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DOI: 10.3791/58041-v
Jennifer M. Brazill1, Yi Zhu1, Chong Li1, R. Grace Zhai1,2
1Department of Molecular and Cellular Pharmacology,University of Miami Miller School of Medicine, 2School of Pharmacy, Key Laboratory of Molecular Pharmacology and Drug Evaluation (Yantai University), Ministry of Education, Collaborative Innovation Center of Advanced Drug Delivery System and Biotech Drugs in Universities of Shandong,Yantai University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a versatile workflow for extracting quantitative data from fluorescence imaging in Drosophila models of neurodegeneration. It focuses on protein aggregation and autophagic flux to enhance the understanding of cellular mechanisms involved in neurodegenerative diseases.
Wir haben einen einfachen und anpassungsfähigen Workflow zur Fluoreszenz-Imaging-basierte zellbiologischen Studien Proteinaggregation und selbstverdauende Fluss in das zentrale Nervensystem der Drosophila -Modelle von quantitativen Daten entlocken entwickelt. Neurodegeneration.
Wir haben diese Methode entwickelt, um quantitative Daten aus fluoreszenzbasierten Bildgebungsstudien zu extrahieren, um komplexe und dynamische zellbiologische Prozesse in Drosophila-Modellen der Neurodegeneration zu extrahieren. Der Hauptvorteil dieser Technik ist der anpassungsfähige, halbautomatische Bildanalyse-Workflow zur Minimierung von Selektionsverzerrungen, zur Maximierung der Abtastleistung und zur Erzielung von Reproduzierbarkeit im gesamten Feld. Dieser Ansatz kann für die Analyse anderer proteinhaltiger Punktzahlen und membrangebundener Kompartimente erweitert werden, die an der Neurodegeneration beteiligt sind, was letztendlich unser mechanistisches Verständnis von neurodegenerativen Erkrankungen verbessern wird.
Um die Lamina während der Dissektion unter einem Stereomikroskop intakt zu halten, schieben Sie zwei Pinzetten unter die Netzhaut und reißen Sie vorsichtig durch die Mitte des Auges, um die Netzhaut zu entfernen. Halten Sie die Pinzette parallel zur Laminaoberfläche, um das verbleibende Netzhautgewebe, das an der Lamina haftet, zu entfernen. Präparieren Sie drei bis fünf Gehirne für jede Gruppe und übertragen Sie die Gehirne für 15 Minuten bei Raumtemperatur unter leichtem Schaukeln in ein Mikrozentrifugenröhrchen mit einem geeigneten Fixiermittel.
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