Name: Hochfrequenz-Ultraschall für die Analyse der fetalen und plazentaren Entwicklung In Vivo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-08T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 43 s
Description: Erfahren Sie die Hochfrequenz-Ultraschallmethode zur nicht-invasiven Analyse fetaler und plazentarer Entwicklung bei Mäusen. Diese Technik ermöglicht die Überwachung des mütterlichen und fetalen Blutflusses während der gesamten Schwangerschaft.

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Vielen Dank an die Imaging Instrument Company (insbesondere für Magdalena Steiner, Katrin Suppelt und Sandra Meyer) für ihre angenehme und schnelle Unterstützung und alle unsere Fragen bezüglich der Imaging-System und dessen Nutzung unverzüglich und vollständig zu beantworten. Wir sind dankbar, Prof. Hans-Reimer Rodewald und Dr. Thorsten Feyerabend (DKFZ Heidelberg, Deutschland) für die Bereitstellung der Cpa3-Kolonie. Darüber hinaus bedanken wir uns bei Stefanie Langwisch, wer war verantwortlich für die Maus-Kolonien und generiert, die die Bilder in Abbildung 1.
Die Arbeit und das Imaging System wurden durch Zuschüsse von der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG), A.C.Z. (ZE526/6-1 und AZ526/6-2) finanziert, die Projekte eingebettet in die DFG Priorität Programm 1394 "Mastzellen in Gesundheit und Krankheit."

Alle hier beschriebene Methoden wurden durch genehmigt die "Landesverwaltungsamt Sachsen Anhalt: 42502-2-1296UniMD."
(1) experimentelle Verfahren
<ol><li>6 bis 8 Wochen alten weiblichen MC-defizienten C57BL/6J-Cpa3 PaarenCre /+ (Cpa3Cre /+) Mäuse und MC-ausreichend C57BL/6J-Cpa3+/+ (Kolonie Kontrollen; Cpa3+/+) mit BALB/c Männchen.</li>
	<li>Definieren des Schwangerschaft Tages (gd) 0 nach der Bestätigung der vaginal Plug und die Weibchen sofort nach der Operationsbestätigung Stecker zu behandeln. Hinweis: Ein Stecker ist das Sperma des Mannes in die vaginale Öffnung des Weibchens.<ol>
<li>250 µL PBS intraperitoneal Adis Cpa3+/+ zu injizieren Weibchen.</li>
		<li>Injizieren Sie 250 µL Anti-CD122 (0,25 mg) intraperitoneal in MC-defizienten Cpa3Cre /+ Weibchen. Hinweis: Eine Injektion von 0,25 mg Anti-CD122 verbraucht, periphere NKs und uNKs in MC-defizienten Cpa3Cre /+ Weibchen bereits22beschrieben.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Warten Sie, bis gd5. Hinweis: Bei gd5 ist die früheste Möglichkeit zur Implantation Analyse.<ol>
<li>Führen Sie Schritte 2 bis 5 für die Ultraschall-Analyse.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Führen Sie die Ultraschall-Bildgebung bei gd5, 8, 10, 12 und 14.</li>
</ol>2. Vorbereitung des Ultraschall-System
<ol><li>Schalten Sie das System (Abbildung 1A, Hauptschalter auf der Rückseite und Computer Standby-auf der linken Seite), die beheizte Plattform (Abbildung 1 b; auf dem Steuerkreuz), und das Gel wärmer (Abbildung 1). Hinweis: Ultraschallgel muss Aufwärmphase von ca. 0,5 h.</li>
	<li>Sicherzustellen, dass das Isofluran-Gerät ausreichend gefüllt wird (Abbildung 1).</li>
	<li>Öffnen Sie eine Neue Studie oder Neue Serie in einer vorhandenen Studie im Browser. Füllen Sie alle erforderlichen Informationen (Besitzer, Studie, Serie, Daten aus Tierversuchen) im Studium Info -Fenster. Klicken Sie auf Ok.</li>
	<li>Nach einem Klick auf Ok, damit Image Fenster B-Modus erscheint und beginnt automatisch mit der Bildgebung im B-Modus.</li>
