Name: Ölsäure-Injektion bei Schweinen als Modell für Acute Respiratory Distress Syndrome (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-26T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 6 s
Description: Erfahren Sie, wie man durch zentralvenöse Ölsäure-Injektion bei Schweinen ein ARDS-Modell erzeugt. Diese Methode reproduziert die menschliche Pathophysiologie und ermöglicht die Entwicklung neuer Therapieansätze.

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Die Autoren wollen Dagmar Dirvonskis für hervorragende technische Unterstützung zu danken.

Alle Tierversuche, die hier beschriebenen von der institutionellen und staatlichen Tierpflege-Ausschuss (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Koblenz, Deutschland, Zulassungsnummer G14 1 077) genehmigt worden und wurden nach den Richtlinien der durchgeführt die Europäische und deutsche Society of Laboratory Animal Sciences. Die Experimente wurden im narkotisierten männlicher Schweine (Sus Scrofa Domestica) 2-3 Monate alt, mit einem Gewicht von 27-29 kg durchgeführt.
1. Narkose, Intubation und Beatmung
<ol><li>Zurückhalten Sie, Essen für 6 Stunden vor der Narkose zu verringern das Risiko der Aspiration aber ermöglichen freien Zugang zum Wasser, um Stress zu reduzieren.</li>
	<li>Zur Sedierung injizieren Sie eine Kombination von Ketamin (4 mg kg-1) und Azaperone (8 mg kg-1) in den Hals oder den Gesäßmuskel des Schweins mit einer Nadel für die intramuskuläre Injektion (20 G), während das Tier in der Tier-Box ist. Achtung: Benutzen Sie Handschuhe bei der Arbeit mit dem Tier.</li>
	<li>Fügen Sie periphere Vene Katheter (20 G) in eine Vene Ohr nach lokale Desinfektion mit Alkohol.</li>
	<li>Fentanyl (4 µg kg-1), Propofol (3 mg kg-1) und Atracurium (0,5 mg kg-1) für die Induktion der Anästhesie intravenös zu injizieren.</li>
	<li>Wenn das Schwein aufhört zu atmen, in Rückenlage auf die Liege legen und mit Bandagen zu immobilisieren.</li>
	<li>Starten Sie die Überwachung der peripheren Sauerstoffsättigung (SpO2) durch Zuschneiden des Sensors an eines der Ohren oder der Rute des Tieres.</li>
	<li>Lüften Sie das Schwein mit einer Maske für Lüftungs Hunde, Größe 2, mit einer inspiratorischen Spitzendruck unter 20 cm H2O, ein positives Ende exspiratorischen Druck (PEEP) von 5 cm H2O, eine Atemfrequenz von 14-16/min und eine inspiratorische Sauerstoff-Bruch (FiO2) von 1,0.</li>
	<li>Beginnen Sie eine Dauerinfusion mit ausgewogenen Elektrolyt-Lösung (5 mLkg-1 h-1), Propofol (8-12 mg kg-1 h-1) und Fentanyl (0,1-0,2 mg kg-1 h-1) weiterhin Anästhesie.</li>
	<li>Vorbereitung der Intubation, einen gemeinsame endotrachealen Schlauch für das Tier geeignet (zB., Gewicht von 25-30 kg, endotracheal Schlauch Innendurchmesser (ID) 6-7 mm) bewaffnet mit Endotrachealtubus Einführhilfe und eine gemeinsame Laryngoskop mit einem Macintosh Klinge 4. Hinweis: Zwei Personen sind für die Intubation erforderlich.</li>
	<li>Person 1: Ziehen Sie die Zunge mit einer Hand und drücken Sie die Schnauze dorsal mit dem anderen.</li>
	<li>Person 2: Legen Sie Laryngoskop und schieben Sie es wie gewohnt, bis der Kehldeckel ins Blickfeld kommt.</li>
	<li>Ziehen Sie das Laryngoskop ventral um die Stimmbänder zu visualisieren. Hinweis: Manchmal "hält sich der Kehldeckel" an dem weichen Palatin. In diesem Fall es mit der Spitze des Rohres zu mobilisieren.</li>
	<li>Legen Sie das Rohr durch die Stimmbänder und die Einführhilfe herausziehen.</li>
	<li>Blockieren Sie die Manschette des Rohres mit einer Spritze mit 10 mL Luft.</li>
	<li>Schließen Sie den Schlauch an den Ventilator.</li>
	<li>Überprüfen Sie für die richtige Positionierung des Rohres durch regelmäßige Ausatmen von Kohlendioxid (CO2) mit Capnographie und gleich Belüftung der beiden Lungen mit Auskultation.</li>
	<li>Beatmung zu beginnen (Tidalvolumen 6-8 mL/kg, positive PEEP 5 cm H20, FiO2 periphere Sauerstoffsättigung (SpO2) zwischen 94 – 98 %17, Atemfrequenz, Gezeiten Enddruck von Kohlendioxid (FTMV zu halten zu halten ( 2) zwischen 35-45 MmHG).</li>
