Name: Ein Pleuraerguss Modell bei Ratten durch intratracheale Instillation von Polyacrylat/Nanosilica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 32 s
Description: Erfahren Sie die intratracheale Instillation von Polyacrylat/Nanosilica zur Erzeugung eines Pleuraerguss-Modells bei Ratten. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung der pulmonalen Toxizität von Nanomaterialien.

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Die vorliegende Studie und Produktion zu diesem Artikel wurden von der National Natural Science Foundation of China (Grant 81773373, 81172614 und Grant 81441089) finanziert. Wir danken Dr. Jin Yan und Dr. Pan Yujie, des Department of Emergency, Beijing Chaoyang Krankenhaus und Dr. Qu Peng von Ultraschall Medizinabteilung, Beijing Chaoyang Krankenhaus für die Hilfe bei der Videoproduktion.

Die Studie folgte Richtlinien des Capital Medical University (Beijing, PR China) für die Pflege und Verwendung von Versuchstieren. Alle Verfahren wurden durch das Tier ethischen Ausschuss der Hauptstadt medizinische Universität in China angenommen.
(1) experimentelle Vorbereitungen
Hinweis: Die weiblichen bestimmten Pathogen-freies Wistar-Ratten akklimatisieren (Gewicht: 200 ± 10 g) zu den Versuchsaufbauten für eine Woche vor der Verabreichung (Umweltbedingungen: Licht / dunkel: 12h / 12h, Temperatur 22 ± 2 ° C, Luftfeuchtigkeit 50 ± 10 %).
<ol><li>Verwenden Sie eine frische 10 mL PA/NPSi Suspensionen (Nanosilica Ø:20 ± 5 nm durch in-situ Emulsionspolymerisation) in normalen Kochsalzlösung bei Konzentrationen von 3,125, 6,25 und 12,5 mg/mL, bzw.10verdünnt. Beschallen Sie vor der Verabreichung die Aufhängungen für 20-30 min und Wirbel für 10 min um Nanopartikel Aggregation zu verhindern.</li>
	<li>Ebenso teilen insgesamt 20 Ratten in vier Gruppen: eine Gruppe für jede Konzentration von PA/NPSi (0, 3,125 6,25 und 12,5 mg/mL).</li>
	<li>Um sie zu betäuben, legen Sie die Ratten in einem geschlossenen Behälter mit 1,5 mL Ether (99,5 %) oder andere Protokolle IACUC genehmigt. Suchen Sie nach 60-90 s der Anästhesie das Ausbleiben einer Reaktion, Reflex pedal. Stellen Sie sicher, dass die Ratten atmest.</li>
	<li>Die narkotisierten Ratte auf dem Brett und befestigen Sie ihre vorderen Zähne mit einer sterilisierten Nylon auf dem Brett zu.</li>
	<li>Öffnen Sie ihren Mund und setzen Sie seine Riss der Stimmritze mit Hilfe eines chirurgischen Zangen und frontalen Linse.</li>
	<li>Die Ratten mit 0,5 mL Suspension PA/Koalitionsregierungen in jede Ratte Lunge für eine Gesamtmenge von 1 mL mit einem feinen Schlauch mit einer sterilisierten Nadel stumpf in der bilateralen Bronchus zu vermitteln.</li>
	<li>Legen Sie die Ratten auf einer Kunststoffplatte in Rückenlage und lassen Sie die Ratten langsam in ca. 5-10 min zu erholen.</li>
