Name: Entwicklung und angiographischen Umgang mit dem Kaninchen VX2 Modell für Leberkrebs (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 3 s
Description: Lernen Sie die Entwicklung und den angiographischen Umgang mit dem VX2-Karzinom-Modell beim Kaninchen für Leberkrebsforschung. Diese Methode ermöglicht zuverlässige Tumorinduktion durch orthotope Allotransplantation.

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Wir möchten das tierärztliche Personal an der University of Illinois - Chicago biologische Ressourcen Labor bestätigen.

Das folgende Protokoll folgt alle Anforderungen und Richtlinien, die den Auftrag von der University of Illinois - Chicago. Es wurde überprüft und genehmigt von den örtlichen institutionelle Animal Care und Use Committee vor der Ausführung.
(1) VX2 Hind Gliedmaßen Tumorentwicklung
<ol><li>VX2 Tumor-Zell-Linie aus der National Cancer Institut Division der Behandlung Krebsdiagnose und Behandlung Tumorzelle/Linie Repository zu beschaffen. Hinweis: Zu diesem Zeitpunkt die Bestellung Katalog finden Sie unter folgendem Link: https://dtp.cancer.gov/repositories/.</li>
	<li>Um die Zellsuspension Injektion vorzubereiten, legen Sie das gefrorene VX2 Probe und Methylcellulose Medium in lauwarmem Wasser bis sie aufgetaut haben.<ol>
<li>Aspirieren Sie 0.5\u20121 mL die aufgetauten Zellsuspension und ein gleiches Volumen der aufgetauten Methylcellulose Medium in eine 5 mL Spritze. Hinweis: Es kann helfen, ein 21 oder 22 G Nadel aspirieren Sie die Zellsuspension und eine größere Gauge-Nadel aspirieren Sie die Methylcellulose-Medium verwenden. Legen Sie die Spritzen auf Eis.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Vorbereiten des hinteren Gliedmaßen Tumor Spenders Kaninchen Inokulation der Zellsuspension, beginnend mit Sedierung mit 1 mg/kg Acepromazine und 0,02 mg/kg Buprenorphin intramuskulär gegeben. Rasieren Sie die Impfung Website (Hind Gliedmaßen) mit Klipper und sauber, die mit einem Alkohol oder Jod-basierten Agenten die rasiert sind. Hinweis: Meloxicam kann bei einer Dosis von 0,2 mg/kg subkutan für Analgesie gegeben werden. Kaninchenfell ist schwierig zu rasieren. Es wird empfohlen, dass die Forscher mehrere Durchgänge, führen Sie zunächst mit Schwerpunkt auf clearing ein Großteil des Fells die Clippers gegen die Haut drücken und gegen den Strich gehen.</li>
	<li>Die 5-mL-Spritze mit der Zellsuspension beimessen Sie eine 16 G-Nadel und Spritzen Sie 1 mL der Suspension in den Bauch der hinteren Gliedmaßen Muskulatur das Spender-Kaninchen, etwa 1 cm tief. Achten Sie darauf, den Ischiasnerv läuft in eine tastbare Nut entlang der Oberschenkel zu schützen. Hinweis: Frische VX2 inoculates 88 % der Patienten erfolgreich, während eingefroren und aufgetaut VX2 nur erfolgreiche 33 % der Zeit19. Achtung: Der VX2 Tumor wächst schnell. Nebenwirkungen, die beachtet werden können, da im Laufe des Tumors sind: erhöhte Atemfrequenz, Lethargie, verminderte Aufmerksamkeit und/oder Verhaltensänderungen (z.B., ungewöhnliche Aggressivität). Infolgedessen sind Empfehlungen, die Tiere genau zu überwachen und für Tumor Ernte innerhalb von zwei Wochen nach der Inokulation zu planen.</li>
</ol>(2) VX2 Hind Gliedmaßen Tumorwachstum und Ernte
Hinweis: Angenommen, erfolgreiche Impfung, es soll eine spürbar (3\u20124 cm) Tumor Knötchen an der Einstichstelle innerhalb von 2 Wochen. In der Regel wird diese Knötchen spürbar etwa 1 Woche sein; Es ist jedoch besser, wenn den Tumor wachsen, um ausreichend Gewebe Sammlung zu ermöglichen. In der Regel werden diese Knötchen fest, indurierte und erhaben über das Niveau des Muskels. If
