Eine konditionierte Ort Präferenz Protokoll zur Messung der Inkubation des Verlangens bei Ratten
6. November 2018
Hier ist ein Morphin bedingt Platz Präferenz (CPP) Protokoll beschrieben, Inkubation des Verlangens bei Ratten zu messen.
Diese Methode kann helfen, einige Schlüsselfragen im Bereich der Drogenabhängigkeit über Drogenkonsum Heißhunger und die Inkubation von Heißhunger Antwort zu adressieren. Mit nur sechs Tagen Morphinkonditionierung kann die konditionierte Ortpräferenz-Gedächtnisantwort auf 18 Tage verlängert werden, um die Heißhungerphänomene im Rattenmodell zu beobachten. Die Implikationen dieses Rattenmorphinkonditionierungsmodells reichen auf die Förderung unseres Verständnisses der zugrunde liegenden Mechanismen der Inkubation von Heißhunger.
Vor Beginn des Verfahrens, konstruieren Sie eine dreikammerkonditionierte Platzpräferenzvorrichtung bestehend aus zwei großen, schwarzen 30 mal 25 mal 30 Zentimeter Seitenkammern. Und eine weiße 11 mal 25 mal 30 Zentimeter mittelgroße Mittelkammer mit glattem, weißem PVC-Boden. Fügen Sie dann verschiedene taktile Hinweise in die Seitenkammern ein, um die ursprünglichen Präferenzen der Ratte zu testen.
Für die Vorkonditionierung der Tiere, entfernen Sie die Guillotine Türen, um freien Zugang zum gesamten Gerät zu ermöglichen. Und legen Sie eine Ratte in die mittlere Kammer. Zeichnen Sie die Aktivität des Tieres für 15 Minuten auf und berechnen Sie die Zeit, die in den beiden Seitenkammern am dritten Tag als Basislinie verbracht wurde.
Zur Konditionierung der Tiere, injizieren Sie die morphinkonditionierte Rattengruppe mit einem Milliliter pro Kilogramm von 10 Milligramm pro Milliliter Morphinhydrochlorid IP am Morgen. Und mit einem Milliliter pro Kilogramm Saline 10 Stunden später, jeden Tag für sechs Tage. Platzieren Sie jede Ratte in ihr geeignetes Medikament gepaart, nicht bevorzugt oder saline gepaart, bevorzugte Kammer für 45 Minuten unmittelbar nach jeder Injektion.
Für die Prüfung der morphinkonditionierten Tiere, an den Tagen zwei, 10 und 18 nach der letzten Konditionierung Sitzung, entfernen Sie die Guillotine Türen, um freien Zugang zum gesamten Gerät zu ermöglichen. Und notieren Sie die Aktivität jedes Tieres für 15 Minuten nach der Platzierung in der mittleren Kammer für die freie Erkundung des gesamten Apparates in einem Morphium freien Zustand. Die Speichererhaltung der konditionierten Platzpräferenz in den Morphin- und Salinegruppen wird bewertet, indem die konditionierte Platzpräferenzpunktzahl an mehreren Zeitpunkten nach der letzten Konditionierungssitzung gemessen wird.
Die Anzahl der Einträge in die Seitenkammern entspricht der Anzahl der aktiven Antworten im Selbstverwaltungsparadigma, was die verstärkende Eigenschaft des Morphins widerspiegelt und mit einer erhöhten Anzahl von Einträgen, die auf die Inkubation des Verlangens hinweisen. Wie dargestellt, kann mit diesem Protokoll erfolgreich eine morphinkonditionierte Platzpräferenz hergestellt werden. Induzieren eines langfristigen Morphin Belohnung Speicher für bis zu 18 Tage nach der letzten Konditionierung Sitzung.
Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, sich zu entscheiden, die taktilen Hinweise auszugleichen. Nach diesem Verfahren können andere Maßnahmen wie die Wiedereinstellung nach jeder Konditionierung durchgeführt werden. Um zusätzliche Fragen zu beantworten, ob Wiederherstellung unter der Inkubation des Verlangens ähnliche zugrunde liegende Mechanismen haben.