</ol>(3) Maus-Handling
<ol><li>Anesthetization der Maus<ol>
<li>Platzieren Sie den Mauszeiger im Feld Knockdown (Abbildung 1E), schließen Sie das Öffnen Sie Isofluran Rohres der Knockdown Box und schalten Sie die Isofluran (Konzentration 3,5 %).</li>
		<li>Wenn die Maus narkotisierten, niedriger (bis 1,5 % Konzentration) und leiten die Isofluran Ablauf durch das Rohr in die Richtung der Heizung Plattform öffnen und schließen den Fluss zum Feld Niederschlag. Hinweis: Um ausreichende Anästhesie zu erreichen, warten Sie weitere 10 s nach die Maus nicht mehr bewegt.</li>
		<li>Übertragen Sie die Maus schnell aus dem Ko-Feld auf die Heizung-Plattform (Abb. 1F) in eine Rückenlage und positionieren Sie sanft seine Nase in der Anästhesie-Nase-Röhre auf der Oberseite der Plattform.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Fixierung, Enthaarung und Vorbereitung der Maus für die Messung<ol>
<li>Augenschutz Creme in jedes Auge der Maus, um zu verhindern, dass trockene Augen zu platzieren.</li>
		<li>Geben Sie einen Tropfen Elektrodengel auf jeder der vier Kupferflächen auf der beheizten Plattform (Abb. 1F).</li>
		<li>Tippen Sie auf die Pfoten mit chirurgischen Klebeband auf die Gel-beschichtete Elektrodenflächen der Heizung-Plattform.</li>
		<li>ECG zu überprüfen [optimalen Wert = 450-550 Schläge/Minute (BPM)] und Atmungsphysiologie zu allen Zeiten. Hinweis: Mithilfe einer rektale Sonde Körper Temperaturmessung ist möglich, aber nicht notwendig.</li>
		<li>Ort Enthaarungsmittel Creme auf den Bauch der Maus, Rub die Creme mit einem Wattestäbchen und warten ca. 1 min. Entfernen Sie die Creme mit Wasser getränkten Kompresse. Wiederholen Sie diesen Schritt, wenn nicht alle Haare verschwunden sind.</li>
		<li>Das vorgewärmte Ultraschallgel auf die enthaarten Haut auftragen.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. Messungen und Erwerb von Bildern und Videos
<ol><li>Die Wandler (Abbildung 1) in der Hand halten oder Klemmen Sie es in die Haltevorrichtung (Abbildung 1 H; halten, Gerät wird empfohlen).</li>
	<li>Identifizieren Sie die Blase mit der Wandler und verwenden Sie es als Bezugspunkt. Bewegen Sie den Schallkopf zu den linken und rechten Seiten des Bauches, Spur Implantationen.</li>
	<li>B-Modus für die Visualisierung von anatomischen Strukturen in 2D Graustufenbild<ol>
<li>Bewegen Sie den Schallkopf oder Heizung Plattform Tisch wo die Maus fixiert, ist bis die erste Implantation sichtbar auf dem Bildschirm in der größten Größe ist.<ol>
<li>Wählen Sie Bild-Beschriftung und geben Sie einen Namen oder Frame Store (Lagerung ohne Namen) zum Speichern von Einzelbildern oder Cine Store eine Cineloop für ganze Implantation Messungen speichern.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Bewegen Sie den Schallkopf oder Tabelle, die die Plazenta um eine Position zu bringen, wo die Durchblutung in den oberen Speicherbereich sichtbar ist. Ein einzelnes Bild oder Cineloop zu speichern (siehe Schritt 4.3.1.1) für plazentare Messungen. Hinweis: Plazentale Messungen sind möglich von gd10 ab.</li>
		<li>Fahren Sie mit allen Implantationen mit der gleichen Methode.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Color doppler-Modus zu visualisieren und bestimmen Sie die Richtung des Blutflusses<ol>
<li>Drücken Sie die Schaltfläche " Farbe ".</li>