<ol><li>Ertasten der inokulierten Bereich in 2 Wochen nach Impfung. Wenn kein Tumorwachstum in 2 Wochen erkannt wird, führen Sie Schritt 1 erneut. Siehe Abbildung 1. Hinweis: Das Vorhandensein des Tumors kann auch per Ultraschall beurteilt werden. Zwar gibt es keine Studien zur Bewertung des Unterschied im Tumor Wachstum Metriken aus gefrorenen bestand im Vergleich zu frischer Vorrat weitergegeben noch, es ist unsere Erfahrung, die der gefrorenen Lager Tumor etwas langsamer wächst gewesen und werden nach ihrer frischer Vorrat nachweisbar Gegenstück. Unabhängig davon, sollte entweder-Methode einen erntereifen Tumor von 2 Wochen liefern.</li>
	<li>Vorbereiten des hinteren Gliedmaßen Tumor Spenders für Tumor-Ernte. Die Kaninchen mit 45 mg/kg Ketamin und 5 mg/kg Xylazin zu betäuben. Mit eine intravenöse (IV) Dosis von mehr als 390 mg/kg Natrium-Pentobarbital einschläfern.</li>
	<li>Sobald die Kaninchen eingeschläfert worden, beginnen Sie Ernte des Tumors durch das Entfernen der kutanen und subkutanen Gewebes über dem Tumor Knötchen mit einem Skalpell mit welcher Größe Klinge der Forscher für richtig hält. Siehe Abbildung 2.</li>
	<li>Nachdem der Tumor-Knoten innerhalb der hinteren Gliedmaßen Muskel identifiziert wurde, der Tumor en bloc mit weit geschwungenen Ränder entfernen. Hierzu schneiden die sehnige Befestigungspunkte an den proximalen und distalen Enden der den Muskel und dann Spur der Skalpellklinge entlang den darunter liegenden Knochen. Halbieren der explantierten Probe Tumor Kapsel und nekrotischen Kern aufzudecken. Siehe Abbildung 3. Hinweis: Die VX2 Tumor hat einen höchst nekrotischen Kern. Achten Sie darauf, richtige Augenschutz und sonstige persönliche Schutzausrüstung verwenden, wenn den Tumor zu ernten, da Schäden an den Tumor Kapsel Hochdruck Auswurf des nekrotischen Ablagerungen führen kann.</li>
	<li>Reiben Sie sanft die nekrotischen Kern mit einem stumpfen Gegenstand (z. B. Pinzetten, Hämostatika), um den Tumor zu reinigen. Dies sollte zur besseren Visualisierung der Tumor Kapsel und den Übergangspunkt zwischen Kapsel und umliegenden Muskel ermöglichen. Siehe Abbildung 4.</li>
	<li>Aus diesem Beispiel Ernte mehrere Stücke des Tumors ca. 1\u20122 mm3 und sofort in eine Tasse mit Raumtemperatur sterile Kochsalzlösung aufbewahren. Hinweis: Diese Tumorproben werden für die nachfolgenden intrahepatischen Implantation verwendet werden.</li>
	<li>Legen Sie die verbleibenden Tumor in eine sterile Petrischale und Baden sie mit Dulbeccos geändert Eagle Medium (DMEM). Wenn dieses Exemplar auf Eis kalt gehalten wird, kann es für den Umgang mit bis zu 2\u20123 h später beibehalten werden.</li>
</ol>(3) Lebertumor Implantation über Laparotomie
<ol><li>Bereiten Sie die Empfänger Kaninchen für Laparotomie. Der Empfänger Kaninchen mit 45 mg/kg Ketamin und 5 mg/kg Xylazin zu betäuben für Induktion gefolgt von Intubation und Wartung mit 1 % - 3 % Isofluran als benötigt. Wenn die Kaninchen betäubt ist, Rasieren der Operationsstelle mit Haarschneidemaschinen. Reinigen Sie die Schnitt-Bereich mit dreifacher waschen mit Betadine Scrub, 70 % Ethanol Lösung und Betadine Lösung und Drapieren Sie das Abdomen in einem sterilen chirurgischen Mode.</li>
	<li>Mit einem #15-Klinge, die Laparotomie initiieren Sie, indem ein kleiner nach unten vertikale Mittellinie Schnitt durch das Kaninchen Haut ab dem Xiphoid Prozeß zu machen. Dies sollte leicht palpiert und neigt dazu, etwa die Größe von einem amerikanischen Penny. Siehe Abbildung 5.</li>
	<li>Die Haut zu reflektieren und identifizieren die Linea Alba. Dies sollte eine reflektierende weiße Band des Gewebes in der Mittellinie inferior unterwegs sein. Verwenden Sie stumpfe Dissektion, durchqueren die Linea Alba und setzen das Bauchfell. Siehe Abbildung 6. Hinweis: Das Peritoneum ist leicht zu erkennen da es direkt im Darm überlagert wird die Bewegung mit der Atmung zu sehen ist. Achtung: Das Peritoneum tendenziell an den zugrunde liegenden Darm aufgrund der Oberflächenspannung. Mit stumpfem Trauma um zu sezieren die Linea Alba hilft, das Risiko einer Perforation des zugrunde liegende Darms zu zerstreuen.</li>