</ol>(2) Instrumentierung
<ol><li>Zurückziehen Sie die Hinterbeine mit Bandagen zu dehnen die Haut oberhalb des femoralen Bereichs für Katheterisierung notwendig Schiffe.</li>
	<li>Bereiten Sie eine 5 mL Spritze, eine 10 mL Spritze, ein Seldingertechnik Nadel 3 Einführhilfe Hüllen (5 Fr, 6 Fr, 8 Fr) mit Führungsdrähte, einen zentralen Venenkatheter mit 3 Anschlüssen (7 Fr, 30 cm) mit Führungsdraht und Lungenarterie Katheter (7,5 Fr, 110 cm).</li>
	<li>Desinfizieren Sie großzügig femoralen Bereich mit Haut-Desinfektionsmittel eine Wischen nach unten Technik anwenden.</li>
	<li>Vollständig zu füllen die Katheter mit Kochsalzlösung.</li>
	<li>Legen Sie die Ultraschall-Sonde auf die rechts inguinalen Ligament und Scan für femoral Schiffe.</li>
	<li>Drehen Sie die Sonde 90° um die Femoral Arterie in der Längsachse komplett sichtbar zu machen.</li>
	<li>Cannulate rechts Femoral Arterie unter Inline-Ultraschall Visualisierung mit der Seldingertechnik Nadel. Hinweis: Es gibt verschiedene Möglichkeiten, mit oder ohne Ultraschall vaskulären Zugang. Ultraschall-geführte vaskulären Kanülierung ist nicht notwendig für dieses Modell.</li>
	<li>Wenn helles Blut strömt pulsierend, stellen die Anleitung-Draht und zurückziehen der Nadelöhrs.</li>
	<li>Visualisieren der femoralen Ader und cannulate die Vene unter Inline-Ultraschall Visualisierung und das kontinuierliche Streben mit der Nadel.</li>
	<li>Wenn venöses Blut aspirable ist, trennen Sie die Spritze und einführen Sie Leitung Leitung.</li>
	<li>Zurückziehen der Nadelöhrs.</li>
	<li>Überprüfen Sie die Position der Drähte mit Ultraschall.</li>
	<li>Legen Sie die arterielle Einführhilfe Hülle (5 Fr) und zentralen Venenkatheter mit Seldingertechnik Technik (für Details auf Seldingertechniks Technik, beziehen sich auf veröffentlichte Methode18).</li>
	<li>Wiederholen Sie die arterielle und venöse Punktion auf anderen Seite und legen Sie die Einführhilfe Hüllen mit Seldinger´s Technik wie oben beschrieben (Arterie 6 Fr, Ader 8 Fr).</li>
	<li>Schließen Sie die arterielle Einführhilfe Mantel und zentralen Venenkatheter zu einem Wandler-System geeignet sind, den Überwachungseinrichtungen.</li>
	<li>Kalibrieren Sie der invasives monitoring gegen Atmosphäre (null), durch das Öffnen der drei-Weg-Hähne in die Atmosphäre und am Monitor drücken Sie alle auf Null .</li>
	<li>Zurückdrehen Sie die drei-Weg-Hähne zur Messung der Hämodynamik.</li>
	<li>Starten Sie die Überwachung der Hämodynamik.</li>
	<li>Legen Sie alle Druckmessumformer auf der Höhe des rechten Vorhof.</li>
	<li>Wechseln Sie die Infusion von Propofol (8-12 mg kg-1 h-1) und Fentanyl (0,1-0,2 mg kg-1 h-1) zu einem der Häfen von der zentralen Venenkatheter, Narkose aufrechtzuerhalten.</li>
</ol>(3) ultraschnelle Messung der partiellen Sauerstoffdruck (pO-2)
Hinweis: Die Messung der pO-2 mit der Sonde für ultraschnelle pO2-Messung ist nicht obligatorisch, sondern hilft Visualisierung der Änderungen in Echtzeit in pO2.
<ol><li>Öffnen Sie NeoFox Viewer -Software, und klicken Sie auf Optionen.</li>
	<li>Wählen Sie die Registerkarte " Kalibrierung " und klicken Sie auf Open Kalibrierung .</li>
	<li>Wählen Sie Kalibrierung Datei aus, und klicken Sie auf Öffnen und herunterladen.</li>
	<li>Bestätigen Sie das Popup-Fenster, indem Sie auf Ja.</li>
	<li>Öffnen Sie den Optionen -Dialog.</li>
	<li>Wählen Sie die Registerkarte " Kalibrierung " und klicken Sie auf einzelne Punkt-Kalibrierung.</li>
	<li>Geben Sie in Feld Sauerstoff 21 % und die Temperatur im Feld Temperatur.</li>
	<li>Klicken Sie auf Verwendung aktueller Tau und herunterladen. Danach bestätigen Sie das Popup-Fenster durch Klicken auf Ja.</li>
	<li>Führen Sie die Sonde für ultraschnelle Messungen der pO-2 durch die linken arteriellen Einführhilfe Hülle.</li>
</ol>4. EINFÜGEN LUNGENARTERIE KATHETER
<ol><li>Überprüfen Sie den Ballon des Lungenarterie Katheters auf Beschädigungen.</li>