Nach der Wiedereinstellung ebnete diese Technik den Weg für Forscher auf dem Gebiet der Drogenzugabe, um die Inkubation des Verlangens in Ratten'conditioned Platz präferenziver Paradigmen zu erforschen.
Übersicht
In diesem Artikel wird ein Protokoll zur bedingten Ortspräferenz mit Morphin (CPP) beschrieben, das zur Messung der Inkubation von Verlangen bei Ratten eingesetzt wird. Die Methode ermöglicht es Forschenden, die zugrundeliegenden Mechanismen von Drogenverlangen und Sucht zu untersuchen.
Wesentliche Studienkomponenten
Bereich der Wissenschaft
- Neurowissenschaften
- Verhaltenspsychologie
- Pharmakologie
Hintergrund
- Das Verständnis von Drogenverlangen ist entscheidend für die Suchtforschung.
- Die konditionierte Ortspräferenz ist eine gängige Methode zur Beurteilung drogenbezogener Erinnerungen.
- Das Phänomen der Inkubation des Verlangens kann mithilfe dieses Modells untersucht werden.
- Frühere Studien haben langfristige Effekte der Drogenkonditionierung gezeigt.
Zweck der Studie
- Etablierung eines zuverlässigen Modells der morphinbedingten konditionierten Platzpräferenz bei Ratten.
- Untersuchung der Inkubation des Verlangens über die Zeit.
- Beurteilung der verstärkenden Eigenschaften von Morphin anhand verhaltensbezogener Reaktionen.
Verwendete Methoden
- Aufbau einer dreikammerigen CPP-Vorrichtung zur Untersuchung.
- Vorbehandlung der Ratten zur Etablierung von Baseline-Präferenzen.
- Gabe von Morphin- und Kochsalzlösungsinjektionen über sechs Tage.
- Messung der Aktivität und Präferenzen zu mehreren Zeitpunkten nach der Konditionierung.
Hauptergebnisse
- Erfolgreiche Einrichtung einer Morphin-CPP mit langfristiger Gedächtnisspeicherung.
- Erhöhte Eintritte in die drogenpaarierten Kammern deuteten auf eine Inkubation des Verlangens hin.
- Das Verhalten zeigte die verstärkenden Eigenschaften von Morphin wider.
- Die Ergebnisse unterstützen weitere Untersuchungen der Mechanismen des Verlangens bei Sucht.
Schlussfolgerungen
- Das Morphin-CPP-Modell eignet sich zur Untersuchung von Drogenverlangen.
- Langzeitwirkungen der Morphin-Konditionierung können beobachtet werden.
- Dieses Protokoll kann dazu beitragen, die Dynamik der Sucht zu verstehen.
Häufig gestellte Fragen
Aussagekräftige Relevanz für die Industrie
Dieses Protokoll ermöglicht es Forschern in der Biopharmaindustrie, den zeitabhängigen Anstieg des Drogenverlangens während der Abstinenz zu modellieren, eine zentrale Herausforderung in der Suchttherapie. Durch die Erfassung der Verlangensinkubation bei Ratten unterstützt es die Zielvalidierung und die mechanistische Risikominderung neuartiger Interventionen, die darauf abzielen, Rückfälle zu verhindern. Die Methode schafft eine translationale Brücke zwischen präklinischem Screening und der Bewertung klinischer Kandidaten in der Pipeline für Suchterkrankungen.
Strategische Anwendungen in der Biopharma-Forschung und -Entwicklung
Frühe Entdeckung und Zielvalidierung
- Wissenschaftlicher Wert: Untersucht therapeutische Hypothesen zur Langzeit-Belohnungserinnerung und zur Neurobiologie des Verlangens.
- Operationaler Wert: Ermöglicht die funktionelle Zielvalidierung durch verhaltensbasierte Messung von Inkubationsphänomenen.