		<li>Bewegen Sie das Farbfeld (in diesem Bereich ist das Signal sichtbar) in die gewünschte Position mit dem Trackball. Falls erforderlich, ändern Sie die Größe des Feldes durch Update drücken und bewegen Sie den Trackball (auf der rechten Seite/nach oben = größer, auf der linken Seite/unten = kleiner). Wenn die Box die richtige Größe hat, drücken Sie wählen.</li>
		<li>Einzelbilder oder Cineloops zu speichern, wie in Schritt 4.3.1.1 beschrieben.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Pulswelle (PW) doppler-Modus, Blutfluss durch die Gefäße in die Arteria Uterina (uterine Arterie, UA) zu quantifizieren und UmA<ol>
<li>Suchen Sie die Region von Interesse in der Farbe doppler Erwerb. Hinweis: Die UA liegt kaudalen in die Blase und der oberen Speicherbereich befindet sich zwischen dem Fötus und Plazenta.</li>
		<li>Presse PWund eine gestrichelte Linie erscheint. Verschieben Sie diese Zeile in das Blutgefäß von Interesse und stellen Sie den Winkel der Linie mit dem Knopf "Doppler-Winkel" im Einklang mit den Blutfluss. Drücken Sie auf Update. Hinweis: Der Winkel zwischen der Richtung des Blutflusses und der Wandler muss bei allen Tieren, konsistent sein, insbesondere bei Verwendung von mehr als 60 ° Winkel (hier 70° für UAs und 45° für UmAs verwendet wurden).</li>
		<li>Speichern Sie eine Cineloop der erscheinenden doppler Linien in der PW doppler Erfassungsfenster.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. Überprüfung und Abschluss der Datenerfassung und speichern eine Reihe
<ol><li>Um Daten zu überprüfen, drücken Sie Studienmanagement. Wählen Sie die Miniaturansicht von Interesse und doppelklicken Sie auf Update.</li>
	<li>Drücken Sie zuerst Studienmanagement dann nah im Browser-Fenster zur Datenerfassung beenden und speichern Sie eine aufgezeichneten Serien. Hinweis: Nach dem Schließen einer Reihe, ist es nicht zum Speichern von Frames oder Cineloops in dieser Serie nicht mehr möglich.</li>
</ol>6. Umgang mit Übernahme von Daten der Maus
<ol><li>Entfernen Sie das Gel vom narkotisierter Tier mit Hilfe der trockenen Kompressen.</li>
	<li>Nehmen Sie die chirurgische Klebeband vorsichtig aus der Pfoten.</li>
	<li>Schließen Sie das Isofluran-Rohr (Konzentration 0 %).</li>
	<li>Fahren Sie mit folgenden Ultraschall-Analyse bei gd5, 8, 10 und 12.<ol>
<li>Legen Sie das Tier allein in einem Käfig für ein Minimum von 5 min so es ist Zeit aufzuwachen und zu orientieren.</li>
		<li>Platzieren Sie den Mauszeiger wieder in den ursprünglichen Käfig. Hinweis: Schalten Sie nicht den Isofluran vor Entfernen der Gel und chirurgische Band, da Mäuse sehr schnell aufwachen (ca. 20 s) nach dem Ausschalten der Isofluran.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Fahren Sie mit der folgenden Ultraschall-Analyse bei gd14.<ol>
<li>Das Weibchen zu opfern, bevor es durch zervikale Dislokation aufwacht. Öffnen Sie das Tier, entfernen Sie die Gebärmutter zu, trennen Sie die Föten und der Plazenta und Messen Sie fetalen und plazentaren Gewichte zu.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. kopieren und Importieren von Daten
<ol><li>Markieren einer oder mehreren Reihen durch Klicken auf Exportieren nach und wählen Sie den Speicherplatz, Daten auf eine Festplatte zu kopieren.</li>
	<li>Öffnen Sie die Software auf einem Computer und klicken Sie auf Kopieren aus und wählen Sie die Studienreihe von der Festplatte auf eine Studienreihe in die Software importieren.</li>