</ol>2. Ultraschalluntersuchung für Pleuraerguss
<ol><li>Verwenden Sie ein Ultraschallsystem mit einer linear-Array-Schallkopf (Frequenz: 8 MHz), Ratten auf 1, 3, 7 und 14 Tagen10zu prüfen.</li>
	<li>Anästhesie (0,35 mL/100 g, 10 % Chloral Hydrate, i.p.), die Ratten zu geben und überprüfen Sie, ob des Mangels an Pedal Reflexe.</li>
	<li>Entfernen Sie die Haare aus Ratten Brust und oberen Bauch einen elektrischen Rasierer verwenden. Dann legen Sie die Ratte auf einer Montageplatte in Rückenlage.</li>
	<li>Bedecken Sie die Haut mit dem beschichteten Gel, und platzieren Sie den Schallkopf auf der Intercostalneuralgie Raum und subcostal Fläche um die pleural Flüssigkeit zu erkennen. Hinweis: Um den Erguss genau zu erfassen, wurden links und rechts seitlichen Positionen ausgewählt, um eine Ultraschall-Untersuchung durchführen.</li>
	<li>Setzen Sie die Ratte auf eine Kunststoffplatte in Rückenlage nach Ultraschalluntersuchung und lassen Sie die Ratten langsam in 10 min zu erholen.</li>
</ol>3. Brust CT Scan für Pleuraerguss
<ol><li>Betäuben Sie auf 7 und 14 Tage Post-Verwaltung die Ratten mit 10 % Chloral Hydrate (IP). Halten Sie es ausreichend Tiefe der Narkose, wenn die Ratte nicht reagiert, Reflexe pedal. Hinweis: 7. Tag Post-Verwaltung ist die am besten geeignete Zeit, Pleuraerguss durch CT Scan zu beobachten.</li>
	<li>Legen Sie die Ratte auf einer Plastikfolie in Bauchlage und Scannen Sie ihre Brust untersuchen Pleuraerguss mit einem 64-Kanal-CT-Use folgenden Einstellungen: 64 x 0,625 mm Detektor Konfiguration, 120 kV (Peak) und 350 mAs.</li>
</ol>4. Erhebung von Pleuraerguss und Isolation von Nanopartikeln in der Pleuraerguss
<ol><li>Nach Brust CT Scan von Ratten und unter Narkose von Chloral, Hydrat, überprüfen Sie das Pedale Reflex der Ratten, rasieren die Haare vom Bauch, Brust und desinfizieren Sie die Haut durch Jod.</li>
	<li>Bringen Sie die Ratten in den OP-Bereich.</li>
	<li>Geschnitten Sie unter Narkose schnell 1-1,5 cm von der Haut und Bauchmuskulatur, Xiphoid entlang der Mittellinie mit intakter Membran.</li>
	<li>Vorsichtig öffne die Truhe und bilateralen Pleura Hohlräume mit Hilfe der Pinzette, vor allem die bilateralen kostalen Phrenicus Winkel zu inspizieren. Sammeln Sie 1-2 mL der hellgelben Pleuraerguss mit einer sterilen Spritze 2 mL.</li>
	<li>Ist das erledigt, Opfern Sie die Ratten mit IACUC genehmigte Protokoll.</li>
	<li>Zentrifugieren der Pleuraerguss in ein 2 mL Tube für 15 min bei 300 X g um die Nanopartikel zu isolieren.</li>
	<li>Verwenden Sie einen Tropfen der oberen Schicht der hellen Flüssigkeit ist und unter einer Übertragung Elektronen microscope(TEM,) bei einer Beschleunigungsspannung von 60-80 kV beobachten.</li>
</ol>