	<li>Sobald das Peritoneum ausgesetzt ist, sorgfältig durch die Bauchhöhle treten zu sezieren. Die Leber kann jetzt identifiziert werden. Um den Bauchraum besser navigieren zu können, erweitern Sie die Mittellinie Schnitt 1\u20122 cm inferior durch die Haut, Muskel und Bauchfell. Hinweis: Verlängerung des Mittellinie Schnittes kann einfach und sicher erfolgen durch sorgfältig einsetzen eine gebogene Gefäßklemme in den peritonealen Raum mit der gebogenen Spitze zugewandten oberflächlich das Bauchfell. Dann öffnen Sie die Gefäßklemme etwas und verwenden Sie einer Klinge zu niedlich das Gewebe zwischen den beiden Armen der Gefäßklemme.</li>
	<li>Den linken Lappen der Leber zu identifizieren, um eine Site für die Tumor-Implantation auswählen. Der linke Lappen ist Infero-Lateral an der medialen Lappen, die in der Mittellinie sitzt.</li>
	<li>Legen Sie bevor Sie versuchen, die Leber aus dem peritonealen Raum ziehen ein trockenes Stück Gaze an der minderwertigen Aspekt des Schnittes. Hinweis: Die Gaze erhalten eine anhaftende Oberfläche die Leber auf zu legen, um zu verhindern, zurück in die Bauchhöhle zurückziehen.</li>
	<li>Mit atraumatische Pinzette oder einem Stück nasse Gaze über die Finger, sorgfältig zeichnen Sie den linken Leberlappen aus dem Bauch durch die Inzision und legen Sie es auf die trockene Gaze früher gelegt. Siehe Abbildung 7. Achtung: Die Leber Kapsel ist empfindlich und kann leicht Bruch. Es ist entscheidend, sanft im Umgang mit dieser Orgel um Kapsel bluten, Leber Blutergüsse und/oder eventuelle Hemoperitoneum zu verhindern. Hinweis: In der Regel wird die Leber selbst visuell erklären, beim Eintritt in des peritonealen Raumes; jedoch wenn das Kaninchen Magen aufgebläht ist, kann die Leber cranially aus Anblick heraus geschoben werden. Wenn dies der Fall ist, heben Sie vorsichtig die Bauchdecke mit einer stumpfen Sonde. In diesem Szenario die Leber tendenziell die Leber mit einer stumpfen Sonde an der ventralen Aspekt des Zwerchfells aufgrund der Oberflächenspannung so sorgfältig getrennt zu halten und es sollte zu lösen. Verwenden Sie atraumatische Pinzette, um die Leber herauszuziehen.</li>
	<li>An dieser Stelle das Tumorgewebe zur Implantation vorbereitet und legen Sie ein Stück nasse Gaze über die Leber zu schützen.</li>
	<li>Wählen Sie ein 1\u20122 mm3 Stück von Tumor-Gewebe, das während Schritt 2.6 für die Implantation in die Leber generiert wurde. Siehe Abbildung 8.</li>
	<li>Stechen Sie mit einem #11-Klinge, das Lebergewebe in einem 45°-Winkel machen eine 0,5 cm Tiefe Tasche, kümmert sich nicht um den dorsalen Aspekt der Leber Kapsel zu durchdringen. Lassen Sie die Klinge nach der Punktion machen. Siehe Abbildung 9.</li>
	<li>Heben Sie vorsichtig die Klinge in einer ventralen Richtung, eine kleine Tasche in der Leber Bett zu schaffen. Nehmen Sie die Tumor-Stück mit Pinzette, legen Sie den Tumor in dieser Tasche und dann entfernen Sie die Klinge. Hinweis: Die Klinge vor dem Einfügen der Tumor Stück entfernt werden, jedoch die Leber wird bluten und das verdecken kann die Punktionsstelle, so dass es schwer zu erkennen. Achtung: Achten Sie darauf, Kontakt des Tumors mit anderen Strukturen zu verhindern unbeabsichtigtes Tumor Aussaat zu minimieren. Dies kann auch durch werkzeuglos genutzt, um mit Implantation danach beiseite vermieden werden.</li>
	<li>An dieser Stelle legen Sie ein Stück der blutstillende Mittel, wie Gel-Schaum über die Tumor-Tasche zur Förderung der Blutstillung und Auswurf des Stückes Tumor zu verhindern.</li>