	<li>Anschluss an die Wandler-System geeignet sind, den Überwachungseinrichtungen.</li>
	<li>Der pulmonalen arteriellen Druck Überwachung gegen die Atmosphäre (null) durch das Öffnen der drei-Weg-Hahn, die Atmosphäre und die Presse null auf dem Monitor zu kalibrieren.</li>
	<li>Zurückdrehen Sie die drei-Weg-Hahn zur pulmonalen arteriellen Druckmessung.</li>
	<li>Starten Sie die Überwachung des pulmonalen arteriellen Drucks.</li>
	<li>Legen Sie die Lungenarterie Katheter durch die linken venösen Einführhilfe Hülle (Ballon abgelassen).</li>
	<li>Wenn die Einführhilfe Hülle der Lungenarterie Katheter durchlaufen hat, Blasen Sie den Ballon mit 1 mL Luft auf.</li>
	<li>Den Lungenarterie Katheter voraus und die typischen Wellenformen (venösen Gefäßen, rechten Vorhof, rechte Herzkammer, pulmonale Arteria und pulmonalen Kapillaren Keil Druck) zu überwachen. Entleeren Sie den Ballon und überprüfen Sie, wenn es möglich ist, Blut durch alle Ports des Lungenarterie Katheters Aspirieren. Hinweis: Detaillierte Anleitung zum Lungenarterie Katheter, finden Sie in vorherigen Veröffentlichung19.</li>
</ol>5. Induktion der Lungenschädigung
<ol><li>Bereiten Sie Ölsäure-Säure Lösung: 0,1 mL kg-1 von Ölsäure in einer 20 mL Spritze und verbinden Sie es mit einem 3-Weg-Hahn.</li>
	<li>Nehmen Sie 2 mL Blut in eine andere 20 mL Spritze und ein Gesamtvolumen von 20 mL in beiden Spritzen fügen Sie Kochsalzlösung hinzu.</li>
	<li>Verbinden Sie die zweite Spritze auch mit 3-Weg-Hahn. Achtung: Benutzen Sie Handschuhe und Schutzbrille bei der Arbeit mit Ölsäure.</li>
	<li>Bereiten Sie Noradrenalin (0,1 mg/mL) für kontinuierliche Infusion und Bolus-Injektion (10 µg/mL).</li>
	<li>Verbinden Sie die Noradrenalin-Spritze-Pumpe mit einem der Häfen von der zentralen Venenkatheter ohne Sie zu starten.</li>
	<li>Starten Sie die ultraschnelle pO-2-Messung.</li>
	<li>Zeichnen Sie vor der Induktion von Lungenversagen die Werte (Baseline) aus alle relevanten Parameter.</li>
	<li>FichO2 auf 1.0 gesetzt und eine Lunge Rekrutierung Manöver durchführen (plateau Druck 40 cm H2O für 10 s).</li>
	<li>Verbinden Sie 3-Weg-Hahn mit dem proximalen Anschluss des Lungenarterie Katheters.</li>
	<li>Mischen Sie die Ölsäure und Blut/Kochsalzlösung Mischung durch Injektion wiederholt aus einer Spritze in die andere über die 3-Weg-Hahn und halten Sie die Mischzeit gründlich.</li>
	<li>Wenn es eine homogene Emulsion ist, Spritzen 2 mL der Emulsion und weiter mischen. Hinweis: Wenn mischen beendet wird, kann die Emulsion in einer lipophilen und hydrophilen Teil trennen.</li>
	<li>Aufmerksam verfolgen Sie die Hämodynamik nach der Injektion von Ölsäure und halten Sie Noradrenalin bei der hand zu. Falls erforderlich, geben Sie Noradrenalin als Bolus-Injektion (10 – 100 µg) oder kontinuierliche Infusion, arterielle Mitteldruck über 60 MmHg zu halten.</li>
	<li>Wiederholen Sie die Injektion von 2 mL der Lösung alle 3 min bis der arteriellen Partialdruck des Sauerstoffs (PaO2) / FiO2-Verhältnis liegt unter 200 MmHg.</li>
	<li>Wenn die Spritze vor dem PaO2/FiO2leer ist-Verhältnis liegt zwischen 100 und 200 MmHg, 2 weitere Spritzen wie im Schritt 5.1 beschrieben vorbereiten.</li>
	<li>30 min warten und Neubewertung der PaO2/FiO2-Verhältnis. Wenn es immer noch über 200 MmHg ist, wiederholen Sie die Schritte 5.5-5.8 bis PaO2/FiO2-Verhältnis liegt zwischen 100 und 200 MmHg.</li>
	<li>Wenn PaO2/FiO2-Verhältnis liegt zwischen 100 und 200 MmHg, 30 min warten und erneut prüfen.</li>
	<li>Wenn es dauerhaft unter 200 MmHg ist Experiment/Behandlung beginnen, sonst 2 mehr Spritzen wie im Schritt 5.1 beschrieben vorbereiten und wiederholen Sie die Schritte 5,5-5,9.</li>
	<li>Legen Sie die Lüftung nach den Vorschlägen von ARDS Netzwerk20.</li>
</ol>6. Ende des Experiments und Euthanasie
<ol><li>Inject 0,5 mg Fentanyl zusätzlich auf die kontinuierliche Anästhesie und warten Sie 5 Minuten injizieren 200 mg Propofol und 40 Mmol Kalium-Chlorid, das Tier in Tiefe Narkose einzuschläfern.</li>
</ol>