<ol><li>Stathopoulos, G. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+factor-kappaB+affects+tumor+progression+in+a+mouse+model+of+malignant+pleural+effusion%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Nuclear factor-kappaB affects tumor progression in a mouse model of malignant pleural effusion.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 34 (2), 142-150 (2006).</li>
<li>Shen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dosage-toxicity-efficacy+relationship+of+kansui+and+licorice+in+malignant+pleural+effusion+rats+based+on+factor+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">The dosage-toxicity-efficacy relationship of kansui and licorice in malignant pleural effusion rats based on factor analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 186, 251-256 (2016).</li>
<li>Nel, A., Xia, T., Mädler, L., Li, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxic+potential+of+materials+at+the+nanolevel%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Toxic potential of materials at the nanolevel.</a> Science. 311 (5761), 622-627 (2006).</li>
<li>Maynard, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safe+handling+of+nanotechnology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Safe handling of nanotechnology.</a> Nature. 444 (7117), 267-269 (2006).</li>
<li>Duan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxic+effects+of+silica+nanoparticles+on+zebrafish+embryos+and+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Toxic effects of silica nanoparticles on zebrafish embryos and larvae.</a> PLoS One. 8 (9), 74606(2013).</li>
<li>Skuland, T., Ovrevik, J., Låg, M., Schwarze, P., Refsnes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silica+nanoparticles+induce+cytokine+responses+in+lung+epithelial+cells+through+activation+of+a+p38%2FTACE%2FTGF-%CE%B1%2FEGFR-pathway+and+NF-%CE%BA%CE%92+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+and+Applied+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Silica nanoparticles induce cytokine responses in lung epithelial cells through activation of a p38/TACE/TGF-α/EGFR-pathway and NF-κΒ signaling.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. 279 (1), 76-86 (2014).</li>
<li>Oberdörster, G., Oberdörster, E., Oberdörster, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanotoxicology%3A+an+emerging+discipline+evolving+from+studies+of+ultrafine+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Health+Perspectives%22%5BJournal%5D)">Nanotoxicology: an emerging discipline evolving from studies of ultrafine particles.</a> Environmental Health Perspectives. 113 (7), 823-839 (2005).</li>
<li>Song, Y., Li, X., Du, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+nanoparticles+is+related+to+pleural+effusion%2C+pulmonary+fibrosis+and+granuloma%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Exposure to nanoparticles is related to pleural effusion, pulmonary fibrosis and granuloma.</a> European Respiratory Journal. 34 (3), 559-567 (2009).</li>
<li>Song, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanomaterials+in+humans%3A+identification%2C+characteristics%2C+and+potential+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">Nanomaterials in humans: identification, characteristics, and potential damage.</a> Toxicologic Pathology. 39 (5), 841-849 (2011).</li>
<li>Zhu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyacrylate%2Fnanosilica+causes+pleural+and+pericardial+effusion%2C+and+pulmonary+fibrosis+and+granuloma+in+rats+similar+to+those+observed+in+exposed+workers%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Polyacrylate/nanosilica causes pleural and pericardial effusion, and pulmonary fibrosis and granuloma in rats similar to those observed in exposed workers.</a> International Journal of Nanomedicine. 11, 1593-1605 (2016).</li>
<li>Havelock, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pleural+procedures+and+thoracic+ultrasound%3A+British+Thoracic+Society+Pleural+Disease+Guideline+2010%5BTitle%5D)+AND+%22Thorax%22%5BJournal%5D)">Pleural procedures and thoracic ultrasound: British Thoracic Society Pleural Disease Guideline 2010.</a> Thorax. 65, Suppl 2 61-76 (2010).</li>
<li>Jha, A., Ullah, E., Gupta, P., Gupta, G., Saud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sonography+of+multifocal+hydatidosis+involving+lung+and+liver+in+a+female+child%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Sonography of multifocal hydatidosis involving lung and liver in a female child.</a> Journal of Medical Ultrasound. 40 (4), 471-474 (2013).</li>
<li>Hikaru, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+analysis+of+70-nm+silica+particles-induced+chronic+toxicity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Histological analysis of 70-nm silica particles-induced chronic toxicity in rats.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 72, 626-629 (2009).</li>
<li>Sun, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxicity+and+mitochondrial+damage+caused+by+silica+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+in+Vitro%22%5BJournal%5D)">Cytotoxicity and mitochondrial damage caused by silica nanoparticles.</a> Toxicology in Vitro. 25, 1619-1629 (2011).</li>
<li>Hikaru, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silica+nanoparticles+as+hepatotoxicants%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Silica nanoparticles as hepatotoxicants.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 72, 496-501 (2009).</li>
<li>Liu, T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+and+repeated+dose+toxicity+of+mesoporous+hollow+silica+nanoparticles+in+intravenously+exposed+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Single and repeated dose toxicity of mesoporous hollow silica nanoparticles in intravenously exposed mice.</a> Biomaterials. 32, 1657-1668 (2011).</li>
<li>Ding, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diseases+caused+by+silica%3A+Mechanisms+of+injury+and+disease+development%5BTitle%5D)+AND+%22International+Immunopharmacology%22%5BJournal%5D)">Diseases caused by silica: Mechanisms of injury and disease development.</a> International Immunopharmacology. 2, 173-182 (2002).</li>
<li>Shen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dosage-toxicity-efficacy+relationship+of+kansui+and+licorice+in+malignant+pleural+effusion+rats+based+on+factor+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">The dosage-toxicity-efficacy relationship of kansui and licorice in malignant pleural effusion rats based on factor analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 186, 251-256 (2016).</li>
<li>Ji, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twenty-eight-day+inhalation+toxicity+study+of+silver+nanoparticles+in+Sprague-Dawley+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Inhalation+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Twenty-eight-day inhalation toxicity study of silver nanoparticles in Sprague-Dawley rats.</a> Inhalation Toxicology. 19 (10), 857-871 (2007).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Sonographie ist die bequemste Werkzeug für die Bestimmung von Lungenerkrankungen, wegen seiner ausgezeichneten Empfindlichkeit auf die freie Flüssigkeit in der Pleurahöhle11. Und zwar deshalb, weil Sonographie den Kontrast der akustischen Impedanz von Luft und Flüssigkeit in der Lunge12sofort erkennen kann. Außerdem ist die Sonographie flexibler in ein kleines Tier Modell als CT. Trotzdem die Luft in der Lunge die Schallwelle reflektiert und aus der Beobachtung der Intrapul...

