die Lautstärke durch Wiegen der Spritze.</li>
	<li>Betäuben Sie die Maus mit 5 Vol % Isofluran mit einem Vaporizer und Sauerstoff-Flow von 2 L/min tief.<ol>
<li>Verwenden Sie die Salbe nicht auf die Augen vor der Injektion. Der Bediener braucht einen klaren Blick auf die Augenhöhle für eine sichere und erfolgreiche retrobulbären Injektion durchführen.</li>
		<li>Bewertung des Anästhesie durch Pedal Reflex und ggf. Narkose Lieferung vor Beginn der Injektion.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Platzieren Sie den Mauszeiger rechts seitlich liegen, mit dem Rücken, mit Blick auf den Körper des Fahrers und den Kopf mit Blick auf die Hand des Bedieners Injektion. Hinweis: Das Verfahren ist für Rechtshänder, beschrieben, für Linkshänder, die Durchführung der Injektion mit der linken Hand es einfacher ist, die Position und Injektion umgekehrt rechts nach links.</li>
	<li>Ragen Sie sorgfältig die Maus linken Augapfel aus der Augenhöhle durch sanften Druck auf die Haut, dorsalen und ventralen für das Auge.</li>
	<li>Punktion des linken retrobulbären Sinus vom inneren Augenwinkel (mediale palpebrale Kommissur). Vermeiden Sie den Kontakt mit dem Mouse´s Augapfel.</li>
	<li>Leicht kippen Sie die Spritze und injizieren Sie gesamten Datenträgers in einem Rutsch zu. Stellen Sie sicher, dass die Lautstärke ohne Widerstand und ohne irgendwelche Anzeichen von Extravasation wie Exopthalmus oder Leckage aus der Einstichstelle injiziert wird.</li>
	<li>Da Doxorubicin eine hochgiftige Substanz ist, überprüfen Sie Wohlbefinden mindestens einmal täglich mit einem Notenblatt nach Morton und Griffiths Et al. 16 und Zahlen besondere Aufmerksamkeit auf die Injektionsstelle. Wenn keine Anzeichen einer Extravasation Exopthalmus mögen, beeinträchtigt Augenlid Schließung oder irgendwelche Anzeichen von Nekrose wie Schwellungen oder Haut Läsionen auftreten nach der Injektion oder in den folgenden Tagen sollte die Maus eingeschläfert werden.</li>
</ol>2. Implantation von retard-Pellets mit Aprotinin
<ol><li>Pellets mit der gewünschten Dosis pro Tag und Freigabe Dauer im Voraus zu bestellen. Im Falle von Aprotinin wählen Sie eine Dosis von 1 mg pro Tag über 10 Tage freigegeben werden. Hinweis: In dieser Studie die Aprotinin Pellets enthalten eine Dosis von 10 mg.<ol>
<li>Speichern Sie die Pellets unter trockenen Bedingungen und vermeiden Sie jede Exposition gegenüber Feuchtigkeit.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bereiten Sie erforderliche Elemente für die Chirurgie, einschließlich Haar Schere, Haut Vorbereitung Schere, Skalpell, chirurgische Pinzette, zwei Paare von Gewebe Pinzette, Nadelhalter und 15 cm Monofile Faden nicht resorbierbaren vor.<ol>
<li>Sterilisieren Sie die Instrumente mit einem Wärme-Sterilisator für 5 min. bei 240 ° C. Vor der Verwendung der Instrumente, für 5 min warten Sie, bis sie Zimmertemperatur erreicht.<ol>
<li>Vermeiden Sie den Kontakt von sterilisierten Instrument Tipps unsterilen Oberflächen.</li>
			<li>Hautverbrennungen zu vermeiden, indem Sie heiße Instrumente.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>Betäuben Sie Maus mit Isofluran 5 Vol-% gefolgt von 1,5 vol% mit einem Vaporizer und Sauerstoff Flow von 2 L/min.</li>
	<li>Platzieren Sie den Mauszeiger in Bauchlage auf einem wärmenden Gerät, bedeckt mit einer Schicht aus Gaze zur Vermeidung von thermischer Verletzungen zur Maus. Oberflächentemperatur beträgt ca. 37 ° C.</li>
	<li>Schützen Sie die Augen mit Salbe.</li>
	<li>Entfernen Sie die Haare in der Mitte zurück in eine Fläche von etwa 0,5 cm2 mit einer Schere oder einem haarschneidegerät und Desinfizieren Sie die unbehaarte Haut mit einem Desinfektionsmittel für hautdesinfektion geeignet. Entfernen Sie so weniger Haare wie möglich, so es immer schwieriger für die Maus bleibt, um die Wunde zu erreichen und Thread später endet und Körpertemperatur zu halten.</li>
	<li>Einzuschneiden Sie die unbehaarte Haut mit einem Skalpell in Cranio-Caudale Richtung in einer Länge von etwa 5 mm. Vorbereiten einer linken seitlichen Tasche von ca. 1 cm tief in das subkutane Bindegewebe mit einer stumpfen Zubereitung.<ol>