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<li>Wang, H. M., Bodenstein, M., Markstaller, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+the+pathology+of+three+widely+used+animal+models+of+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Overview of the pathology of three widely used animal models of acute lung injury.</a> European Surgical Research. 40 (4), 305-316 (2008).</li>
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Alle Autoren offen keine finanziellen oder sonstigen Interessenskonflikte.

Dieser Artikel beschreibt eine Methode der Ölsäure-induzierte Lungenschädigung als Modell für das Studium der verschiedenen Aspekte der schweren ARDS. Es gibt auch andere Protokolle mit unterschiedlichen Emulsionen, verschiedene Injektionsstellen und unterschiedlichen Temperaturen der Emulsion23,24,25,26,27,28 ,<s...

Die akute Atemnotsyndrom (ARDS) ist eine Intensive Pflege-Syndrom, das ausgiebig seit seiner Erstbeschreibung vor etwa 50 Jahren untersucht wurde1. Dieser Körper der Forschung führte zu einem besseren Verständnis der Pathophysiologie und bewirkt, dass die Entwicklung des ARDS was verbesserte Patientenversorgung und Ausgang2,3. Dennoch ist die Sterblichkeit bei Patienten mit ARDS weiterhin sehr hoch mit ca. 35-40 %4,5,6. Die Tatsache, dass etwa 10 % der ICU Kinobesuche und 23 % der Intensivpatienten, die Beatmung benötigen aufgrund ARDS unterstreicht die Relevanz für die weitere Forschung auf diesem Gebiet.
Tiermodelle sind in der Forschung verbreitet, um pathophysiologische Veränderungen und mögliche Behandlungsmethoden für verschiedene Arten von Krankheiten zu untersuchen. Aufgrund der Komplexität des ARDS gibt es keine einzige Tiermodell, diese Krankheit zu imitieren, sondern verschiedene Modelle repräsentieren verschiedene Aspekte7. Ein gut etabliertes Modell ist Ölsäure Injektion (OAI)-induzierte Lungenversagen. Dieses Modell wurde in einer Vielzahl von Tieren, einschließlich Mäuse8Ratten9, Schweine10, Hunde11und Schafe12verwendet. Ölsäure ist eine ungesättigte Fettsäure und die häufigste Fettsäure im Körper von gesunden Menschen13. Es ist im menschlichen Plasma, Zellmembranen und Fettgewebe13vorhanden. Physiologisch ist es an Albumin gebunden, während es durch die Blutbahn13durchgeführt wird. Erhöhte Konzentration von Fettsäuren in die Blutbahn sind mit verschiedenen Pathologien und die Schwere der einige Erkrankungen korreliert mit Serum Fettsäure Niveaus13verbunden. Die Ölsäure ARDS-Modell entwickelte sich in einem Versuch, ARDS durch Lipid-Embolie verursacht, wie im Trauma Patienten14zu reproduzieren. Ölsäure hat direkte Auswirkungen auf angeborene immun Rezeptoren in der Lunge13 und Trigger Neutrophilenzahl Ansammlung15, entzündliche Vermittler Produktion16und Zelle Tod13. Physiologisch, induziert Ölsäure rasch voranschreitende Hypoxämie, Zunahme der pulmonalen arteriellen Druck und extravascular Lunge Wasseransammlung. Darüber hinaus induziert es arterielle Hypotonie und myokardiale Depression7. Die Nachteile dieses Modells sind die Notwendigkeit Zentralvenöser Zugang, die fragwürdige mechanistischen Relevanz und die mögliche tödliche Fortschritt durch schnelle Hypoxämie und kardiale Depression verursacht. Der Vorteil dieses Modells im Vergleich zu anderen Modellen ist die Nutzbarkeit in kleinen und großen Tiere, die gültige Reproduzierbarkeit der pathophysiologischen Mechanismen im ARDS, akute Beginn der ARDS nach Injektion von Ölsäure, und die Möglichkeit zu studieren isoliert ARDS ohne systemische Entzündung wie Modelle vielen anderen Sepsis7. In dem folgenden Artikel wir geben eine detaillierte Beschreibung der Ölsäure-induzierte Lungenschädigung bei Schweinen und bieten repräsentative Daten zur Charakterisierung der Stabilität der Kompromisse der Lungenfunktion. Es gibt verschiedene Protokolle für OAI-induzierte Lungenversagen. Das Protokoll zur Verfügung gestellt, hier ist in der Lage, zuverlässig akute Lungenschädigung induzieren.