	<li>Die Leber auf den Bauch zurück, sobald Blutstillung bestätigt wird.</li>
	<li>Schließen Sie die Bauchdecke mit 3-0 Polydioxanon Naht auf eine konische Nadel mit einem einfachen kontinuierlichen Nähen und schließen Sie die Haut mit 4: 0 Polyglactin 910 Nähte auf einer schneiden Nadel mit kontinuierlicher Subcuticular Stich. : Wenn die Bauchdecke schließen, Vorsicht um nicht zu beschädigen das Omentum oder andere Darm-Strukturen in einer Naht werfen. Hinweis: Dieser Tumor dauert mindestens 2 Wochen endgültig röntgenologisch erkennbar sein sollen, erreicht er eine Größe von 1.5\u20122 cm Durchmesser bei 3 Wochen des Wachstums. Achten Sie darauf, nicht zuzulassen, die hepatischen Tumor, vorbei an 3.5\u20124 Wochen wachsen, da der Tumor eine Exophytic Masse und aggressiv verbreiten vor Ort bilden wird.</li>
</ol>(4) VX2 Tumor Suspension Vorbereitung
<ol><li>Platzieren Sie ein 40 µm-Sieb in den Mund einer 50 mL konische Propylen-Röhre. Mit der Tumor aus Schritt 2.7, verwenden Sie eine #15-Klinge, kratzen die Tumor-Oberfläche, um tragfähige Tumor zu sammeln und legen Sie diese scharren in das Sieb.</li>
	<li>Tragfähige Tumor scharren durch ein Sieb mit DMEM waschen und dann das Propylen-Rohr auf 1600 u/min für 8 min zentrifugieren.</li>
	<li>Nach Abschluss die Zentrifuge wird den Überstand zu entfernen und entsorgen. Fügen Sie Methylcellulose die restlichen Zellenblock an einem Volumenverhältnis von 1:1.</li>
	<li>Injizieren Sie diese Aussetzung in ein Hind Gliedmaßen Spender Kaninchen folgende Schritte 1.3\u20121.4. Legen Sie die restlichen Aussetzung in 1 mL Aliquots in kryogenen Röhren und Einfrieren in flüssigem Stickstoff für die spätere Verwendung.</li>
</ol>(5) angiographischen Nutzung der VX2 Lebertumor
<ol><li>Bereiten Sie die Kaninchen wie unter Punkt 3.1 beschrieben.</li>
	<li>Ertasten der femoralen Nut in der Leistengegend. Wenn die Nut identifiziert wurde, machen Sie einen 2\u20123 cm linearen Schnitt entlang der Nut. Siehe Abbildung 10.</li>
	<li>Stumpfe Dissektion verwenden, suchen Sie und isolieren Sie die femorale Bündel mit der femoralen Vene, Arterie und Nerv. Siehe Abbildung 11.</li>
	<li>Wiederverwenden Sie stumpfe Dissektion zu trennen die Femoral Arterie vom Rest der Strukturen im Bundle und die Arterie auf einem Skalpell Griff zu isolieren. Siehe Abbildung 12.</li>
	<li>Nutzen Sie mit einem 3-Französisch Einführhilfe Kit die Seldingertechnik-Technik, um mit einer Nadel zuzugreifen. Legen Sie ein Führungsdraht und entfernen Sie die Nadel um die 3-Französisch-Hülle in das Gefäß zu gelangen. Siehe Abbildung 13. Achtung: Vermeiden Sie übermäßige Kraft bei der Weiterentwicklung der 3-Französisch-Mantel, da dies Durchtrennung der Femoral Arterie führen kann.</li>
	<li>Unter Röntgendurchleuchtung Anleitung und mit einem Katheter, Führungsdraht und Iopamidol Kontrastmittel, wählen Sie für die Zöliakie Stamm – befindet sich in der Regel auf die T12-Ebene — und dann den Katheter in die linke hepatische Arterie über das gemeinsame hepatische und ordnungsgemäße hepatische.</li>
	<li>An dieser Stelle das Mittel der Wahl durch den Katheter zu verwalten. Sobald der Agent verwaltet wird, entfernen Sie den Katheter.</li>
	<li>Mit 3: 0 Seide Naht, verbinden Sie die Femoral Arterie proximal und distal am Einfügepunkt des Mantels. Achten Sie darauf, den Knoten proximal zu den Mantel anziehen, wie es genommen wird, um Blutungen zu verhindern.</li>
	<li>In der Nähe des Leiste Schnittes mit 4: 0 Polyglactin 910 Nähte auf einer Schnitt-Nadel mit einem Subcuticular Stich.</li>
	<li>Pflegen Sie standard postoperative Pflege und Monitor Tier Erholung. Führen Sie Euthanasie und Autopsie nach Bedarf mit standard-Techniken.</li>
</ol>