	<li>Analysieren Sie die Daten mit der Software.</li>
</ol>

<ol><li>Abramowicz, J. S., Kremkau, F. W., Merz, E. <a target="_blank" href="https://www.thieme-connect.com/products/ejournals/abstract/10.1055/s-0032-1312759">Ultraschall in der Geburtshilfe: Kann der Fötus die Ultraschallwelle hören und die Hitze spüren?</a> Ultraschall in der Medizin. 33 (3), Stuttgart, Germany. 215-217 (1980).</li>
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<li>Simmons, J. A. <a target="_blank" href="https://nyaspubs.onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1111/j.1749-6632.1971.tb13095.x">The sonar receiver of the bat.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 188, 161-174 (1971).</li>
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</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Mit unserem Ultraschallsystem haben wir bewiesen fetale Wachstumsretardierung bei MC/NK-defizienten Müttern aus gd10 auf. Darüber hinaus bei gd10 und 12, wir beobachteten reduzierte plazentare Abmessungen und bei gd14 das Fehlen oder die Umkehrung der Ende diastolischer Strömung in die UmAs einige Föten von uMC/uNK-defizienten Mäusen. Dieses Zeichen der schlechten Vaskularisation war verbunden mit einem nennenswerten Widerstand Index der Arterien IUGR angibt. Ergebnisse bestätigen die wichtige Rolle der uMCs und uNKs in ...

Ultraschall ist Schallwellen mit Frequenzen oberhalb des hörbaren Bereiches des menschlichen Ohres, größer als etwa 20 kHz1. Tiere wie Fledermäuse, Wales, Delfine2,3, Mäuse4, Ratten5und Maus Lemuren6 alle verwenden Ultraschall zur Orientierung oder Kommunikation. Menschen nutzen des Ultraschalls für verschiedene technische und medizinische Anwendungen. Ein Ultraschallgerät kann die Schallwelle zu erstellen und zu verteilen und repräsentieren das Signal. Wenn Ultraschall auf ein Hindernis stösst, der Klang wird reflektiert, absorbiert oder kann durch sie gehen. Die Anwendung von Ultraschall als ein bildgebendes Verfahren, Sonographie, genannt dient zur Analyse von organischen Geweben in der Human- oder Veterinärmedizin wie das Herz (Echokardiographie)7,8, Lunge9, Schilddrüse10 , Nieren11und urinausscheidenden und reproduktiven Traktate12,13; Erkennung von Gallensteinen14 und Tumoren15; und Bewertung der Durchblutung der Gefäße oder Organe16,17. Ultraschall ist eine Standardmethode in Vorsorgeuntersuchungen während der Schwangerschaft und fetalen Entwicklungsstörungen oder Beeinträchtigungen frühzeitig erkannt werden können. Insbesondere wird das Wachstum des Fötus in regelmäßigen Abständen zu erkennen, eine mögliche IUGR überwacht. Schließlich kann fetalen Durchblutung überwacht werden, da das Wachstum Einschränkungen18,19,20,21hinweisen kann.
Ein großer Vorteil der Ultraschall-Bildgebung im Vergleich zu anderen Methoden wie Röntgen ist der Klang Harmlosigkeit der Gewebe analysiert werden. Diese einfache und schnelle Methode ist nicht invasiv, schmerzlos, und kann eine Anzahl von Zeiten verwendet. Die Anschaffungskosten ein Ultraschallgerät ist teuer; Allerdings sind die Verbrauchsmaterialien benötigt billig. In diesem Manuskript verwendete Ultraschall-System eignet sich für eine Reihe von Tiermodellen (d. h. Mäuse und Fische) während ein Ultraschallgerät für den Menschen eine Frequenz von 3-15 mHz erfordert, eine Frequenz von 15-70 mHz ist erforderlich für Mäuse.