Pleuraerguss ist eine sehr häufige klinische Manifestation von Lungenerkrankungen mit einer Vielzahl von Ursachen. Ein nützliches Tier Pleuraerguss-Modell ist sehr wichtig, diese Lungenerkrankungen, die Rollen der zwei pleural Membran Schichten, die Mechanismen der Pleuraerguss und deren Behandlung zu studieren. Einige berichteten jedoch, dass Pleuraerguss Modelle konzentrieren sich hauptsächlich auf die malignen Pleuraerguss oder biologische Faktoren als die Nanopartikel in der Umwelt-1,-2. Hier stellen wir ein neues Modell der Pleuraerguss, die einfach, sicher und wirksam ist.
Mit der Entwicklung der Nanotechnologie und die weitgehende Verwendung von Nanoprodukten gibt es eine Besorgnis über die möglichen Gefahren der Nanomaterialien auf die Umwelt und die menschliche Gesundheit3,4. Nanomaterialien Risikofaktoren führen und möglicherweise zu neuartigen Gefährdungen am Arbeitsplatz oder durch Kontamination der Umwelt führen. In vitro und in vivo Studien zeigen, dass Nanomaterialien in Multi-Organ-Schäden an der Lunge, das Herz, die Leber, der Niere und das Nervensystem sowie die Fortpflanzungs- und Immunsystems5,6führen können. Darüber hinaus berichteten einige Studien, dass die spezifische Toxizität von Nanomaterialien aufgrund ihrer physikalisch-chemischen Eigenschaften3,4,7.
Wir haben berichtet, dass eine Gruppe von Arbeitern mit Exposition gegenüber Nanomaterialien klinisch mit Pleura und Herzbeutel Erguss, Lungenfibrose und Granulom8,9dargestellt. Silica-Nanopartikel wurden in diesen Patienten Pleuraerguss9lokalisiert. Um zu reproduzieren und überprüfen der Pleuraerguss induziert durch die eingeatmete Nanopartikel in der Human-, haben wir das Experiment durch Einträufeln Polyacrylat/Nanosilica (PA/NPSi) über die Atemwege in Ratten, die menschliche Atmung in einem echten nachgeahmt Umwelt, und fand, dass intratracheale Instillation von PA/Koalitionsregierungen Pleuraerguss bei Ratten führen könnte. Hier stellen wir, wie in Ratten durch intratracheale Instillation von PA/Koalitionsregierungen zu Pleuraerguss und Nanopartikel in der Pleuraerguss zu isolieren. Dieses Modell kann nützlich für das weitere Studium der Nanotoxikologie und Pleuraerguss Krankheiten sein.

