Das unvorhersehbare milde Dauerstress Protokoll zur Induktion Anhedonie bei Mäusen

Hier präsentieren wir das unberechenbare milde Dauerstress Protokoll bei Mäusen. Dieses Protokoll induziert einen langfristige Depressive-ähnlichen Phänotyp und ermöglicht es, um die Wirksamkeit von vermeintlichen Antidepressiva bei der Umkehr der Verhaltens- und Neuromolecular depressiv-ähnliche Defizite zu beurteilen.

Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass sie wichtige neurobiologische und Verhaltensmerkmale, die mit der Pathogenese, Ätiologie und Behandlung von Depressionen verbunden sind, angemessen übersetzt. Diese Methode kann helfen, schlüsselhafte Fragen beim Verständnis der Pathophysiologie von Angst und Depression zu beantworten und die Entwicklung neuer pharmakologischer Behandlungen zu fördern. Die Implikation dieser Technik erstreckt sich auf die Therapie von Depressionen, weil sie Screenings auf potenzielle Antidepressiva ermöglicht, während sie dem langwierigen Verlauf der Remission ähnelt, der bei menschlichen Patienten offensichtlich ist.

Beginnen Sie mit dem Füllen von Hauskäfigen mit frischem Sägemehl und fügen Sie ein Stück Watte zur Anreicherung hinzu. Haustiere im Hauskäfig für eine Akklamationszeit von einer Woche, und halten Sie einen konsistenten 12-Stunden-Licht/Dunkel-Zyklus. Erlauben Sie ad libitum Zugang zu Nagetier Chow und Wasser.

Entwerfen Sie ein vierwöchiges Stressor-Regime, bei dem jeder der sieben Stressoren einmal pro Woche an einem anderen Tag pro Woche eingesetzt wird. Nach einer Woche Akklamation die Anwendung der Stressoren auf die vier Wochen alten Mäuse im UCMS-Raum initiieren. Für den ersten Stressor, legen Sie Mäuse zusammen mit ihren Hauskäfig-Gegenstücken in einem leeren Käfig.

Füllen Sie den leeren Käfig mit Wasser, das bei 24 plus-oder-minus-ein Grad Celsius gehalten wird, bis zu einer Tiefe von einem Zentimeter, und halten Sie Mäuse vier Stunden im nassen Käfig. Dann übertragen Sie jede Maus in einen separaten individuellen transienten Trockenkäfig mit einer Wärmelampe darüber, einem Heizkissen unter ihr und Papiertuchbetten. Legen Sie ein Thermometer in den transienten Käfig, um zu überprüfen, ob die Temperatur 37 Grad Celsius nicht überschreitet.

Halten Sie jede Maus im vorübergehenden Käfig, bis sie trocken ist und belebt aussieht, und bringen Sie dann Mäuse mit den gleichen Gegenstücken in den heimischen Käfig zurück. Für gedämpftes Sägemehl wird schlechtes Wasser bei 24 Plus-oder-Minus-Eins-Grad-Grad Celsius in den heimischen Käfig gehalten, bis das Sägemehl mäßig gedämpft ist. Nach vier Stunden trocknen Sie die Mäuse in vorübergehenden Käfigen.

Dann legen Sie die Mäuse mit Hauskäfig-Gegenstücken in einen sterilen Käfig mit frischem Sägemehl. Für den nächsten Stressor, kippen Sie den Käfig bei 45 Grad gegen die Wand für vier Stunden. Für Empty Cage, übertragen Sie alle fünf Mäuse zusammen mit ihren spezifischen Home-Käfig-Pendants aus dem Heimischen Käfig in einen leeren Käfig für vier Stunden.

Für den fünften Stressor, übertragen Mäuse zusammen mit ihren spezifischen Hauskäfig-Pendants aus dem Hauskäfig in einen Käfig, der von einer anderen Gruppe von Mäusen für einen Zeitraum von mindestens drei Tagen vor der Stressoranwendung untergebracht wurde. Halten Sie Mäuse vier Stunden im unbekannten Käfig auf. Für den sechsten Stressor jede Maus einzeln in einem sauberen Maus-Restrainer für vier Stunden.

