Name: Bereichern Sie und erweitern Sie seltene antigenspezifischen T-Zellen mit magnetischen Nanopartikeln (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-17T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 28 s
Description: Erfahren Sie die E plus E-Technik zur Anreicherung und Expansion seltener antigenspezifischer T-Zellen mit magnetischen Nanopartikeln. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Neoepitopen und personalisierte Immuntherapie.

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J.W.H. danke das NIH Krebs Nanotechnologie Training Center am Johns Hopkins Institut für Nanobiotechnologie, die National Science Foundation Graduate Research Fellowship (DGE-1232825) und die Bögen Foundation Fellowship Unterstützung. Diese Arbeit wurde durch die Unterstützung durch die National Institutes of Health (P01-AI072677, R01-CA108835 R21-CA185819), TEDCO/Maryland Innovationsinitiative und Coulter Foundation (JPS) finanziert.

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</ol>

Die Autoren erklären die folgenden konkurrierenden finanziellen vorgibt: unter einem Lizenzvertrag zwischen NexImmune und der Johns Hopkins University, Jonathan Schneck ist berechtigt, einen Anteil des Königtums erhielt von der Universität auf den Verkauf von Produkten in diesem beschrieben Artikel. Er war auch einer der Gründer von NexImmune und besitzt Eigenkapital in das Unternehmen. Er dient als Mitglied des Board of Directors und wissenschaftlicher Beirat des NexImmune. Die Bedingungen dieser Vereinbarungen müssen überprüft und genehmigt von der Johns Hopkins University gemäß ihrer Interessenkonflikt Politik wurde.

Wir haben eine neuartige antigenspezifischen T-Zellen Isolationstechnologie basierend auf Nanopartikel künstliche antigenpräsentierende Zellen (aAPCs) erstellt. Nanopartikel aAPCs haben Peptid-MHC auf der Oberfläche geladen, die Antigen-spezifische T-Zell-Bindung und Aktivierung neben co-stimulatory Aktivierung ermöglicht. aAPCs sind ebenfalls paramagnetisch und kann somit verwendet werden, um seltene antigenspezifischen T-Zellen mit einem magnetischen Feld bereichern. Wir haben optimiert und studierte wichtige Nanoparti...

Mit dem Aufstieg von vielen Immuntherapien muss man zu charakterisieren und Immunreaktionen Steuern zu können. Insbesondere ist die adaptive Immunantwort von Interesse wegen der Besonderheit und der Lebensdauer der Zellen. Vor kurzem, haben Chimären-Antigen-Rezeptor-T-Zell-Therapien für die Krebstherapie zugelassen sind; Allerdings basieren die Antigen-Rezeptoren aus gemeinsamen Zelle Oberflächenantigen CD19, anstatt die Antigene spezifisch für die Krebs-1. Darüber hinaus die Besonderheit können Immuntherapien auch der Mangel an Kontrolle und begrenzten Verständnis der dynamischen Immunantwort in Krebs oder Autoimmunität leiden.
Eine der Herausforderungen des Studiums Antigen-spezifische Reaktionen ist ihre extrem niedrigen Frequenzen, z. B.., Antigen-spezifische T-Zellen sind 1 von jeden 104 106 T Zellen2,3. So untersuchen die T-Zellen vorhanden sind oder als Reaktion, die Zellen bereichert und erweitert werden, oder ihr Signal müssen verstärkt werden. Es ist teuer und schwer zu pflegen die Feeder-Zellen mit aktuellen Techniken, die sich auf den Ausbau der Antigen-spezifische Zellen. Aktuelle Techniken, die im Fokus verstärkt das Signal des Antigen-spezifische T-Zellen, wie die Enzym-linked Immunospot (ELISPOT) assay, der Wiederverwendung von den T Zellen4zu begrenzen. Zu guter Letzt wegen geringer Sensitivität oft diese beiden Techniken für die Antigen-spezifische Aufzählung kombiniert werden müssen.
Um diese Probleme anzugehen, haben wir die magnetische Nanopartikel basierende künstliche Antigen präsentierenden Zelle (aAPC)5,6,7,8entwickelt. Die aAPC kann mit einem Antigen-spezifische Signalpeptid geladenen großen Histocompatibility Komplex (pMHC)- und co-stimulatory Molekülen - funktionalisiert werdenzB., Antikörpers Anti-CD28-beide bereichern antigenspezifischen T-Zellen und dann anschließend stimulieren Sie ihre Expansion (Abbildung 1). Die Partikel können somit eine kostengünstige handelsübliche Produkt sein, das können sowohl Antigen-spezifische Stimulationen angepasst noch standardisiert über Experimente und Patienten. Durchführung der Bereicherung und Erweiterung Ergebnisse in Hunderte bis Tausende-Fach Ausbau der Antigen-spezifische CD8 + T-Zellen zu verarbeiten und kann dazu führen, dass die Frequenzen bis zu 60 Prozent nach nur einer Woche, damit die Charakterisierung oder therapeutischen Einsatz der großen Anzahl der Zellen. Hierin, wir beschreiben, wie Nanopartikel aAPCs, einige kritische Überlegungen bei der Auswahl der Eigenschaften der Nanopartikel, machen und zeigen einige typische Ergebnisse von der Verwendung dieser Partikel zu isolieren und Ausbau seltene Antigen-spezifische CD8 + T-Zellen.

