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DOI: 10.3791/57702-v
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Wir präsentieren Ihnen eine automatisierte Methode zur dreidimensionalen Rekonstruktion der Keimbahn Caenorhabditis Elegans . Unsere Methode bestimmt die Anzahl und Position der jeder Kern in die Keimbahn und Analysen Keimbahn PROTEINVERTEILUNG und Zytoskeletts Struktur.
Das übergeordnete Ziel dieser Methode ist es, die Analyse einer Caenorhabditis elegans-Keimbahn zu automatisieren, um ihre Zellkern-, Protein- und Zytoskelettverteilung zu untersuchen. Diese Methode kann helfen, die Schlüsselfragen auf dem Gebiet der C.Elegans über die Anzahl der Zellkerne und Spermien, die Kernverteilung und die Zytoskelettstruktur der Keimbahn zu beantworten. Die Hauptvorteile dieser Technik bestehen darin, dass sie die Analysezeit verkürzt, die Stichprobengröße erhöht und den menschlichen Fehler eliminiert, der mit der manuellen Analyse verbunden ist.
Um die Proben abzubilden, legen Sie Objektträger mit gefärbten Keimbahnen in den Objektträgerhalter über dem 63X-Objektiv eines konfokalen Mikroskops und suchen Sie eine Keimbahn. Fokussieren Sie auf die Oberseite der Keimbahn und markieren Sie sie mit der Konfokalmikroskop-Software. Wenn die Gesamtdicke der Keimbahn bestimmt wurde, definieren Sie die Dicke jeder Scheibe bis zu 0,5 Mikrometer und markieren Sie die gesamte Keimbahn.
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