<li>Bewertung des Anästhesie durch Pedal Reflex und ggf. Narkose Lieferung vor Beginn der Operation.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Einsetzen Sie eine 10-Tage-Version Pellet in bereit linken seitlichen Beutels Pinzette steril Gewebe. Lassen Sie die Kugel an der Unterseite des Beutels in eine planare Position.<ol>
<li>Vermeiden Sie jeden Kontakt des Pellet-Flüssigkeit und Feuchtigkeit bis in die vorbereitete Tasche platziert.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Schließen Sie die Haut mit 2-3 Fäden. Lassen Sie nur sehr kurze Fadenenden machen es schwieriger für die Maus, um die Nähte durch nagen zu öffnen.</li>
	<li>Legen Sie die Mäuse einzeln, postoperative Stress zu reduzieren und Öffnen der Nähte durch nagen zu verhindern. Halten Sie die Maustaste im Blick, bis es nach der Narkose ausreichend Bewusstsein wiedererlangt hat. Hinweis: Es gibt keine Notwendigkeit für die postoperative Schmerztherapie da dieser Eingriff ohne irgendwelche Anzeichen von Unbehagen oder Schmerzen gut vertragen wird. Alternativ empfehlen wir topische Analgetika, z. B. einen Tropfen Bupivacain auf den Einschnitt vor der Schließung, die bis zu 8 h Analgesie bieten würde.</li>
</ol>3. Bewertung für Modell Induktion, Zeichen des Nephrotischen Syndroms und Wohlbefinden
<ol><li>Sammeln Sie Morgenurin (08:00) in einer Reaktion Tasse (1,5 mL) täglich ab dem Tag der Injektion durch das Massieren der Blase.<ol>
<li>Proteinurie mithilfe von Bradford Protein Assay zu messen und zu Kreatinin normalisieren. Hinweis: Für die Induktion eines nephrotischen Syndroms, Proteinurie sollte eine Schwelle von 120 mg/mg Kreatinin zwischen 7. und 10. Tag nach der Injektion von Doxorubicin erreichen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Suchen Sie nach der Entwicklung von Aszites. Suchen Sie nach Erhöhung der Bauch Umfang oder überhängende Flanken.</li>
	<li>Wiegen Sie die Maus, die Lebensmittel-Pellets und die Trinkflasche am Morgen (08:00) jeden Tag.</li>
	<li>Überprüfen Sie Wohlbefinden mindestens einmal täglich mit einem Notenblatt nach Morton und Griffiths Et Al. 16
</li>
</ol>4. Messung der Harn Serin Protease mit einem chromogenen Assay
<ol><li>Bereiten Sie Substrat funktionierende Lösung durch Zugabe von 15 mL sterile Phosphat gepufferte Kochsalzlösung (PBS), eine Flasche von 25 mg lyophilisiert chromogenen Substrat S-2251, mit einer Konzentration von 2 mM. Auflösen von Aprotinin in PBS, eine Aprotinin-Lösung mit einer Konzentration von 2 mg/mL zu erhalten.<ol>
<li>Speichern von vorbereiteten Lösungen bei-20 ° C. Dies verlangsamt deutlich den Auto-Abbau von S-2251. Verwenden Sie alte Lösungen nicht mit einem starken Gelbton.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Verwendung frisch zubereitet oder Substrat Arbeitslösung aufgetaut und in einer Wärmekammer 37 ° C warm.</li>
	<li>Urinproben bei Raumtemperatur Auftauen.<ol>
<li>Verhindern, dass Protease-Abbau durch wiederholtes Auftauen und Einfrieren zu vermeiden. Speichern von Urinproben bei-20 ° C.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Verwenden Sie eine 96 Microwell-Platte für photometrische Messung geeignet. Fügen Sie 3 µL des unverdünnten Urin in jedem der zwei Brunnen hinzu und 50 µL Substratlösung arbeiten mit 3 µL PBS oder Aprotinin-Lösung in die Vertiefungen. Die Platte mit einer Versiegelung Platte abdecken.</li>
	<li>Inkubieren Sie die überdachte Microwell-Platte für 60 min in einer Wärmekammer 37 ° C.</li>
	<li>Messung die optische Dichte von jedem Bohrloch bei 450 nm mit einer Mikrotestplatte Reader.</li>
	<li>Nehmen Sie den Unterschied zwischen der OD ohne Aprotinin und mit Aprotinin als Harn Aprotinin-Sensitive Serin-Protease-Aktivität. Hinweis: Messung einer gekoppelten Probe mit und ohne Aprotinin erhöht Spezifität des Assays, da das Substrat auch durch andere Proteasen gespalten werden könnte, die keine pathophysiologische Rolle spielen.</li>
</ol>