<table><tbody><tr><td>DimerX I: Rekombinant lösliche dimere humane HLA-A2:Ig-Fusionsprotein</td><td>BD Biosciences</td><td>551263</td><td></td></tr><tr><td>DimerX I: rekombinant lösliche dimere Maus H-2D[b]:Ig</td><td>BD Biosciences</td><td>551323</td><td></td></tr><tr><td>DimerX I: Rekombinant lösliche dimere Maus H-2K[b]:Ig-Fusionsprotein</td><td>BD Biosciences</td><td>550750</td><td></td></tr><tr><td>Vivaspin 20 MWCO 50 000</td><td>GE Life Sciences</td><td>28932362</td><td></td></tr><tr><td>Vivaspin 2 MWCO 50 000</td><td>GE Life Sciences</td><td>28932257</td><td></td></tr><tr><td>gereinigtes humanes Beta 2 Mikroglobulin</td><td>Bio-Rad</td><td>PHP135</td><td></td></tr><tr><td>nanomag-D-spio, NH2, 100 nm Nanopartikel</td><td>Micromod</td><td>79-01-102</td><td></td></tr><tr><td>Super Mag NHS aktivierte Kügelchen, 0,2 &; Mikro; m</td><td>Ocean Nanotech</td><td>SN0200&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Biotin MicroBeads UltraPure</td><td>Miltenyi</td><td>130-105-637</td><td></td></tr><tr><td>EZ-Link NHS-Biotin</td><td>ThermoFisher</td><td>20217</td><td></td></tr><tr><td>Sulfo-SMCC Vernetzer&nbsp;</td><td>ProteoChem</td><td>c1109-100mg</td><td></td></tr><tr><td>2-Iminothiolanhydrochlorid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I6256 Sigma&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>96 Well Halbflächige Mikroplatte, schwarzes Polystyrol</td><td>Corning</td><td>3875</td><td></td></tr><tr><td>FITC Ratte Anti-Maus Ig, &lambda; 1, &lambda; 2, & &lambda; 3 Lichterkette&nbsp; Klonen &nbsp; R26-46&nbsp; &nbsp;</td><td>BD Biosciences</td><td>553434</td><td></td></tr><tr><td>FITC Maus Antiarmenischer und Syrischer Hamster IgG&nbsp; Klonen &nbsp; G192-1</td><td>BD Biowissenschaften</td><td>554026</td><td></td></tr><tr><td>B6. Cg-Thy1a/Cy Tg(TcraTcrb)8Rest/J (transgene PMEL) Mäuse</td><td>Jackson Laboratory</td><td>005023</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J (B6 Wildtyp) Mäuse</td><td>Jackson Laboratory</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>CD8a+ T-Zell-Isolationskit, Maus</td><td>Miltenyi</td><td>130-104-075</td><td></td></tr><tr><td>MS Säulen</td><td>Miltenyi</td><td>130-042-201</td><td></td></tr><tr><td>LS Säulen</td><td>Miltenyi</td><td>130-042-401</td><td></td></tr><tr><td>Streptavidin-Phycoerythrin, SAv-PE</td><td>Biolegend</td><td>405203</td><td></td></tr><tr><td>N52 Scheibenmagnete von 0,75 Zoll&nbsp;</td><td>K& J Magnetics</td><td>DX8C-N52</td><td></td></tr><tr><td>APC Anti-Maus CD8a Antikörper, Klon 53-6.7</td><td>Biolegend</td><td>100711</td><td></td></tr><tr><td>LIVE/DEAD Fixierbares Green Dead Cell Stain Kit, für 488 nm Anregung&nbsp;</td><td>ThermoFisher</td><td>L-34969</td><td></td></tr></tbody></table>

bereichern sie und erweitern sie seltene antigenspezifischen t-zellen mit magnetischen nanopartikeln