<ol><li>Rous, P., Beard, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Progression+To+Carcinoma+of+Virus-Induced+Rabbit+Papillomas+%28Shope%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Progression To Carcinoma of Virus-Induced Rabbit Papillomas (Shope).</a> The Journal of Experimental Medicine. 62 (4), 523-548 (1935).</li>
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</ol>

Die in diesem Bericht dargestellt wurde durch ein Forschungsstipendium von Guerbet LLC unterstützt.

Der erste wichtige Schritt in der VX2 Tumor Methodik ist erfolgreiche Ausbreitung eines Tumors in der hinteren Extremität eines Spenders Hasen. Beziehen sich auf den ersten Absatz im Abschnitt "Vertreter Ergebnisse" für weitere Informationen zu diesem Schritt.
Der nächste entscheidende Schritt besteht darin, die tragfähige Tumor Kapsel richtig erkannt wird. Nicht nur wird dieser Tumor Aussetzung Vorbereitung nötig sein, aber es ist auch wichtig für die Auswahl und Erzeugung von Tumor-Stücke fü...

Das Kaninchen VX2 Tumor Modell spielte eine Rolle in der experimentellen Onkologie seit seiner Entwicklung im Jahre 19351,2. Dieser Tumor ist eine virusbedingte anaplastische Plattenepithelkarzinom gekennzeichnet durch Hypervascularity, schnelles Wachstum und einfache Vermehrung im skelettartigen Muskel3,4. Während das Kaninchen VX2-Tumor-Modell verwendet worden ist, zu untersuchen, eine Vielzahl von Krebserkrankungen5,6,7,8; der Schwerpunkt dieses Artikels ist Leberkrebs9.
Die beschriebene Methode soll präsentieren ein Modell für primären Leberkrebs oder hepatozellulären Karzinom (HCC), die von interventionellen Radiologen für die translationale Forschung genutzt werden kann. Es kann für ablative Methode testen10,11,12,13,14,15pharmakokinetischen Studien und therapeutische Untersuchungen verwendet werden.
Die Methode hier detaillierte bringt mehrere Vorteile gegenüber anderen Modellen im gleichen Rahmen wie Nager-Modelle wie Ratten, Mäuse, und Waldmurmeltiere oder größere Modelle wie Primaten16. Einer der wichtigsten Vorteile ist die schnelle und zuverlässige Tumorwachstum ermöglicht es Forschern, eine aktiven Tumor-Linie innerhalb eines Monats nach der ersten Hind Gliedmaßen Ausbreitung17zu etablieren. Darüber hinaus hat dieser Tumor einfach sonographische Sichtbarkeit und eine Hypervascular-Peripherie die Transarterial locoregionaler Behandlungen und ablative Therapien ermöglicht. Schließlich, und vor allem erlaubt die Größe des Gefäßsystems Kaninchen möglich und technisch einfache Nutzung der vaskulären Instrumentierung18.

<table><tbody><tr><td>MethoCult (Methycellulose)</td><td>Stemcell Technologies</td><td>M3134</td><td></td></tr><tr><td>VX2 Zelllinie</td><td>NCI</td><td>VX-2</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Spritze</td><td>BD</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>16 g Nadel</td><td>BD</td><td>305197</td><td></td></tr><tr><td>22 g Nadel</td><td>BD</td><td>305155</td><td></td></tr><tr><td>Haarschneider</td><td>Wahl</td><td>41870-0438</td><td></td></tr><tr><td>Schaumstoff Insulated Box</td><td>Mr. Box Online</td><td>10 x 10 x 4</td><td></td></tr><tr><td>Acepromazin</td><td>Henry Schein</td><td>003845</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphin</td><td>Par</td><td>42023-179-05</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td>Henry Schein</td><td>049755</td><td></td></tr><tr><td>Alkohol Pads</td><td>Covidien</td><td>5033</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Henry Schein</td><td>056344</td><td></td></tr><tr><td>Xylazin</td><td>Akorn</td><td>59399-110-20</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital (Fatal-Plus)</td><td>Vortech</td><td>9373</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Petrischale</td><td>Thermo Fisher</td><td>172931</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>Saline</td><td>Baxter</td><td>2F7124</td><td></td></tr><tr><td>15-Klingen</td><td>Steris</td><td>02-050-015</td><td></td></tr><tr><td>Skalpellgriff x 2</td><td>Steris</td><td>22-2381</td><td></td></tr><tr><td>Gebogenes Hämostat</td><td>WPI</td><td>501288</td><td></td></tr><tr><td>Atraumatische Pinzette</td><td>Sklar</td><td>52-5077</td><td></td></tr><tr><td>Gaze</td><td>Medline</td><td>NON21430LF</td><td></td></tr><tr><td>11-Klingen</td><td>Steris</td><td>02-050-011</td><td></td></tr><tr><td>Surgicel</td><td>Ethicon</td><td>1951</td><td></td></tr><tr><td>3-0 PDS / Kegel</td><td>Ethicon</td><td>Z305H</td><td></td></tr><tr><td>4 - 0 Vicryl /</td><td>Schneide-Ethicon</td><td>J392H</td><td></td></tr><tr><td>40 &mu; m Sieb</td><td>BD</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>konisches 50-ml-Röhrchen</td><td>Thermo Fisher</td><td>339652</td><td></td></tr><tr><td>Kunststoffpipette</td><td>Thomas Scientific</td><td>HS206371B</td><td></td></tr><tr><td>Zentrifuge</td><td>Sorvall</td><td>75004240</td><td></td></tr><tr><td>1,40 ml-Röhrchen (Innengewinde)</td><td>Micronic</td><td>MP32131-Z20</td><td></td></tr><tr><td>3-F VSI Micro-HV Einführkit</td><td>Vaskuläre Lösungen</td><td>Sonderanfertigung (P15180391)</td><td></td></tr><tr><td>.018 45 Grad Winkelgleitdraht</td><td>Terumo</td><td>RG*GA1818SA</td><td></td></tr><tr><td>Direxion Mikrokatheter in Bernform</td><td>Boston Scientific</td><td>M001195230</td><td></td></tr><tr><td>Omnipaque</td><td>GE</td><td>Y510</td><td></td></tr></tbody></table>

entwicklung und angiographischen umgang mit dem kaninchen vx2 modell für leberkrebs