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<li>Frenk, S., Antonowicz, I., Craig, J. M., Metcoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+nephrotic+syndrome+induced+in+rats+by+aminonucleoside%3B+renal+lesions+and+body+electrolyte+composition%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Soc+Exp+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Experimental nephrotic syndrome induced in rats by aminonucleoside; renal lesions and body electrolyte composition.</a> Proc Soc Exp Biol Med. 89 (3), 424-427 (1955).</li>
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</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Hier zeigen wir, dass Doxorubicin Injektion mittels retrobulbären Sinus Injektion experimentelle Nephrotisches Syndrom bei 129S1/SvImJ Mäusen mit Proteinurie, Natrium-Retention, Hypoalbumenia und Hyperlipidämie induziert. Allerdings gibt es zwei kritische Fragen, die bei der Verwendung dieses Musters berücksichtigt werden müssen. Erstens die Modell-Induktion ist streng dosisabhängig und Abweichungen von Doxorubicin Dosis so klein wie 0,3 µg/g beeinflussen die Reaktion der Mäuse15. Wenn Sie mit ein...

Nephrotisches Syndrom ist gekennzeichnet durch schwere Proteinurie, Hypoalbuminämie, Ödeme und Hyperlipidämie und als die extremste Manifestation des proteinuric Nierenerkrankung angesehen werden kann. Bei Nagetieren kann experimentelle Nephrotisches Syndrom durch einmalige Injektion von Anthrazyklinen oder Puromycin führt zu hemolytic Schäden und ähnelt menschlichen minimale Änderung Krankheit und fokal segmentale Glomerulosklerose (FSGS)1induziert werden. Nach seiner Erstbeschreibung im Jahr 1955 von Frenk Et Al. 2, Puromycin Nukleosid Nephrose (PAN) bei Ratten ist ein Standardmodell zu untersuchen, die Pathophysiologie des Nephrotischen Syndroms in zahlreichen Studien3,4,5,6geworden. Bei Mäusen kann das entsprechende Modell von Anthrazyklin Doxorubicin7induziert werden. Allerdings gibt es eine starke Belastung-Abhängigkeit, die durch mindestens zwei genetische Loci8genetisch determiniert ist. Darüber hinaus gibt es Unterschiede in der proteinuric Reaktion und Kurs des Nephrotischen Syndroms9,10. Mit 129S1/SvImJ Mäusen und schnelle intravenöse Injektion von Doxorubicin über den retrobulbären Sinus, erreichen Proteinurie Antworten Werte, die ausreichen, um die typischen Merkmale eines nephrotischen Syndroms, insbesondere Volume Retention zeichnet sich durch induzieren Aszites und beinahe natriumfrei Urin7. Natrium-Retention im experimentellen Nephrotisches Syndrom hat vermutlich das Ergebnis der Aktivierung des epithelialen Natrium-Kanal (ENaC) in den distalen Röhrchen durch akzessorisch gefilterte Serin Proteasen wie Plasmin verursacht Proteolyse von der γ-Untereinheit4 ,11,12. Vor kurzem wurde dieses Konzept Nephrotisches Mäusen bewiesen die aus proteolytischen ENaC-Aktivierung und Natrium-Retention durch Behandlung mit Serin Protease-Inhibitor Aprotinin geschützt waren, die ebenso wirksam wie die ENaC Blocker Amilorid13war. Um kontinuierliche Lieferung an der distalen Röhrchen zu gewährleisten, wurde Aprotinin über subkutan implantierten verzögerter Freisetzung Pellets verabreicht. Zukünftige Studien sind verpflichtet die Serin-Proteasen zu identifizieren, die verantwortlich für die proteolytische Aktivierung der ENaC in Nephrotisches Syndrom sind die vermutlich die menschliche Situation parallel. Zu diesem Zweck ist Doxorubicin-induzierte Nephrotisches Syndrom ein wertvolles Modell, das auf gentechnisch veränderte Mäuse erweitert oder in Wildtyp Mäusen verwendet werden kann. Seine Vorteile sind niedrige Kosten für das Medikament, geringere Komplexität des Managements und der guten Reproduzierbarkeit14.
In diesem Artikel zeigen wir die Induktion der experimentellen Nephrotisches Syndrom durch schnelle intravenöse Injektion von Doxorubicin, des retrobulbären Sinus und Implantation von retard-Pellets mit Aprotinin um Harn Serin Protease hemmen Aktivität mit einem chromogenen Assay gemessen.