Enrich and Expand Rare Antigen-specific T Cells with Magnetic Nanoparticles

Wir haben ein Werkzeug, um sowohl bereichern und erweitern antigenspezifischen T-Zellen entwickelt. Dies ist hilfreich in Fällen wie z. B. A) erkennen die Existenz von antigenspezifischen T-Zellen, B) Fühler die Dynamik der Antigen-spezifische Antworten, (C) verstehen wie Antigen-spezifische Reaktionen Krankheitszustand z. B. Autoimmunität beeinflussen, (D) entmystifizieren heterogenen Antworten für Antigen-spezifische T-Zellen, oder E) nutzen Antigen-spezifische Zellen für die Therapie. Das Tool basiert auf einem magnetischen Teilchen, dass wir konjugieren Antigen-spezifische und T-Zell co-stimulatory Signale und wir als künstliche antigenpräsentierende Zellen (aAPCs) bezeichnen. Folglich, da die Technologie einfach herzustellen ist, kann es leicht von anderen Labors angenommen werden; Somit ist unser Ziel hier detailliert zu beschreiben, die Fertigung und die anschließende Nutzung der aAPCs. Wir erklären wie man Antigen-spezifische und co-stimulatory Signale an den aAPCs befestigen, wie man sie zu bereichern für Antigen-spezifische T-Zellen nutzen und wie Sie Antigen-spezifische T-Zellen zu erweitern. Darüber hinaus beleuchten wir Konstruktion Überlegungen anhand von experimentellen und biologische Informationen unserer Erfahrung mit Charakterisierung von antigenspezifischen T-Zellen.

Um eine erfolgreiche Bereicherung und Erweiterung der antigenspezifischen T-Zellen zu vervollständigen, die Peptid beladenen MHC-Ig und co-stimulatory Moleküle erfolgreich aAPC Partikel beizufügen. Basierend auf den 3 Methoden der Partikel Anlage, bieten wir einige repräsentativen Daten für eine erfolgreiche Konjugation Verfahren Ergebnis (Abb. 5a). In der Tat, wenn die Liganden-Dichte zu niedrig ist, dann es wird effektive Stimulation der Antigen-spezifische...

Antigen-spezifische T-Zellen sind schwer zu charakterisieren oder Therapien aufgrund ihrer extrem niedrigen Frequenzen zu nutzen. Hier bieten wir ein Protokoll, um eine magnetische Partikel zu entwickeln, die zur antigenspezifischen T-Zellen binden können, um diese Zellen zu bereichern und dann erweitern sie mehrere hundertfachen zur Charakterisierung und Therapie.

Bereichern Sie und erweitern Sie seltene antigenspezifischen T-Zellen mit magnetischen Nanopartikeln

We have developed a tool to both enrich and expand antigen-specific T cells. This can be helpful in cases such as to A) detect the existence of ...