<table><tbody><tr><td>Acuson S2000 Farbdoppler-Ultraschallgerät</td><td>Siemens Medical Solutions, Mountain View, CA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; Polyacrylat/Nanosilica</td><td>Fudan University, Shanghai, China</td><td></td><td>hergestellt im Auftrag mit Nanosilica (20&plusmn; 5) nm</td></tr><tr><td>10% Chloralhydrat</td><td>Beijing Chemical Works</td><td>302-17-0</td><td></td></tr><tr><td>Lichtgeschwindigkeit 16 Spiral-Computertomographie</td><td>GE Healthcare, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spezifisches pathogenfreies Wistar</td><td>Animal Center von Lianhelihua (Peking, China)</td><td></td><td>Wistar Ratten</td></tr></tbody></table>

ein pleuraerguss modell bei ratten durch intratracheale instillation von polyacrylat/nanosilica

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

Pleuraerguss ist eine vorherrschende klinische Befund von vielen Lungenerkrankungen. Ein nützliches Tier Pleuraerguss-Modell ist sehr wichtig, diese Lungenerkrankungen zu studieren. Pleuraerguss Vorgängermodellen Aufmerksamkeit mehr auf biologische Faktoren eher als Nanopartikel in der Umwelt. Hier stellen wir ein Modell um Pleuraerguss bei Ratten durch intratracheale Instillation von Polyacrylat/Nanosilica und eine Methode der Nanopartikel Isolation in der Pleuraerguss zu machen. Durch intratracheale Instillation von Polyacrylat/Nanosilica mit Konzentrationen von 3.125, 6,25 und 12,5 mg/Kg∙mL Pleuraerguss bei Ratten präsentiert am 3. Tag, erreichte bei 7-10 Tage in 6,25 und 12,5 mg/Kg∙mL-Gruppen, dann langsam abgenommen und am 14. Tag verschwunden. Wenn die Konzentration von Polyacrylat/Nanosilica erhöht, ist der Pleuraerguss produziert mehr und schneller. Diese pleural Flüssigkeit wurde durch Ultraschall oder CT Brust scannen und bestätigt durch Sezieren von Ratten gefunden. Silica-Nanopartikel wurden in die Ratten Pleuraerguss von Transmissions-Elektronenmikroskop beobachtet. Diese Ergebnisse zeigten, dass die Exposition gegenüber Polyacrylat/Nanosilica führt zur Induktion von Pleuraerguss, die in Übereinstimmung mit unseren früheren Bericht beim Menschen war. Darüber hinaus ist dieses Modell für die weitere Erforschung der Nanotoxikologie und Pleuraerguss Krankheiten vorteilhaft.

Mittels einer thorakalen Ultraschall, fanden wir keine pleural Ergüsse an Tag 1 in allen Gruppen. Am 3. Tag erschien der Pleuraerguss die 6,25 und 12,5 mg/Kg∙mL-Gruppen. Der Erguss war vor allem in der rechts kostalen Phrenicus Winkel, während der Herzbeutel Erguss nur in 12,5 mg/Kg∙mL-Gruppe präsentiert. Darüber hinaus wurden am 7. Tag, Pleuraerguss (Video 1) und Herzbeutel Erguss (Video 2) 6,25 mg/Kg∙mL-Gruppe (Abbildung 1)...

Hier präsentieren wir ein Protokoll, um einen Pleuraerguss bei Ratten durch intratracheale Instillation von Polyacrylat/Nanosilica konstruieren.