<table><tbody><tr><td>3-Wege-Hahn blau</td><td>Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Schweden</td><td>394602</td><td></td></tr><tr><td>3-Wege-Hahn rot</td><td>Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Schweden</td><td>394605</td><td></td></tr><tr><td>Atracurium</td><td>Hikma Pharma GmbH , Martinsried</td><td>4262659</td><td></td></tr><tr><td>Canula 20 G</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spanien</td><td>301300</td><td></td></tr><tr><td>Datex Ohmeda S5</td><td>GE Healthcare Finland Oy, Helsinki, Finnland</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Desinfektionsmittel</td><td>; LKE & Mayr GmbH, Deutschland</td><td>104802</td><td></td></tr><tr><td>Endotrachealtubus</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malaysia</td><td>112482</td><td></td></tr><tr><td>Einführmaschine für Endotrachealtubus</td><td>R&uuml; sch</td><td>5033062</td><td></td></tr><tr><td>Engstr&ouml; m Carestation</td><td>GE Heathcare, Madison USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl</td><td>Janssen-Cilag GmbH, Neuss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Handschuhe</td><td>Paul Hartmann, Deutschland</td><td>9422131</td><td></td></tr><tr><td>Incetomat-line 150 cm</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td>9004112</td><td></td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Hameln Pharmaceuticals GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laryngoskop</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malaysia</td><td>671067-000020</td><td></td></tr><tr><td>Logisches Drucküberwachungssystem</td><td>Smith- Medical Germany GmbH</td><td>MX9606</td><td></td></tr><tr><td>Logicath 7 Fr 3-Lumen 30cm</td><td>Smith- Medical Germany GmbH</td><td>MXA233x30x70-E</td><td></td></tr><tr><td>Masimo Radical 7</td><td>Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Maske zur Beatmung von Hunden</td><td>Henry Schein, Deutschland</td><td>730-246</td><td></td></tr><tr><td>Neofox Kit</td><td>Ocean optics Largo, FL USA</td><td>NEOFOX-KIT-SONDE</td><td></td></tr><tr><td>Noradrenalin</td><td>Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH</td><td>73016</td><td></td></tr><tr><td>Ölsäure</td><td>Applichem GmbH Darmstadt, Deutschland</td><td>1,426,591,611</td><td></td></tr><tr><td>Original Perfusor Spritze 50ml Luer Lock</td><td>B.Braun Melsungen AG, Deutschland</td><td>8728810F</td><td></td></tr><tr><td>PA-Katheter Swan Ganz 7,5 Fr 110cm</td><td>Edwards Lifesciences LLC, Irvine CA, USA</td><td>744F75</td><td></td></tr><tr><td>Perkutane Schleuseneinführgarnitur 8,5 und 9 Fr, 10 cm mit integriertem Blutstillungsventil/Sideport</td><td>Arrow international inc. Reading, PA, USA</td><td>AK-07903</td><td></td></tr><tr><td>Perfusor FM Braun</td><td>B.Braun Melsungen AG, Deutschland</td><td>8713820</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumchlorid</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td>6178549</td><td></td></tr><tr><td>Propofol 2%</td><td>Fresenius, Kabi Germany GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Saline</td><td>B.Braun Melsungen AG, Deutschland</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sonosite Micromaxx Ultraschallsystem</td><td>Sonosite Bothell, WA, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stainless Macintosh Size 4</td><td>Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malaysia</td><td>670000</td><td></td></tr><tr><td>Sterofundin</td><td>B.Braun Melsungen AG, Deutschland</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stresnil 40mg/ml</td><td>Lilly Germany GmbH, Abteilung Elanco Animal Health</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spritze 10 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spanien</td><td>309110</td><td></td></tr><tr><td>Spritze 2</td><td>mL Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spanien</td><td>300928</td><td></td></tr><tr><td>Spritze 20 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spanien</td><td>300296</td><td></td></tr><tr><td>Spritze 5 mL</td><td>Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spanien</td><td>309050</td><td></td></tr><tr><td>Venenkatheter 22G</td><td>B.Braun Melsungen AG, Deutschland</td><td>4269110S-01</td><td></td></tr></tbody></table>

Ölsäure-injektion bei schweinen als modell für acute respiratory distress syndrome