<table><tbody><tr><td>supplies</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>BD Micro FINE + U-40 (0,30 mm x 8 mm)</td><td>BD Deutschland GmbH, Heidelberg, Germany</td><td>PZN: 07468060</td><td>Spritze</td></tr><tr><td>ETHILON*II (5/0, 16 mm, 3/8c, 45 cm)</td><td>Johnson& Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Deutschland)</td><td>EH7823H</td><td>suture</td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Katalognummer</td><td>Comments</td></tr><tr><td>reagents</strong</td>><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>aprotinin (6000 KIU/mg)</td><td>LOXO, Heidelberg, Deutschland</td><td>CAS 9087-70-1</td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen, Augen- und Nasensalbe</td><td>Bayer Vital GmbH, Leverkusen, Deutschland</td><td>PZN: 1578681</td><td>Salbe</td></tr><tr><td>Chromogenix S-2251</td><td>HAEMOCHROM DIAGNOSTICA GmbH, Essen, Deutschland</td><td>82 0332 39</td><td>chromogenes Substrat</td></tr><tr><td>Doxorubicin (2,0 & Mikro; g/&micro; L)</td><td>Cell Pharm, Bad Vilbel, Deutschland</td><td>CAS 25316-40-9</td><td>Doxorubicin</td></tr><tr><td>Isofluran CP (1 mL/mL)</td><td>CP-Pharma, Burgdorf, Deutschland</td><td>CAS 26675-46-7</td><td>Isofluran-Pellets</td></tr><tr><td>mit matrixgesteuerter verzögerter Freisetzung (kundenspezifisch)</td><td>Innovative Research of America, Sarasota, FL</td><td>X-999</td><td>Pellet</td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Katalognummer</td><td>Kommentare</td></tr><tr><td>equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ELx808 Absorbance Mikroplate Reader</td><td>BioTek, Bad Friedrichshall, Deutschland</td><td>ELx808</td><td>Mikroplatten-Reader</td></tr><tr><td>MICROSTERIL - 436</td><td>B.M.S., Trescore Balneario, Italien</td><td>GAL/436</td><td>Sterilisator</td></tr><tr><td>Hybridisierungsofen/ Shaker</td><td>GE Healthcare UK Limited, Amersham LIFE SCIENCE, Little Chalfont, UK</td><td>RPN 2511</td><td>Wärmekammer</td></tr><tr><td>Thermo MAT Pro 10 W, 15x25 cm, Lucky Reptile</td><td>Import Export Peter Hoch GmbH, Waldkirch, Deutschland</td><td>61201</td><td>Maus-Erwärmungsgerät</td></tr></tbody></table>