Ein Pleuraerguss Modell bei Ratten durch intratracheale Instillation von Polyacrylat/Nanosilica

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Diese Methode kann Einen Einblick in die Toxizität von Nanomaterialien geben und kann für die Untersuchung der Lungentoxizität angewendet werden. Diese Technik wurde abgeleitet, um die Auswirkungen von Polyacrylat/Nanosilica-induziertem Pleuraerguss zu untersuchen. Vor Beginn der Instillation eine frische, 10-Milliliter-Polyacrylat/Nanosilica-Suspension in normaler Saline für 20 bis 30 Minuten beschallen, gefolgt von 10 Minuten Wirbelung, bevor die Suspension auf 3,125, 6,25 und 12,5 Milligramm pro Milliliter-Konzentration verdünnt wird.Als nächstes bestätigen Sie einen Mangel an Reaktion auf Zehenstich in einer anästhesierten Ratte, und fixieren Sie die Vorderzähne des Tieres auf dem Brett mit einem Stück Nylonschnur. Mit Zangen und einer Frontal-Tätung, sanft öffnen Sie den Mund, um die Spalte der Glottis zu visualisieren, und legen Sie ein feines Rohr in den bilateralen Bronchus. Dann 0,5 Milliliter der Polyacrylat/Nanosilica-Partikel durch das Röhrchen in die Lunge einflößen und die Ratte mit Überwachung bis zur vollständigen Genesung in die Supine-Position bringen.Verwenden Sie an den Tagen eins, drei, sieben und 14 nach der Instillation einen elektrischen Rasierer, um das Haar von der Brust und dem Oberbauch jeder anästhesierten Ratte zu entfernen, und legen Sie die Ratte auf die Montageplatte eines Ultraschallsystems mit einem linearen Array-Wandler in der Rückenposition. Tragen Sie Ultraschallgel auf die exponierte Haut auf und legen Sie den Messumformer auf den interkostalen Raum und subcostalen Bereich, um die Pleuraflüssigkeit zu erkennen. Um den Erguss genau zu erkennen, wählen Sie die linke und rechte Seitlichposition aus, um eine Ultraschalluntersuchung durchzuführen.Am siebten Tag werden sowohl Pleuraerguss als auch Perikarpererguss in der infizierten Gruppe von 6,25 Milligramm pro Kilogramm pro Milliliter nachgewiesen. Am siebten und 14. Tag sind CT-Brustscans der 12,5 Milligramm pro Kilogramm pro Milliliter eingeflößten Tiere im stumpfen hinteren Costophrenischen Winkel ungewöhnlich, was auf eine geringe Menge Anreicherungsguss hindeutet. Die Transmissionselektronenmikroskopie von Pleuraergussproben zeigt Nanosilica-Nanopartikel einzeln und in Clustern mit einer Morphologie, die mit der für Nanopartikel innerhalb der vorbereiteten Suspension beobachteten entspricht.Das Wichtigste ist, daran zu denken, die Spalte der Glottis zu visualisieren und ein feines Rohr in den bilateralen Bronchus einzufügen. Die Nanopartikel können auch durch Inhalation oder intravenöse Injektion eingeflößt werden, da beide Methoden in früheren Studien durchgeführt wurden. Diese Technik ist nützlich für die Untersuchung der Entwicklung von Pleuraerguss.

a-pleural-effusion-model-rats-intratracheal-instillation

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Forschung

JoVE Journal

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Medizin

Intratracheale Instillationen liefern Solute direkt in die Lunge. Dieses Verfahren zielt auf die Lieferung der instillate in den distalen Regionen der Lunge, und wird daher oft in Studien am Studium Alveolen gerichtet eingebaut. Wir bieten Ihnen eine detaillierte Überleben Protokoll für die Durchführung intratracheale Instillationen in Mäusen.

Direkte Instillation von gelösten Stoffen in Mauslunge

Dieses Video zeigt die Etablierung einer Lungeninfektion in einem immunkompetenten Nagetiermodell durch Intubation und Installation von bakteriellen Suspensionen in Lungenlappen. Dieses Modell ermöglicht antibakterielle Wirksamkeitsstudien an immunkompetenten Tieren.

Intrabronchiale Instillation von Streptococcus pneumoniae in immunkompetenten Nagetiermodellen

Die selektive inbronchiale Säureinstillation in die linke Lunge bei Mäusen führt zu einseitigen und selbstbegrenzten akuten Lungenverletzungen, die das durch Magensäureaspiration induzierte humane akute Atemnotsyndrom (ARDS) modelliert.