Development and Angiographic Use of the Rabbit VX2 Model for Liver Cancer

Die Kaninchen VX2 Tumor ist ein Tiermodell für translationale Forschung in Bezug auf das Leberzellkarzinom (HCC) auf dem Gebiet der interventionellen Radiologie häufig genutzt. Dieses Modell setzt ein Anaplastischer Squamous Zelle Krebsgeschwür, das einfach und zuverlässig in der Skelettmuskulatur Spender Kaninchen für die spätere Ernte und Allograft Implantation in die Leber der naive Empfänger weitergegeben wird. Dieser Tumor Transplantat wächst schnell in der Leber des Empfängers Kaninchen in eine angiographisch identifizierbaren Tumor zeichnet sich durch einen nekrotischen Kern, umgeben von einer lebensfähigen Hypervascular Kapsel. Die physische Größe der Kaninchen Anatomie ist ausreichend, vaskuläre Instrumentierung, die Anwendung und Erprobung verschiedener interventionelle Techniken zu erleichtern. Trotz dieser Vorteile gibt es einen Mangel an technischen Ressourcen als ein konkreter Verweis für Forscher, die mit dem Modell arbeiten dienen. Hier präsentieren wir Ihnen eine umfassende visuelle Gliederung für die technischen Aspekte der Entwicklung, Wachstum, Ausbreitung und angiographischen Verwendung des Kaninchen VX2 Tumor Modells für Anfänger und erfahrene Forscher gleichermaßen.

Bei der Betrachtung der Abbildung 1ist es klar, dass der quadriceps des Kaninchens vergrößert wird. Darüber hinaus sind mehrere kleine diskrete Knötchen, in der Regel korrelieren mit Tumorwachstum durch die Faszie sichtbar. Bei Palpation erscheint das eingespritzte Glied als das Glied nicht injiziert. Wenn ein Forscher mehr endgültige Gewissheit, Tumor-Präsenz erforderlich ist, kann Ultraschall-Bildgebung verwendet werden, um den Tumor, eingebettet in den Mus...

Das Ziel dieses Artikels ist eine Grundierung für die Entwicklung und Nutzung des Modells VX2 Karzinom Kaninchen für Leberkrebs zu.

Entwicklung und angiographischen Umgang mit dem Kaninchen VX2 Modell für Leberkrebs

The rabbit VX2 tumor is an animal model commonly utilized for translational research regarding hepatocellular carcinoma (HCC) in the field of ...