Der Hauptvorteil unserer neuartigen Technik, die wir E plus E, die für Anreicherung plus Expansion steht, nannte, ist also, dass wir diese Zellen, seltene antigenspezifische Zellen, gleichzeitig anreichern und erweitern können. Dies ermöglicht es uns, eine ausreichende Anzahl von Zellen zu entwickeln, die wir verwenden werden, um ihre Rolle in verschiedenen Umgebungen und in verschiedenen klinischen Umgebungen zu untersuchen, oder uns sogar erlaubt, jetzt eine große Anzahl von Zellen zu entwickeln, die wir für die Immuntherapie in einer Weise nutzen können, die wir vorher nicht konnten. Die von uns entwickelte Methode, dieses E plus E, kann helfen, wichtige Fragen in der Grundimmunologie über das Vorhandensein von Neoepitopen zu beantworten.Was sind Neoepitope? Das sind die personalisierten Epitope, von denen wir wissen, dass sie jetzt sehr wichtig für die Krebsimmuntherapie und auch die antigenspezifische Dynamik sind und wie diese Faktoren Krankheitszustände und eine effektive Zelltherapie beeinflussen. Die Implikationen dieser Technik reichen bis zur Immuntherapie, da die künstliche Antigen-präsentierende Zelle des Nanopartikels ein standardisierbares Produkt sein könnte, das leicht auf die Immunantworten des einzelnen Patienten zugeschnitten werden kann.Um künstliche Antigen-präsentierende Nanopartikelzellen zu erzeugen, setzen Sie die lyophilisierten Partikel in einem Milliliter Resuspensionspuffer wieder auf und wirbeln die Suspension mindestens 15 Minuten lang kräftig aus, bis keine Aggregate sichtbar sind. Partikel, die vor der Reaktion mit Protein nicht ausreichend gewirbelt und resuspendiert wurden, führen zu größeren aggregierten Partikeln, die nicht dissoziiert werden können. Legen Sie die magnetischen Partikel auf einen magnetischen Ständer, um den Überstand zu entfernen und sie mit 0,5 Millilitern frischer Resuspensionspuffer wieder aufzusetzen.Übertragen Sie die Partikelsuspension auf eine Glasszintillationsdurchstechflasche für Wirbel, bis keine Aggregate sichtbar sind, und fügen Sie 0,1 Milligramm an gesamten Stimulierenden Signalen pro einem Milligramm Resuspendierten partikel hinzu. Nach dem Wirbeln die Suspension 2,5 Stunden bei Raumtemperatur mit Einem Mischen in einem Rotator reagieren lassen, gefolgt von der Zugabe von 0,1 MilliliterLöschpuffer für eine zusätzliche 30-minütige Inkubation bei Raumtemperatur mit Mischen. Am Ende der zweiten Reaktion die Szintillationsflasche auf den magnetischen Ständer legen und die Partikel viermal in einem Milliliter Resuspensionspuffer waschen, den Puffer entfernen, wenn er sich nach jeder Wäsche frei dreht, und ihn durch einen frischen Resuspensionspuffer für die anschließende Wäsche auf dem Magneten ersetzen.Nach der letzten Wäsche die Lösung ansaugen und die Partikel aus dem magnetischen Ständer entfernen, dann die Partikel in einem Milliliter frischer Resuspensionspuffer bei vier Grad Celsius für bis zu sechs Monate lagern. Um antigenspezifische CD8+T-Zellen zu isolieren, mazerieren Sie die Milz und Lymphknoten von wilden Typ C57 schwarzen 6J-Mäusen durch ein steriles, 70-Mikrometer-Zellsieb mit häufigen PBS-Spülungen und verwenden Sie ein No-Touch-CD8+T-Zellisolationskit gemäß den Anweisungen des Herstellers, um die Nicht-CD8+T-Zellen zu beseitigen. Nach dem Zählen die isolierten CD8+T-Zellen durch Zentrifugation zu sammeln und das Pellet in 100 Mikroliter PBS, ergänzt mit 0,5%Bovine Serum Albumin und zweiMillimolar EDTA, wieder aufzusetzen, dann die Zellen mit den nanopartikeln künstlichen Antigen-präsentierenden Zellen so inkubieren, dass es ein mal 10 bis 10 bis 10 , Fünf-Milliliter-Polystyrol-Rundbodenrohr für eine Stunde bei vier Grad Celsius mit kontinuierlicher Mischung.Waschen Sie am Ende der Inkubation die Nanopartikelzellsuspension dreimal auf dem magnetischen Ständer, wie gezeigt, und setzen Sie die künstlichen Antigen-präsentierenden Zellen und die angereicherten CD8+T-Zellen in 500 Mikroliter n frischem, ergänztem Medium mit 1%T Zellwachstumsfaktor nach der letzten Wäsche wieder auf. Für eine maximale Zellrückgewinnung ist es wichtig, die Partikel und Zellen für mindestens zwei Minuten auf der Magnetsäule zu belassen und den Puffer sorgfältig zu saugen, ohne die Partikel und Zellen, die dem Magnetfeld unterliegen, zu stören. Nach zählungsmäßigem Saatgut 2,5 mal 10 bis fünf angereicherte CD8+T-Zellen und magnetische Partikelmischung pro 160 Mikroliter ergänztes Medium plus 1%TCGF in einer 96-well U-Bodenplatte.Füttern Sie am dritten Tag die Zellen mit 80 Mikrolitern ergänzten Mediums mit 2%T Zellwachstumsfaktor pro Brunnen und geben Sie die Platte für vier weitere Tage an den Zellkultur-Inkubator zurück. Am siebten Tag ernten Sie die stimulierten Zellen zum Zählen in ein fünf Milliliter Runderrohr und sammeln die Zellen per Zentrifugation. Setzen Sie das Pellet in 0,5 Milliliter PBS wieder auf, ergänzt mit 0,05% Natriumazid und 2%fetalem Rinderserum zum Zählen und aliquotieren fünfmal 10 bis fünf mal 10 bis fünf mal 10 zu den fünften Zellen in neue Fünf-Milliliter-Rundbodenröhren für antigenspezifische Färbung.Die entsprechenden Rohre mit biotinyliertem MHC-ig und Anti-Maus-CD8a für eine Stunde bei vier Grad Celsius beschriften, anschließend eine Zentrifuge in frischem PBS waschen, um überschüssiges biotinyliertes Immunglobulin zu entfernen, dann die Proben mit einem geeigneten streptavidin-konjugierten Sekundärantikörper und einem geeigneten lebend-toten fixierbaren totzelligen Stamm für 15 Minuten bei vier Grad Celsius zu färben und die Zellen auf einem Durchflusszytometer zu lesen, um die Spezifität und Anzahl der antigenspezifischen CD8+T-Zellen nach Standardprotokollen zu bestimmen. Hier wurde eine erfolgreiche Proteinkonjugation mit drei verschiedenen Methoden der Proteinbindung an Partikeln erreicht. Wenn die aAPC-Ligandendichte zu niedrig ist, wird es keine wirksame Stimulation der antigenspezifischen CD8+T-Zellen geben.Die Qualitätskontrolle des biotinylierten Dimers kann auf transgenen CD8+T-Zellen zur Verifizierung der Färbung abgeschlossen werden. Diese repräsentativen Ergebnisse zeigen beispielsweise eine positive Färbung mit gp100-spezifischen CD8+T-Zellen mit nicht antigenspezifischen b6-CD8+T-Zellen als Hintergrundsteuerelement. Darüber hinaus ist die Kenntnis der Hintergrundfärbung des biotinylierten Dimers von entscheidender Bedeutung, da jeder Prozentsatz, der niedriger als diese Färbung in den cognate-gefärbten Röhrchen ist, als negatives Ergebnis angesehen werden sollte.Nach sieben Tagen anreichern und ausdsetzen, zwischen zwei Mal 10 bis vier und zweimal 10 bis fünf bis fünf bis 50%CD8+T-Zellen können von einer ursprünglichen fünfmal 10 bis zur sechsten endogenen CD8+T-Zellanfangspopulation erwartet werden. Die gleiche Methode kann verwendet werden, um menschliche antigenspezifische CD8+T-Zellen mit ähnlichen Prozentzuwächsen und Einer Anzahl antigenspezifischer CD8+T-Zellen zu isolieren und zu stimulieren, die nach nur einer Woche Expansion nach der Anreicherung beobachtet wurden. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, sich daran zu erinnern, die entsprechenden Reagenzqualitätsprüfungen wie beschrieben durchzuführen.Nach diesem Verfahren können andere Methoden wie die Durchflusszytometrie für intrazelluläre Zytokinfärbung oder oberflächenproteinexpression durchgeführt werden, um zusätzliche Fragen zur Funktionalität oder zum Phänotyp der Zellen zu beantworten. Diese Technik ebnet den Weg für Forscher im Bereich der immunologischen Grundologie, um die Breite, Tiefe und Dynamik antigenspezifischer Reaktionen in anderen biomedizinischen Bereichen wie Krebs, Infektionskrankheiten oder Autoimmunitätsforschung zu erforschen.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Engineering