Ein Modell der selbstbegrenzten akuten Lungenverletzung durch einseitige Intra-Bronchialsäure-Instillation

Beschrieben wird die Zellkultur und Expositionsmethode eines In-vitro-Bronchialmodells für eine realistische, wiederholte Inhalationsexposition gegenüber Partikeln für Toxizitätstests.

Ein Luft-Flüssig-Interface-Bronchial-Epithelmodell für realistische, wiederholte Inhalationsexposition gegenüber Luftpartikeln für Toxizitätstests

Diese Technik, Medikamente direkt in die Luftröhre von neonatalen Nagetieren einzuträufeln, ist wichtig, um die Auswirkungen von lokal verabreichten Medikamenten oder Biologika auf neonatale Lungenerkrankungen zu untersuchen. Darüber hinaus kann diese Methode auch zur Induktion von Lungenverletzungen in Tiermodellen eingesetzt werden.

Eine minimal-invasive Methode zur intratrachealen Instillation von Medikamenten bei neonatalen Nagetieren zur Behandlung von Lungenerkrankungen

Verschiedene Tiermodelle der Lungenfibrose wurden unter Verwendung von Bleomycin etabliert, um die Pathogenese der Lungenfibrose zu klären und neue Angriffspunkte für Medikamente zu finden. Die meisten Lungenfibrosemodelle, die auf Lungengewebe abzielen, weisen jedoch eine ungleichmäßige Medikamentenverabreichung auf. Hier schlagen wir ein Modell der uniformen Lungenfibrose vor, die durch nasale Bleomycin-Vernebelung induziert wird.

Ein Mausmodell der Lungenfibrose, die durch nasale Bleomycin-Vernebelung induziert wird

Diese Studie beschreibt eine Technik zur Etablierung eines Silikose-Rattenmodells mit der Inhalation von Kieselsäure durch den ganzen Körper in einer Inhalationskammer. Die Ratten mit Silikose konnten den pathologischen Prozess der menschlichen Silikose auf einfache, kostengünstige Weise mit guter Wiederholbarkeit genau nachahmen.

Etablierung eines Silikose-Rattenmodells durch Exposition des Ganzkörpers mit lungengängigem Siliziumdioxid

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur Etablierung eines Mausmodells der Silikose durch wiederholte Exposition gegenüber Kieselsäuresuspensionen über einen Nasentropf. Dieses Modell kann den pathologischen Prozess der menschlichen Silikose effizient, bequem und flexibel mit hoher Wiederholbarkeit und Wirtschaftlichkeit nachahmen.

Ein Silikose-Mausmodell, das durch wiederholtes Einatmen von kristallinem Quarzstaub hergestellt wurde

Dieses Protokoll demonstriert die oropharyngeale Aspirationstechnik für den Einsatz im Bleomycin-Mausmodell der Lungenfibrose.

Oropharyngeale Verabreichung von Bleomycin im Mausmodell der Lungenfibrose

Hier präsentieren wir ein Protokoll zur Modellierung der Lungenfibrose bei Mäusen mittels aerosolisiertem Bleomycin, das über die Luftröhre verabreicht wird. Diese optimierte Methode ermöglicht eine einheitliche, quantitative und präzise Verabreichung ohne chirurgischen Schnitt und erhöht so die Reproduzierbarkeit und Zuverlässigkeit der durch Bleomycin induzierten Fibrose.

Eine verfeinerte, aerosolbasierte intratracheale Bleomycin-Verabreichungsmethode für reproduzierbare und minimalinvasive Mausmodelle der Lungenfibrose

Erfahren Sie die intratracheale Instillation von Polyacrylat/Nanosilica zur Erzeugung eines Pleuraerguss-Modells bei Ratten. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung der pulmonalen Toxizität von Nanomaterialien.

Ein Pleuraerguss Modell bei Ratten durch intratracheale Instillation von Polyacrylat/Nanosilica

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