Dieses präklinische Lebertumormodell kann helfen, wichtige Fragen zur lokalen regionalen Therapie in den Bereichen interventionelle Radiologie und interventionelle Onkologie zu beantworten. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass sie zu einer zuverlässigen Tumorinduktion durch orthotopische Allograft-Implantation führt. Für die Umsetzung des Tumors, bestätigen Sie zuerst einen Mangel an Reaktion auf Pedalreflex.Nach der Bestätigung wird das Tiersubjekt unter Anästhesie gestellt. Ein angemessenes Maß an Anästhesie wird bestätigt, und der Bauch ist steril zubereitet und drapiert. Nach der Anästhesisierung verwenden Sie eine Klinge der Zahl 15, um einen drei bis vier Zentimeter großen vertikalen Mittellinien-Hautschnitt ab dem xiphoiden Prozess zu machen.Ziehen Sie die Haut zurück, um die Linea alba zu identifizieren, ein reflektierendes weißes Gewebeband, das sich minderwertig entlang der Mittellinie bewegt. Und verwenden Sie sowohl stumpfe und scharfe Sezierung, um die Linea alba zu durchqueren, das Peritoneum freizulegen, darauf zu achten, das darunter liegende Darmgewebe nicht zu perforieren. Sezieren Sie vorsichtig durch das Bauchhöhlengewebe, um die Leber zu lokalisieren, mit einem Hämostat, um den Mittellinienschnitt ein bis zwei Zentimeter minderwertig durch die Haut, Den Muskel und Peritoneum zu verlängern, wenn nötig.Identifizieren Sie den linken Lappen, der inferolateral zum medialen Lappen ist, der in der Mittellinie sitzt. Und legen Sie ein trockenes Stück Gaze auf den unteren Aspekt des Schnittes, um zu verhindern, dass die Leber wieder in den Bauch zurückzieht. Legen Sie ein neues Stück nasse Gaze über die extrahierte Leber.Wählen Sie ein ein bis zwei Kubikmillimeter Tumorgewebestück, mit Zange. Und verwenden Sie eine Klinge der Nummer 11, um das Lebergewebe in einem 45-Grad-Winkel auf eine 0,5 Zentimeter tiefe Tasche zu durchstechen, wobei darauf geachtet wird, den dorsalen Aspekt der Leberkapsel nicht zu durchdringen. Heben Sie die Klinge vorsichtig in ventral an, um eine kleine Tasche im Leberbett zu erstellen, und legen Sie den Tumor in die Tasche.Legen Sie ein Stück hämostatisches Mittel über die Tumortasche, um die Hämostase zu fördern und das Auswerfen des Tumorstücks zu verhindern. Und, nach der Bestätigung der Hämostase, die Leber in die Bauchhöhle zurück. Dann verwenden Sie eine drei Null Polydioxanon Naht auf einer Kegelnadel, in einem einfachen kontinuierlichen Stich, um die Bauchwand zu schließen.Und vier Null Polyglactin 910 Nähte auf einer Schneidnadel in einem kontinuierlichen, subgeschnittenen Stich, um die Haut zu schließen. Um eine erfolgreiche Tumorplatzierung zu bestätigen, palepate die Oberschenkelrille in der Leistengegend und mache einen zwei bis drei Zentimeter großen linearen Schnitt entlang der Nut. Mit stumpfer Sezierung, lokalisieren und isolieren Sie das Oberschenkelbündel, das die Oberschenkelvene, arteriend und nerven enthält, und verwenden Sie stumpfe Sezieren, um die Femoralarterie vom Rest der Strukturen im Bündel zu trennen.Isolieren Sie die Arterie auf einem Skalpellgriff und verwenden Sie die Seldinger-Technik und ein drei französisches Einführungskit, um eine Nadel in das Gefäß einzuführen. Legen Sie einen Führungsdraht in die Arterie ein. Und entfernen Sie die Nadel, um die drei französischen Hüllevorsichtigen vorsichtig in das Gefäß zu bringen.Entfernen Sie den Dilator und führungsdraht aus dem Mantel, um den Gefäßzugriff zu vervollständigen. Unter fluoroskopischer Führung den Katheter in den Zöliakiestamm auf der T 12-Ebene einstecken und den Katheter über die gemeinsame Leberarterie und die richtigen Leberarterien in die linke Leberarterie vorrücken. Wenn der Katheter die linke Leberarterie erreicht, injizieren Sie Kontrastmittel, um das Vorhandensein eines hypervaskulären Tumors zu bestätigen, der dann mit einer intraarteriellen Therapie nach Wahl behandelt werden kann.Und entfernen Sie den Katheter. Mit drei Null-Seiden-Nähte, ligate die Oberschenkelarterie proximal und distal an die Einfügemarke des Mantels, wobei darauf achtet, den Knoten proximal an der Scheide zu straffen, da er zurückgezogen wird, um Blutungen zu verhindern. Dann verwenden Sie vier Null Polyglactin 910 Nähte, auf einer Schneidnadel in einem subcuticularstich Stich, um die Leistenschnitt zu schließen.Drei bis vier Wochen nach der Implantation kann der Tumor makroskopisch auf dem linken Quadrizeps des Kaninchens visualisiert werden. Die Verwendung der Angiographie und die Injektion eines Kontrastmittels, wie gezeigt, kann verwendet werden, um eine erfolgreiche Tumorausbreitung nach der Platzierung zu bestätigen. Bei Nekropsie sollte ein erfolgreich implantierter Tumor gut sichtbar sein.Seit ihrer Entwicklung hat diese Technik forschern in den Bereichen interventionelle Radiologie und interventionelle Onkologie den Weg geebnet, um die lokale Regionaltherapie von Lebertumoren in einem Kleintiermodell zu erforschen.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Cancer Research

Krebsforschung

Dieses Video zeigt die Erzeugung eines Kaninchenmodells für Endometriumkarzinom durch Injektion einer hochmetastasierten VX2-Zellsuspension in die vernähten Gebärmutterhörner des Kaninchens. Dies führt zur Entstehung eines primären Endometriumkarzinoms mit retroperitonealen Lymphknotenmetastasen.

Modellierung des metastasierten Endometriumkarzinommodells: Eine Technik zur Erzeugung von Endometriumkarzinom mit Lymphknotenmetastasen in Kaninchenmodellen

In diesem Video demonstrieren wir die chirurgische Implantation von Tumorgewebe in eine Kaninchenleber, um ein hepatozelluläres Karzinom zu induzieren. Das Verfahren trägt dazu bei, ein zuverlässiges Tiermodell zu etablieren, um das Tumorverhalten und die Entwicklung lokoregionärer Behandlungen für Leberkrebs zu untersuchen.