Das vorliegende Manuskript beschreibt ein Protokoll für die Verwendung von B-Mode, doppler Farbmodus und Puls-Wave doppler-Modus. Die Beschreibung beinhaltet die Vorbereitung von Mäusen als auch Leistung, Datenerfassung und Speicherung. Diese Methode wurde erfolgreich angewandte, verschiedene Mausstämme überhaupt Schwangerschafts Tage und kann zur fetalen und plazentaren Entwicklung sowie mütterlichen und fetalen Blutparameter zu untersuchen. Hier werden alle Anwendungen basierend auf unsere Studien mit schwangeren MC/NK-defizienten und Kontrolle Mäuse erklärt.

<table><tbody><tr><td>LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb)</td><td>BioLegend</td><td>123204</td><td>Klon TM-&beta; 1; 500 & Mikro; g</td></tr><tr><td>Vevo 2100 System</td><td>&nbsp; FujiFilm VisualSonics Inc.</td><td></td><td>Wandler&nbsp; MS550D-0421</td></tr><tr><td>Vevo LAB Software</td><td>&nbsp; FujiFilm VisualSonics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Baxter</td><td>PZN: 6497131</td><td></td></tr><tr><td>Elektrodengel</td><td>Parker</td><td>12_8</td><td></td></tr><tr><td>OP-Band</td><td>3M Transpore</td><td>1527-1</td><td></td></tr><tr><td>Augencreme</td><td>Bayer</td><td>PZN: 1578675</td><td></td></tr><tr><td>Applikatoren mit Wattespitze</td><td>Raucotupf</td><td>11969</td><td>100 Stück</td></tr><tr><td>Enthaarungscreme</td><td>Reckitt Benckiser</td><td></td><td></td>2077626</tr><tr><td>Kompressen</td><td>Nobamed Paul Danz AG</td><td>856110</td><td>10 x 10 cm</td></tr><tr><td>Ultraschallgel</td><td>Gello GmbH</td><td>246000</td><td></td></tr></tbody></table>

hochfrequenz-ultraschall für die analyse der fetalen und plazentaren entwicklung in vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Ultraschall-Bildgebung ist eine weit verbreitete Methode zur Erkennung von Organanomalien und Tumoren im menschlichen und tierischen Geweben. Die Methode ist nicht invasiv, harmlos und schmerzlos, und die Anwendung ist einfach, schnell und überall, auch mit mobilen Geräten durchgeführt werden kann. Während der Schwangerschaft ist Ultraschall-Bildgebung standardgemäß zur fetalen Entwicklung aufmerksam verfolgen. Die Technik ist wichtig, intrauterine Wachstumsretardierung (IUGR), eine Komplikation der Schwangerschaft mit kurz- und langfristigen gesundheitlichen Folgen für die Mutter und Fötus zu bewerten. Verständnis des Prozesses der IUGR ist unverzichtbar für die Entwicklung von wirksamerer Therapiestrategien.
Das Ultraschallsystem verwendet in diesem Manuskript ist ein Ultraschallgerät für die Analyse von kleinen Tieren hergestellt und kann in verschiedenen Forschungsbereichen, einschließlich der Schwangerschaft verwendet werden. Hier beschreiben wir die Nutzung des Systems für in Vivo Analyse der Feten von natürlichen killer (NK) Zelle/Mastzellen (MC)-mangelhafte Mütter das Wachstum eingeschränkt Welpen gebären. Das Protokoll beinhaltet die Vorbereitung des Systems, Umgang mit den Mäusen vor und während der Messungen und die Verwendung von den B-Modus, Farb-doppler-Modus und Puls-Wave doppler-Modus. Fetale Größe, plazentare Größe und Blut-Versorgungsmaterial zu den Fötus wurden analysiert. Wir fanden reduzierte Implantation Größen und kleinere Plazenta in NK/MC-defizienten Mäusen von Mid Schwangerschaft ab. Darüber hinaus MC/NK-Mangel war abwesend zugeordnet und umgekehrt Ende diastolischer Strömung in der fetalen Arteria Umbilicalis(UmA) und einen erhöhten Widerstand-Index. Die im Protokoll beschriebenen Methoden können leicht für Verwandte und nicht verwandte Forschungsthemen verwendet werden.