Danach kehren Sie Mäuse mit den gleichen Gegenstücken in den heimischen Käfig zurück. Für den letzten Stressor, übertragen Sie Mäuse in ihrem Hauskäfig mit ihren spezifischen Gegenstücken in den UCMS-Raum. Halten Sie das Licht 24 aufeinanderfolgende Stunden an.

Schließlich, nach Stressor Anwendung, geben Sie die Käfige der UCMS-Gruppe aus dem UCMS-Raum in den Wohnraum. Während der vier Wochen der Stressbelastung, halten Sie die naive Gruppe in ihren Hauskäfigen in der Wohnkabine. Am Tag nach der Einstellung des UCMS-Protokolls beginnen Sie mit der Verabreichung von vermeintlichen therapeutischen pharmakologischen Wirkstoffen.

Nach der Behandlungsphase entfernen Sie jede Maus aus dem Heimischen Käfig und legen Sie sie einzeln in einen Käfig, der mit frischem Sägemehl und einem Stück Watte zur Anreicherung gefüllt ist. Dann bereiten Sie zwei Flaschen, eine mit destilliertem Wasser, und eine andere mit 2%Saccharose-Lösung. Wiegen Sie die beiden Flaschen und legen Sie sie an beiden Enden des Käfigdeckels und legen Sie Nagetier Chow zwischen den beiden Flaschen, um Mäusen ad libitum Zugang zu beiden Lösungen und Nahrung für einen Zeitraum von 24, 48, 72 oder 144 Stunden zu ermöglichen.

Nach 12 Stunden oder einmal täglich, wenn die Testdauer 24 Stunden überschreitet, wiegen Sie die Flaschen, um den Verbrauch aus jeder Flasche zu schätzen, und wechseln Sie die Positionen der Düsen, um die Möglichkeit auszugleichen, dass die Ergebnisse durch Positionspräferenz verwirrt wurden. Schließlich wiegen Sie die Flaschen jeden Tag, um den Verbrauch aus jeder Flasche zu schätzen. Die UCMS-Gruppe zeigte eine verminderte Saccharosepräferenz im Vergleich zur naiven Gruppe, was darauf hindeutet, dass das UCMS-Protokoll wirksam bei der Indonie induzieren konnte.

Darüber hinaus zeigte die UCMS-Gruppe im Vergleich zur naiven Gruppe verminderte Hippocampus-BDNF-Spiegel, was darauf hindeutet, dass das UCMS-Protokoll zu einer Verringerung der Hippocampus-BDNF-Spiegel führte, wie sie bei menschlichen Depressionen offensichtlich war. Die Ergebnisse zeigten, dass die UCMS-Salinegruppe eine signifikante Abnahme der Saccharosepräferenz im Vergleich zur naiven Saline-Gruppe sowie im Vergleich zu den UCMS-Escitalopram- und den UCMS-NHT-Gruppen zeigte, was darauf hindeutet, dass sowohl Escitalopram als auch NHT die UCMS-induzierte Anhedonia normalisierten. Darüber hinaus zeigte die UCMS-Salinegruppe einen verringerten Hippocampus-BDNF-Spiegel im Vergleich zur naiven Saline-Gruppe sowie im Vergleich zu den UCMS-Escitalopram- und den UCMS-NHT-Gruppen, was darauf hindeutet, dass sowohl Escitalopram als auch NHT die UCMS-induzierte Reduktion der BDNF-Spiegel im Hippocampus normalisierten.

Nach diesem Verfahren können andere Methoden wie Schwanzsuspensionstest, erzwungener Schwimmtest und erhöhtes Plus-Maze durchgeführt werden. Diese Tests werden verwendet, um Verhaltensverzweiflung sowie exploratives und Angstähnliches Verhalten zu bewerten.