- Prädiktiver Wert: Unterstützt die Portfolio-Priorisierung, indem Ziele identifiziert werden, die die zeitabhängige Steigerung des Verlangens modulieren.
Screening und Assay-Entwicklung
- Assay-Bereitschaft: Bereitet validierte biologische Systeme für die Wirkstoff-Screening-Untersuchung gegen Suchtkenngrößen vor.
- Quantitative Ausgabe: Misst den Zugang zu Kammern als Proxy für aktive Reaktionen und ermöglicht dadurch die Analyse der Dosis-Wirkungs-Beziehung.
- Reproduzierbarkeit: Standardisierte taktile Reize und Kammergestaltung unterstützen die Konsistenz zwischen verschiedenen Laboren bei der Bewertung von Verlangen.
Translationale und präklinische Forschung
- Klinische Relevanz: Modelliert die Inkubation von Verlangen, ein klinisch beobachtetes Phänomen bei der menschlichen Sucht.
- Präklinische Kontinuität: Ermöglicht die Untersuchung über ein Beobachtungsfenster von 18 Tagen nach der Konditionierung.
- Risikoadjustierte Entscheidungen: Liefert Entscheidungskriterien (Go/No-Go) basierend auf der Abschwächung der Verlangensinkubation durch Testsubstanzen.
Pipeline- und Workflow-Integration
Die Methode fügt sich in den Entdeckungsprozess von der Hypothesenprüfung zum Ziel bis zur Optimierung von Leitsubstanzen ein und ermöglicht insbesondere die Bewertung von Verbindungen, die die Inkubation von Verlangen über längere Abstinenzphasen hinweg stören.
- Entdeckungsbiologie: Ermöglicht die mechanistische Untersuchung der Persistenz morphiumassoziierter Erinnerungen und neuroadaptiver Veränderungen im Zusammenhang mit Verlangen.
- Screening: Liefert quantitative Verhaltensparameter (Kammerbetritte), um die Wirkung von Substanzen auf die Inkubation des Verlangens zu bewerten.
- Analytik: Erzeugt Zeitreihendaten zu Präferenz und Betreten, um Bedingungen über verschiedene Abstinenzintervalle hinweg zu vergleichen.
- Translationale Forschung: Korreliert mit klinischen Inkubationszeitlinien und unterstützt somit die prädiktive Validität von Strategien zur Rückfallprävention.
- Unternehmensweite Wiederverwendung: Schafft eine wiederverwendbare Plattform zur Bewertung unterschiedlicher pharmakologischer Interventionen, die auf die Persistenz von Verlangen abzielen.
Operative und unternehmerische Auswirkungen
- Wissenschaftlicher Wert: Bietet eine vorhersagekräftige Sicherheit bezüglich der Zielstrukturenbindung durch Modellierung klinisch relevanter Verlangensverläufe.
- Operationaler Wert: Ermöglicht eine standardisierte, skalierbare Beurteilung der Verlangensinkubation mit minimalem prozeduralen Aufwand.
- Strategischer Wert: Steigert die Kapitaleffizienz, indem er die frühzeitige Identifizierung von Substanzen ermöglicht, die maladaptive Gedächtnisprozesse abschwächen.
- Portfolio-Wirkung: Erleichtert die risikoadjustierte Priorisierung von Kandidaten basierend auf deren Wirkung auf die langfristige Expression von Verlangen.
Durchführungsaspekte
- Erfordert Fachkenntnisse in der Verhaltenspharmakologie an Nagetieren und der Ortspräferenz-Konditionierung.
- Hängt von einer präzisen Konstruktion der Kammern mit deutlich unterschiedlichen taktilen Bodenreizen ab.
- Setzt einen einheitlichen Umgang mit den Tieren und einen konstanten Injektionszeitplan während der sechstägigen Konditionierungsphase voraus.
- Beruht auf der verblindeten Auswertung der Kammereintritte, um Beobachterbias zu minimieren.
- Auf die Messung von Annäherungsverhalten beschränkt; erfasst keine affektiven oder motivationalen Aspekte des Verlangens.