Oleic Acid-Injection in Pigs As a Model for Acute Respiratory Distress Syndrome

Die akute Atemnotsyndrom ist eine relevante Intensivpflege Erkrankung mit einer Inzidenz von 2,2 % bis 19 % der Patienten der Intensivstation. Trotz der Behandlung Fortschritte in den letzten Jahrzehnten leiden ARDS-Patienten noch Mortalitätsraten zwischen 35 und 40 %. Außerdem gibt es noch einen weiteren Forschungsbedarf, die Ergebnisse von Patienten mit ARDS zu verbessern. Ein Problem ist, dass kein einziges Tieres Modell kann die komplexen Pathomechanismus der akute Atemnotsyndrom nachahmen, aber mehrere Modelle existieren, um verschiedene Teile des zu studieren. Ölsäure Injektion (OAI)-induzierte Lungenschädigung ist ein gut etabliertes Modell für das Studium Beatmungsstrategien, Lunge Mechanik und Ventilation/Perfusion Verteilung bei Tieren. OAI führt zu stark beeinträchtigt Gasaustausch, Verschlechterung der Lungenmechanik und Störung der Alveolo-Kapillare Barriere. Der Nachteil dieses Modells ist die umstrittene mechanistischen Relevanz dieses Modells und die Notwendigkeit für Zentralvenöser Zugang, die vor allem in kleineren Tiermodellen schwierig ist. In Zusammenfassung, OAI-induzierte Lunge Verletzung führt zu reproduzierbare Ergebnisse bei kleinen und großen Tieren und daher ist ein gut geeignet Modell für die Untersuchung von ARDS. Jedoch ist weiterer Forschung notwendig, ein Modell zu finden, die alle Teile des ARDS imitiert und Probleme im Zusammenhang mit den verschiedenen Modellen, die heute existierenden fehlt.

PaO2/FiO2-Verhältnis sinkt nach fraktionierte Anwendung von Ölsäure (Abbildung 1). In der vorgestellten Studie war 0.185 ± 0,01 ml kg-1 Ölsäure für die Induktion der Lungenschädigung notwendig. Alle Tiere zeigten eine beeinträchtigt Sauerstoffversorgung nach der Induktion der Lungenschädigung mit Sorten in der weiteren Zeit natürlich. In Tier 1 und 3 blieb es auf einem Niveau mit kleinen Schwankungen; Tier 2 achten wir auf ein...

In diesem Artikel präsentieren wir ein Protokoll, um akute Lungenschädigung bei Schweinen durch zentral-venöse Injektion von Ölsäure zu induzieren. Dies ist ein etabliertes Tiermodell für das Studium der akute Atemnotsyndrom (ARDS).

Ölsäure-Injektion bei Schweinen als Modell für Acute Respiratory Distress Syndrome

The acute respiratory distress syndrome is a relevant intensive care disease with an incidence ranging between 2.2% and 19% of intensive care unit ...

Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen zu den pathophysiologischen Veränderungen zu beantworten, die während ardS zur Entwicklung und Bewertung neuer Behandlungsmöglichkeiten für diese Krankheit auftreten. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass sie die grundlegenden pathologischen Veränderungen reproduziert, die bei menschlichen ARDS beobachtet wurden. Für ultraschallgeführte Instrumente eine Ultraschallsonde auf das rechte Leistenband des Versuchsschweins legen und nach Femoralgefäßen suchen.Drehen Sie die Sonde um 90 Grad, um die Oberschenkelarterie in der langen Achse vollständig zu visualisieren und mit einer Seldinger-Nadel die rechte Femoralarterie unter Inline-Ultraschall-Visualisierung zu kinkern. Wenn pulsierendes helles Blut ausströmt, führen Sie den Führungsdraht ein und ziehen Sie die Nadel zurück. Stellen Sie sicher, dass die Positionierung des Seldinger Drahtes korrekt ist, indem Sie ihn mit Ultraschall visualisieren.Visualisieren Sie die femorale Vene und kann die Vene unter Inline-Ultraschall in kontinuierlicher Aspiration mit der Nadel nulaten. Wenn venöses Blut angesaugt werden kann, legen Sie Seldingers Draht ein und ziehen Sie die Nadel zurück. Verwenden Sie Seldingers Technik, um eine 5-französische arterielle Einführhülle und einen essentiellen Venenkatheter einzufügen und die entsprechenden Dreiwege-Stoppschnepfe zurückzudrehen.Vor dem Einsetzen des Lungenarterienkatheters, überprüfen Sie, ob es richtig funktioniert und legen Sie es durch die linke venöse Einführungshülle. Wenn der Lungenarterienkatheter durch die Einlösehülle gegangen ist, den Ballon mit einem Milliliter Luft aufblasen und den Lungenarterienkatheter voranbringen, während die typischen Wellenformen überwacht werden. Dann entleeren Sie den Ballon und überprüfen Sie, ob Blut durch alle Anschlüsse des Lungenarterienkatheters angesaugt werden kann.Legen Sie dann die Sonde zur ultraschnellen Messung des partiellen Sauerstoffdrucks durch die rechte arterielle Einlührmantel ein. Um eine Lungenschädigung auszulösen, laden Sie eine 20-Milliliter-Spritze mit 0,1 Milliliter pro Kilogramm Ölsäure und eine zweite 20-Milliliter-Spritze mit zwei Millilitern frisch entnommenem Blut. Fügen Sie der Spritze mit Blut Eine Saline zu einem Gesamtvolumen von 20 Millilitern in beiden Spritzen hinzu und verbinden Sie beide Spritzen mit einem Drei-Wege-Stopphahn.Schließen Sie eine Noradrenalin-Spritzenpumpe an einen Port des zentralen Venenkatheters an und beginnen Sie eine ultraschnelle partielle Sauerstoffdruckmessung. Zeichnen Sie die Basiswerte aller relevanten Parameter auf und legen Sie den Anteil des inspirierten Sauerstoffs auf 1,0 fest. Führen Sie ein Lungenrekrutierungsmanöver durch und verbinden Sie den Drei-Wege-Stopphahn mit dem proximalen Port des Lungenarterienkatheters.Dann injizieren Sie die Öl- und Blutsaline-Mischungen, wiederholt von einer Spritze in die andere, über den Drei-Wege-Hahn, um die Lösungen gründlich zu mischen. Wenn eine homogene Emulsion erreicht wurde, injizieren Sie zwei Milliliter der Emulsion in den zentralen Venenkatheter und mischen Sie weiter. Überwachen Sie die Hämodynamik nach der Injektion genau und geben Sie Noradrenalin als 10 bis 100 Mikrogramm Bolusinjektion, wenn dies erforderlich ist, um den mittleren arteriellen Druck über 60 Millimeter Quecksilber zu halten.Wiederholen Sie die Injektion der Zwei-Milliliter-Ölsäurelösung alle drei Minuten, bis der arterielle Teildruck des Sauerstoffanteils des inspirierten Verhältnisses unter 200 Millimeter Quecksilber liegt. Warten Sie 30 Minuten und bewerten Sie den Teildruck des Sauerstoffanteils des inspirierten Verhältnisses neu. Wenn das Verhältnis immer noch über 200 Millimeter Quecksilber liegt, wiederholen Sie die Injektionen, bis der Teildruck des Sauerstoffanteils des inspirierten Verhältnisses unter 200 Millimeter Quecksilber fällt.Stellen Sie dann die Beatmung nach den Vorschlägen des Netzwerks des akuten Atemnotsyndroms ein. Der partielle Sauerstoffdruckanteil des inspirierten Sauerstoffverhältnisses verringerte sich nach der fraktionierten Anwendung von Ölsäure. Trotz einer typischen Beeinträchtigung der Sauerstoffversorgung nach der Induktion von Lungenverletzungen werden häufige Schwankungen der Sauerstoffbeeinträchtigung zwischen Tieren während des Beeinträchtigungszeitverlaufs beobachtet.Erforderlich ist eine genaue Überwachung des partiellen Sauerstoffdruckanteils des inspirierten Sauerstoffverhältnisses bei gleichzeitiger Abgabe der Ölsäure. Die Abnahme des partiellen Sauerstoffdruckanteils des inspirierten Sauerstoffverhältnisses wird durch eine Erhöhung des pulmonalen Arteriendrucks, der typischerweise für den Rest des Experiments erhöht bleibt, mit einigen Fluktuationen auch zwischen Den Tieren beobachtet. Lungenverletzungen sind in der Lunge, die sechs Stunden nach der Induktion von Lungenverletzungen geerntet wird, visuell nachweisbar, und die histologische Analyse zeigt Alveoladerödem und Blutungen.Nach dem Anschauen dieses Videos sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie eine akute Lungenverletzung bei Schweinen durch eine essentielle venöse Injektion von Ölsäure induzieren können. Vergessen Sie nicht, dass die Arbeit mit Ölsäure extrem gefährlich sein kann und Vorsichtsmaßnahmen wie das Tragen von Handschuhen treffen kann, und Sicherheitsklassen sollten immer während der Durchführung dieses Verfahrens genommen werden.

oleic-acid-injection-pigs-as-model-for-acute-respiratory-distress

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Wiederholte Lungenspülungen bei narkotisierten Schweinen Lungenverletzung ähnlich wichtigen Aspekte der menschlichen akutem Atemnotsyndrom (ARDS) induzieren. Zu diesem Zweck werden die Lungen wiederholt mit 0,9% Kochsalzlösung bei 37 ° C gespült. Das Ziel des Protokolls ist eine reproduzierbare Milderung der Gasaustausch und Hämodynamik für die Forschung in ARDS.