Generierung eines Kaninchenleberkarzinommodells: Ein chirurgisches Verfahren zur Implantation von Tumorgewebe in den linken Leberlappen zur Induktion eines hepatozellulären Karzinoms

In diesem Video demonstrieren wir eine Schritt-für-Schritt-Vorgehensweise zur Durchführung einer Leberangiographie mit einem Fluoroskop, das die Echtzeit-Visualisierung von Blutgefäßen, die mit einem Lebertumor in einem Kaninchenmodell verbunden sind, ermöglicht.

Leberangiographie: Ein Verfahren zur Visualisierung von Lebertumorgefäßen im Kaninchenmodell

Dieses Video beschreibt die Technik zur Durchführung einer Angiographie, indem ein Kontrastmittel in die absteigende Aorta injiziert wird, um die Durchblutung der Blutgefäße in einem Kaninchenmodell zu visualisieren. Diese Technik hilft, die Durchblutung der Blutgefäße bei Verstopfungen und nach der Behandlung während der Genesung zu verstehen.

Beurteilung der Gefäßperfusion mittels Angiographie: Eine Technik zur Einführung eines Kontrastmittels in die absteigende Aorta zur Visualisierung der Blutgefäßperfusion im Kaninchenmodell

Onkolytische Virotherapien befinden sich in der Entwicklung als neuartige Therapeutika zur Behandlung des hepatozellulären Karzinoms (HCC).  In dieser Arbeit wird ein Verfahren zur lokoregionären Therapie des HCC über die hepatische arterielle Verabreichung des onkolytischen Virus beschrieben.

Transarterial Verwaltung von onkolytischen Viren für lokoregionale von Orthotopische HCC bei Ratten

Dieses Protokoll stellt eine standardisierte Methode zum Wachstum von VX2-Zellen in Kultur dar und zur Erstellung eines orthotopischen VX2-Modells von Endometriumkrebs mit retroperitonealen Lymphknotenmetastasen bei Kaninchen. Orthotopische Endometriumkrebsmodelle sind wichtig für die präklinische Untersuchung neuartiger bildgebender Modalitäten für die Diagnose von Lymphknotenmetastasen.

Ein orthotopisches Endometriumkrebs-Modell mit retroperitonealer Lymphadenopathie made From In Vivo Propagated and Cultured VX2 Cells

Wir präsentieren ein Protokoll zur effizienten Bewertung der Aneurysmenperfusion und der Gefäßdurchgängigkeit von Seitenwandaneurysmen bei Ratten und Kaninchen unter Verwendung von Fluorescein-basierter Fluoreszenz-Videoangiographie (FVA). Mit einem positiven Vorhersagewert von 92,6% ist es eine einfache, aber sehr effektive und wirtschaftliche Methode ohne spezielle Ausrüstung erforderlich.

Fluoreszenz-Angiographie zur Bewertung von Aneurysmperfusion und Elternarterienpatenz in Ratten- und Kaninchen-Aneurysmus-Modellen

Portalveneninjektion von Darmkrebs (CRC) Organoiden erzeugt stromareiche Lebermetastasen. Dieses Mausmodell der CRC-Lebermetastasierung stellt ein nützliches Werkzeug dar, um Tumor-Stroma-Interaktionen zu untersuchen und neuartige Stroma-gerichtete Therapeutika wie Adeno-assoziierte virusvermittelte Gentherapien zu entwickeln.

Portalveneninjektion von Darmkrebs-Organoiden zur Untersuchung der Lebermetastasierung Stroma

In diesem Protokoll diskutieren wir die Implementierung eines Modells für eine erfolgreiche orthotope Lebertransplantation (OLT) bei Mäusen. Darüber hinaus werden auch Adjuvantien zur weiteren Analyse der Durchgängigkeit von Transplantaten nach erfolgreicher OLT in einer Maus diskutiert, insbesondere unter Verwendung von Mikrocomputertomographie (microCT)-Scans.

Erfolgreiche orthotope Lebertransplantation bei Mäusen mittels Mikrocomputertomographie-Angiographie

Dieses Protokoll stellt ein Verfahren zur bildgesteuerten Infusion in das duktale Baumsystem der Milchdrüse des Kaninchens vor. Wir demonstrieren die kontrollierte Infusion einer Röntgenkontrastmittel-haltigen ethanolbasierten ablativen Lösung in alle Zitzenöffnungen mittels Fluoroskopie-Echtzeitbildgebung.

Röntgenvisualisierung einer intraduktalen ethanolbasierten ablativen Infusion zur Prävention von Brustkrebs in Kaninchenmodellen

Lernen Sie die Entwicklung und den angiographischen Umgang mit dem VX2-Karzinom-Modell beim Kaninchen für Leberkrebsforschung. Diese Methode ermöglicht zuverlässige Tumorinduktion durch orthotope Allotransplantation.

Entwicklung und angiographischen Umgang mit dem Kaninchen VX2 Modell für Leberkrebs

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