<em>Saccharomyces cerevisiae</em> Metabolic Labeling with 4-thiouracil and the Quantification of Newly Synthesized mRNA As a Proxy for RNA Polymerase II Activity

Tiago Baptista; Didier Devys

doi:10.3791/57982

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Saccharomyces cerevisiae Beschriftung mit 4-Thiouracil und Quantifizierung der metabolischen synthetisiert neu mRNA als Proxy für RNA-Polymerase II Aktivität

<em>Saccharomyces cerevisiae</em> Metabolic Labeling with 4-thiouracil and the Quantification of Newly Synthesized mRNA As a Proxy for RNA Polymerase II Activity

JoVE Journal
Genetik

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Saccharomyces cerevisiae Metabolic Labeling with 4-thiouracil and the Quantification of Newly Synthesized mRNA As a Proxy for RNA Polymerase II Activity

Saccharomyces cerevisiae Beschriftung mit 4-Thiouracil und Quantifizierung der metabolischen synthetisiert neu mRNA als Proxy für RNA-Polymerase II Aktivität

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09:21 min

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October 22, 2018

DOI:

10.3791/57982-v

DOI:

10.3791/57982-v

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09:21 min

October 22, 2018

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Tiago Baptista^1,2,3,4, Didier Devys^1,2,3,4

¹Institut de Génétique et de Biologie Moléculaire et Cellulaire, Illkirch, France ²Centre National de la Recherche Scientifique, Illkirch, France ³Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, Illkirch, France ⁴Université de Strasbourg

Summary

Das hier beschriebene Protokoll basiert auf der genomweiten Quantifizierung der neugebildete mRNA von Hefezellen mit 4-Thiouracil beschriftet gereinigt. Diese Methode ermöglicht die Messung der mRNA-Synthese von mRNA Decay abgekoppelt und schafft somit eine genaue Messung der RNA-Polymerase II Transkription.