induktion eines nephrotischen syndroms bei mäusen durch retrobulbären injektion von doxorubicin und verhinderung von volume retention von verzögerter freisetzung aprotinin

Induction of Nephrotic Syndrome in Mice by Retrobulbar Injection of Doxorubicin and Prevention of Volume Retention by Sustained Release Aprotinin

Nephrotisches Syndrom ist die extremste Manifestation des proteinuric Nierenerkrankung und zeichnet sich durch schwere Proteinurie, Hypoalbuminämie und Ödem durch Natrium-Retention und Hyperlipidämie. Zur Untersuchung der Pathophysiologie dieses Syndroms anhand Nagetier, die Modelle entwickelt wurden der Injektion von giftigen Substanzen wie Doxorubicin hemolytic Schaden. Bei Mäusen sind nur wenige Stämme anfällig für dieses Modell. In Wildtyp-129S1/SvImJ-Mäuse induziert die Gabe von Doxorubicin durch schnelle intravenöse Injektion, dem retrobulbären Sinus experimentelle Nephrotisches Syndrom, bietet die Symptome von Krankheiten einschließlich Natrium-Retention und Ödem. Nach dem Einsetzen der Proteinurie erhöht Mäuse Ausstellung Harn Serin-Protease-Aktivität, die zur Aktivierung des epithelialen Natrium-Kanal (ENaC) und Natrium-Retention führt. Pharmakologische Hemmung der Harn Serin Proteasen durch die Behandlung mit verzögerter Freisetzung Aprotinin hebt ENaC Aktivierung und verhindert, dass Natrium-Retention. Dieses Modell ist ideal, um die Pathophysiologie der Proteasuria, dhstudieren., die Ausscheidung von aktiven Serin-Proteasen, die ENaC Aktivierung durch Proteolyse von der γ-Untereinheit verursachen. Dies kann als der primäre Mechanismus der ENaC Aktivierung und Natrium-Retention in proteinuric Nierenerkrankung betrachtet werden.

Nach der Induktion der Isoflurane Narkose wurde Doxorubicin rasch über den linken retrobulbären Sinus injiziert. Das gesamte Volumen von 7,25 µL/g bw injiziert wurde, ohne jeden Widerstand und Extravasation beweisen intravenöse Lage der Kanüle korrigieren. Die Maus schnell von Narkose erholt und hatte keine Wertminderung an jenem Tag und danach. Insbesondere gab es keine Anzeichen einer Beschädigung am linken Auge. Nach Doxorubicin Einspritzung, Nahrung und Flüssigkeit Einnahme sank in de...