Einzelkomponenten der Ultraschall-System verwendet in dieser Handschrift sind in Abbildung 1dargestellt. Abbildung 2 zeigt Vertreter Ultraschallbilder im B-Modus zu gd5, 8, 10 und 12 (B) und entsprechenden Implantation Flächenmessung Ergebnisse (A), zeigen einen deutliche reduzierte Implantation Bereich erworben Anti-CD122-behandelten Cpa3Cre / + Mäuse aus gd10 ab.
<p class="jove_c...

Hier beschreiben wir die Technik der Hochfrequenz-Ultraschall zur in Vivo Analyse der Feten bei Mäusen. Diese Methode ermöglicht das Follow-up von Föten und die Analyse der plazentaren Parameter sowie mütterlichen und fetalen Durchblutung während der gesamten Schwangerschaft.

Hochfrequenz-Ultraschall für die Analyse der fetalen und plazentaren Entwicklung In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

Diese Methode ist sehr wichtig, um Schlüsselfragen in den Bereichen Onkologie, Neurobiologie, Kardiologie und Fetalentwicklung zu beantworten, und natürlich ist sie auch im Bereich der Reproduktionsforschung wichtig. Die Hauptvorteile dieser Technik sind, dass sie nicht-invasiv, schmerzlos, einfach, schnell ist und die Nachbeobachtung von Föten an relevanten Gestationszeitpunkten während der Schwangerschaft ermöglicht. Schalten Sie mindestens eine halbe Stunde vor dem Bildgebungsverfahren das Ultraschallsystem, die beheizte Plattform und den Gelwärmer ein.Öffnen Sie eine neue Studie oder eine neue Serie in einer vorhandenen Studie im Browser. Geben Sie alle erforderlichen Informationen in das Studieninfofenster ein. Klicken Sie auf OK, und bestätigen Sie, dass das Bildgebungsfenster im B-Modus angezeigt wird.Wenn der Ultraschall bereit ist, bestätigen Sie einen Mangel an Reaktion auf Zehenkneifen in einer anästhesierten Maus, und tragen Salbe auf die Augen des Tieres. Legen Sie einen Tropfen Elektrogel auf jeden der 4 Kupferabschnitte der beheizten Plattform und befestige die Pfoten an den elektrogelbeschichteten Abschnitten der Plattform. Entfernen Sie das Haar aus dem Bauch des Tieres mit Enthaarungscreme und einem Wattestäbchen, waschen Sie die Creme nach einer Minute mit einer wassergetränkten Kompresse von der enthaarten Haut.Dann vorgewärmtes Ultraschallgel auf den exponierten Bereich auftragen. Ein Grund für die geringe Signalintensität kann die geringe Menge an Gel zwischen der Maus und dem Ultraschallstrahl sein. Für eine gute Signalqualität ist unserer Erfahrung nach eine recht große Gelmenge notwendig.Wenn das Tier bereit ist, legen Sie den Messumformer über die Blase für den Einsatz als Bezugspunkt, und bewegen Sie den Heizplattformtisch nach links und rechts des Bauches, um die fetalen Implantationen im 2D-B-Modus zu verfolgen, indem Sie den Messumformer oder die Plattform nach Bedarf anpassen, bis die erste Implantation auf dem Bildschirm in seiner größten Größe sichtbar ist. Wählen Sie Bildbeschriftung aus, und geben Sie einen Namen für die Bilddatei ein. Passen Sie die Position des Bildes an, bis der Blutfluss innerhalb der Arteria umbilicalis der Plazenta sichtbar ist, und speichern Sie einen einzelnen Rahmen oder Cineloop für Plazentamessungen.Für Farb-Doppler-Bildgebung, um die Richtung des Blutflusses zu bestimmen, drücken Sie die Farbe-Taste, und verwenden Sie den Trackball, um das Farbfeld an die entsprechende Position zu verschieben, indem Sie auf Aktualisieren klicken, um die Größe des Feldes bei Bedarf anzupassen. Wenn das Feld die richtige Größe hat, klicken Sie auf Auswählen, und speichern Sie das Bild als experimentell geeignet. Für gepulste Welle Doppler