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DOI: 10.3791/57853-v
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Das Ziel dieses Protokolls ist in Situ Hybridisierung auf Erwachsenen Korallen Proben durchführen, die in Paraffin eingebettet und auf Objektträger geschnitten wurden. Dies ist eine qualitative Methode zur Visualisierung des räumlichen Ausdrucks einer RNA Gegenstrang Sonde in Paraffin-eingebetteten Gewebe verwendet.
Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen in der Zellbiologie von Korallen zu beantworten, z. B. welche Arten von Geweben und Zellen bestimmte Arten von Genen exprimieren. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass Sie visuelle Informationen über die RNA-Expression haben. Obwohl diese Methode Einblicke in die räumliche Genexpression bei erwachsenen Korallen geben kann, kann sie auch in anderen Lebensstadien von Korallen sowie in anderen wirbellosen Systemen eingesetzt werden.
Im Allgemeinen werden Personen, die mit dieser Methode noch nicht vertraut sind, Schwierigkeiten haben, da es so viele Schritte und Lösungen gibt, die man im Auge behalten muss. Sie müssen also darauf achten, wo sie sich im Protokoll befinden, und die Zeit im Auge behalten, wenn sie die Wäschen durchführen. Kevin Rodriguez, ein Techniker in meinem Labor, wird dieses Verfahren vorführen.
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