Hier beschreiben wir die Induktion eines experimentellen nephrotischen Syndroms bei 129S1/SvImJ Mäusen durch schnelle retrobulbären Injektion von Doxorubicin. Wir behandeln auch Nephrotisches Mäuse mit verzögerter Freisetzung Pellets mit Aprotinin um Harn Serin-Protease-Aktivität hemmen und verhindern, dass Natrium-Retention.

Induktion eines nephrotischen Syndroms bei Mäusen durch retrobulbären Injektion von Doxorubicin und Verhinderung von Volume Retention von verzögerter Freisetzung Aprotinin

Nephrotic syndrome is the most extreme manifestation of proteinuric kidney disease and characterized by heavy proteinuria, hypoalbuminemia, and edema due ...

Das übergeordnete Ziel dieses Mausmodells des experimentellen nephrotischen Syndroms ist es, alle Facetten des Syndroms abzubilden, die von menschlichen Patienten bekannt sind, vor allem die Natriumretention und die Ödembildung. Dieses Modell kann helfen, die Mechanismen der Natriumretention beim nephrotischen Syndrom aufzuklären. Wie in diesem Artikel gezeigt wird, wird die Natriumretention durch die Ausscheidung aktiver Serumproteasen im Urin verursacht, die wir als Proteasurie bezeichnet haben.Die Hauptvorteile dieses Modells bestehen darin, dass es leicht zu induzieren ist und dass es alle Facetten des menschlichen nephrotischen Syndroms und der chronischen Nierenerkrankung abdeckt. Während des Implantationssegments des Protokolls wird Dr. Bohnert, ein wissenschaftlicher Mitarbeiter, diese Technik demonstrieren. Erwärmen Sie zunächst das Doxorubicin in einer 37 Grad Celsius heißen Kammer.Bereiten Sie als Nächstes die Injektionsspritze vor. Markieren Sie die Stoppposition des Kolbens auf der Spritze, um die erforderliche Dosis Doxorubicin mit einer Lösung von zwei Mikrogramm pro Mikroliter zu verabreichen. Nullen Sie dann die Masse einer vorbereiteten Spritze und laden Sie sie b

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Dieses Video zeigt ein Verfahren zur sympathischen Denervierung der Nierenarterie in einem Angiotensin-II-induzierten hypertensiven Mausmodell, bei dem Phenol verwendet wird, um die Funktion des sympathischen Nerven zu stören und den Blutdruck zu senken.

Sympathische Denervierung der Nierenarterien in einem Angiotensin-II-induzierten Hypertonie-Mausmodell

Wir beschreiben Modelle der mittelschweren und schweren Ischämie-Reperfusion-induzierte Nierenschädigung, in denen die Mäuse unterziehen einseitige renale Stiel Klemm gefolgt durch gleichzeitige oder verzögerte kontralaterale Nephrektomie sind. Diese Modelle konsequent führen zu Nierenfunktionsstörungen und posttraumatische Fibrose, aber Verletzungsschwere und Überleben sind abhängig von Maus Hintergrund, Alter und chirurgischen Einrichtungen.

Ischämie-Reperfusion-Modell des akuten Nierenschädigung und nach der Verletzung Fibrose bei Mäusen

Diese Handschrift enthält eine detaillierte zweistufigen chirurgische Prozedur zum Maus 5/6th partiellen Nephrektomie (PNx) mit Pol Ligatur durchzuführen. Vier Wochen nach der Operation im Vergleich zu Schein betrieben Mäuse, die PNx Mäuse entwickelt, eingeschränkter Nierenfunktion, Anämie, Herzhypertrophie, kardialer Fibrose und sank der systolische und der diastolische Herzfunktion.