Lavage-induzierte Surfactant Depletion in Schweine als Modell des Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS)

Wir beschreiben ein Modell des Salzsäure-induzierten akuten Atemnotsyndroms (ARDS) bei Ferkeln, die mit halogenierten Mitteln, Isofluran und Sevofluran, durch ein Gerät zur inhalationsintensiven Intensivsedierung sediert werden. Dieses Modell kann verwendet werden, um die biologischen Mechanismen halogenierter Mittel auf Lungenverletzungen und -reparaturen zu untersuchen.

Halogenierte Wirkstoffabgabe im Schweinemodell des akuten Atemnotsyndroms über ein Gerät vom Typ Intensivstation

Das vorliegende Protokoll beschreibt ein Lungenverletzungsmodell bei Mäusen, bei dem Ölsäure verwendet wird, um das akute Atemnotsyndrom (ARDS) nachzuahmen. Dieses Modell erhöht die Entzündungsmediatoren auf Ödeme und verringert die Lungencompliance. Ölsäure wird in der Salzform (Oleat) verwendet, da diese physiologische Form das Risiko einer Embolie vermeidet.

Mausmodell des Ölsäure-induzierten akuten Atemnotsyndroms

Die kontinuierliche Infusion von Ölsäure in die Lungenarterie eines anästhesierten erwachsenen Schweins führt zu akutem Atemversagen und ermöglicht ein kontrolliertes Experimentieren während der akuten respiratorischen Dekompensation.

Ein Schweinemodell für akutes Atemversagen mit einer kontinuierlichen Infusion von Ölsäure

Wir beschreiben eine Technik für die Forschung Bronchoskopie und BAL mit Niederdruck-Absaugung. Die Technik wird verwendet, um die Immunzellen aus der Lunge bronchoalveolären Oberflächen ernten. Lokalanästhesie und milden Sedierung (Midazolam) verwendet. Themen vertragen die Prozedur gut und Erfahrung minimalen Nebenwirkungen.

Bronchoalveoläre Lavage (BAL) für Forschung, Beschaffung angemessene Probenausbeute

Kontinuierliche 12-Kanal-EKG (EKG) identifizieren können transiente Myokardischämie, auch wenn sie symptomfrei, bei Patienten mit Verdacht auf akutes Koronarsyndrom (ACS). In diesem Artikel beschreiben wir unsere Methode zur Initiierung Patientenüberwachung mit einem Holter-Gerät, das Herunterladen der EKG-Daten für die Offline-Analyse, und wie die EKG-Software nutzen, um transiente Ischämie zu identifizieren.

Ein Forschungszentrum Verfahren zum Nachweis von Transient Myokardischämie bei Patienten mit Verdacht auf akutes Koronarsyndrom Mit Continuous ST-Segment-Analyse

Die vorliegende Arbeit veranschaulicht die Zweckmäßigkeit der sublingualen Immuntherapie, um die angeborene Immunantwort in der Lunge zu verstärken und Schutz vor akuter Pneumokokken-Pneumonie bei Mäusen zu bieten.

Sublinguale Immuntherapie als Alternative zum Schutz vor akuten Atemwegsinfektionen ausgelöst werden

Dieses Protokoll induziert eine akute Lungenschädigung bei einer Maus, die der Pathogenese der sauren Pneumonitis, die beim Menschen beobachtet wurde, sehr treu ist. Wir erzeugen eine maximale akute nichtletale Lungenschädigung mit niedrigem pH-Wert und berücksichtigen Unterschiede in der anatomischen Atmungsstruktur von Nagetieren und Menschen mit Hilfe einer offenen Tracheostomie in Verbindung mit einer zirkumferentialen Druckentlastung.

Offene Tracheotomie Magensäure Aspiration Mausmodell der akuten Lungenschädigung Ergebnisse in Maximal Akute nonlethal Lung Injury

Diese Arbeit beschreibt ein Protokoll, das einen komponentenaufgelösten Ansatz verwendet, um Sensibilisierung für Gräserpollenallergene in einer Kohorte von Patienten aus Südchina mit allergischer Rhinitis und / oder Asthma zu untersuchen.

Ein komponenten-aufgelöster diagnostischer Ansatz für eine Studie auf Gras-Pollen-Allergenen in chinesischen Südländer mit allergischer Rhinitis und / oder Asthma

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode, einen Abrieb auf der Augenoberfläche der Maus zuzufügen und die Wundheilung danach zu folgen. Das Protokoll nutzt eine augenfällige Grat, teilweise das oberflächenepithel des Auges in narkotisierter Mäuse zu entfernen.

Epitheliale Korneaabnutzung mit okulärer Burr als Modell für die Hornhaut Wundheilung

Erfahren Sie, wie man durch zentralvenöse Ölsäure-Injektion bei Schweinen ein ARDS-Modell erzeugt. Diese Methode reproduziert die menschliche Pathophysiologie und ermöglicht die Entwicklung neuer Therapieansätze.

Ölsäure-Injektion bei Schweinen als Modell für Acute Respiratory Distress Syndrome

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