Quantifizierung des Blutflusses durch die Gefäße, lokalisieren Sie den Bereich des Interesses in der Farbe Doppler Erfassungsmodus und klicken Sie auf Pulswelle.Es wird eine gestrichelte Linie angezeigt. Bewegen Sie die Linie auf das Blutgefäß von Interesse und verwenden Sie den Doppler Winkelknopf, um den Winkel der Linie anzupassen, um mit dem Blutfluss auszurichten. Bei gepulsten Wellen-Doppler-Messungen ist es wichtig, den Winkel zwischen der Richtung des Blutflusses und dem Ultraschallstrahl zu beobachten.Zu hohe Winkel oder unterschiedliche Winkel zwischen Tieren im selben Experiment können zu ungenauen Geschwindigkeitsmessungen führen. Klicken Sie dann auf Aktualisieren und speichern Sie cineloop der angezeigten Doppler-Linien im gepulsten Wave-Doppler-Erfassungsfenster. Um die Daten zu überprüfen, klicken Sie auf Studienverwaltung, scrollen Sie zum von Interesse interessierten Miniaturbild, doppelklicken Sie auf Aktualisieren, klicken Sie dann erneut auf Studienverwaltung, und klicken Sie auf Schließen, um das Browserfenster zu schließen, um die Datenerfassung abzuschließen und eine aufgezeichnete Serie zu speichern.Um die Daten zu exportieren, verbinden Sie eine Festplatte, klicken Sie auf Exportieren nach, um eine oder mehrere Datenreihen zu markieren, und wählen Sie den Speicherplatz für das Kopieren der Daten auf die Festplatte aus. Hier werden repräsentative Ultraschallbilder gezeigt, die im B-Modus an den Gestationstagen 5, 8, 10 und 12 aufgenommen wurden, und die entsprechenden Implantationsflächenmessergebnisse, die eine signifikante Reduktion des Implantationsbereichs bei anti-CD122 behandelten Mastzell-defizienten Mäusen ab dem 10. Tag der Schwangerschaft zeigen. Die B-Modus-Bildgebung erleichtert die Abbildung und Messung einzelner Teile einer Implantation.Beispielsweise weisen anti-CD122 behandelte Mastzell-Mangeltiere eine signifikante Verringerung der Plazentafläche, Dicke und des Durchmessers im Vergleich zu unbehandelten Mäusen an den Gestationstagen 10 und 12 auf. Im Gegensatz dazu sind die Plazentafläche und der Durchmesser zwischen den Gruppen am 14. Schwangerschaftstag und der Plazentadicke ähnlich, was eine signifikante Zunahme der anti-CD122 behandelten transgenen Tiere im Vergleich zu unbehandelten Mäusen am 14. Tag der Schwangerschaft darstellt. Die pulsierte Wellen-Doppler-Bildgebung der Arteria uterina zur Messung der systolischen Spitzengeschwindigkeit und der diastolischen Geschwindigkeit sowie der berechnete Widerstandsindex zeigen ähnliche Werte zwischen den behandelten und unbehandelten Tieren.Der Resistenzindex der Arteria umbilicalis bei anti-CD122 behandelten Mastzellmangeltieren ist jedoch im Vergleich zu unbehandelten Mäusen signifikant erhöht. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig zu bedenken, dass Sie dies jeden zweiten Tag statt jeden Tag tun sollten, um den Stress und das Risiko einer wiederholten Narkotisierung der Tiere zu vermeiden. Im Anschluss an dieses Verfahren können weitere Messungen wie 3D-Messung, Visualisierung und Quantifizierung der Gewebebewegung im Zeitverlauf, Blutdruckmessungen und auch Ultraschall-geführte Injektionen durchgeführt werden.Nach ihrer Entwicklung ebnete diese Methode den Weg für Ärzte und Forscher im Bereich der Geburtshilfe und vorgeburtlichen Versorgung, weil es möglich ist, die fetale Entwicklung zu verfolgen und mögliche Anomalien während der Schwangerschaft zu erkennen.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

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