5/6th Nephrektomie Mausmodell, die experimentelle urämischen Kardiomyopathie induziert

Dieses Protokoll beschreibt eine vollständige Niere Aufarbeitung, die in Mausmodellen der glomerulären Erkrankung durchgeführt werden soll. Die Methoden können für funktionelle, strukturelle und mechanistische Detailanalyse der glomerulären Funktion, die auf alle Maus-Modellen der glomerulären Erkrankung angewendet werden kann.

Beurteilung der Nierenfunktion in Mausmodellen der glomerulären Erkrankung

Hier stellen wir ein Protokoll für die renale sympathische Denervierung (RDN) bei Mäusen mit Bluthochdruck vor, die durch Angiotensin-II-Infusion induziert wurde. Das Verfahren ist wiederholbar, bequem und ermöglicht es, die Regulationsmechanismen von RDN bei Bluthochdruck und Herzhypertrophie zu untersuchen.

Verbesserte renale Denervierung milderte Hypertonie durch Angiotensin-II-Infusion

Dieses Protokoll beschreibt die konsekutive Implantation einer osmotischen Pumpe zur Induktion eines Bauchaortenaneurysmas durch Angiotensin-II-Freisetzung bei Mäusen mit Apolipoprotein E (ApoE)-Mangel und eines vaskulären Zugangsports mit einem Jugularvenenkatheter zur wiederholten medikamentösen Behandlung. Die Überwachung der Aneurysmaentwicklung durch 3D-Ultraschall wird trotz dorsaler Implantate effektiv durchgeführt.

Medikamentöse Behandlung mittels zentralvenösem Katheter in einem Mausmodell des Angiotensin-II-induzierten Bauchaortenaneurysmas und Überwachung mittels 3D-Ultraschall

Dieser Artikel enthält ein Protokoll und ein begleitendes Video für die retrobulbäre Sinus-Injektion von bis zu einem Gesamtvolumen von 150 μl für postnatale, juvenile und adulte Mäuse. Dieses Verfahren eignet sich besonders gut für die Injektion von kleinen Mäusen (15 g), wenn eine Injektion in die Schwanzvene nicht möglich ist.

Systemische Behandlung von postnatalen, juvenilen und adulten Mäusen durch retrobulbäre Sinus-Injektion

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Etablierung eines Tiermodells für membranöse Nephropathie (MN) und wie die Hemmung von Kemeng Fang die Apoptose von MN-Ratten durch Aktivierung des PI3K/AKT-Signalwegs reduziert.

Mechanismus der Hemmung der Podozyten-Apoptose durch Kemeng Fang bei Ratten mit membranöser Nephropathie über den PI3K/AKT-Signalweg

Dieser Bericht beschreibt die lokalisierte Injektionsmethode von AAV-Vektoren über das Nierenbecken für einen effektiven und sicheren Gentransfer in die Mausniere.

Effektive und sichere Genabgabe an die Mausniere durch langsame retrograde Injektion von Adeno-assoziierten Virusvektoren in das Nierenbecken

Wir beschreiben das Protokoll eine kardiale Stresstest Dobutamin induziert und überwacht durch Herzkatheter bei normalen Mäusen durchzuführen. Auch zeigen wir ihre Anwendung auf subklinische Herzerkrankungen in fettreichen Diät-induzierten adipösen Mäusen zu entlarven.

Cardiac Stress Test durch Dobutamin induziert und Überwacht durch Herzkatheter in Mäuse

Lernen Sie die Induktion eines nephrotischen Syndroms bei Mäusen durch retrobulbäre Doxorubicin-Injektion. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung von Natriumretention und Proteasurie.

Induktion eines nephrotischen Syndroms bei Mäusen durch retrobulbären Injektion von Doxorubicin und Verhinderung von Volume Retention von verzögerter Freisetzung Aprotinin (Video) | JoVE Journal

Induktion eines nephrotischen Syndroms bei Mäusen durch retrobulbären Injektion von Doxorubicin und Verhinderung von Volume Retention von verzögerter Freisetzung Aprotinin

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