Ingenieurwesen

Hier beschreiben wir ein Verfahren zur Aktivierung und Ausbau menschlichen NKT-Zellen aus losem T-Zellpopulationen mit künstlichen Antigen-präsentierende Zellen (AAPC). Die Verwendung von CD1d basierenden AAPC bietet eine standardisierte Verfahren zur Erzeugung hoher Anzahl funktioneller NKT-Zellen.

Künstliche Antigen-präsentierenden Zelle (AAPC) vermittelte Aktivierung und Expansion der Natural Killer-T-Zellen

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung von Peptid: MHC-Tetrameren und magnetische Mikrobeads zur niederfrequenten Populationen von Epitop-spezifischen T-Zellen zu isolieren und zu analysieren durch Durchflusszytometrie. Dieses Verfahren ermöglicht die direkte Untersuchung von endogenen T-Zell-Populationen von...

Peptid: MHC-Tetramer-basierte Anreicherung von Epitop-spezifischer T-Zellen

Dieses Video beschreibt die Anreicherung von T-Zellen aus der Milz einer Maus durch Negativselektion mit einem Magnetseparator. Bei der Technik werden die anderen Zellen in der Probe mit Antikörpern oder Liganden, die gegen spezifische Zelloberflächenantigene gerichtet sind, gezielt depletiert.

T-Zell-Anreicherung: Eine Technik zur Isolierung von T-Zellen aus gemischten Zellpopulationen durch magnetische Trennung

Dieses Video beschreibt ein Protokoll zur Isolierung von seltenen Antigen-spezifischen CD8+ T-Zellen unter Verwendung von magnetischen Nanopartikel-basierten künstlichen antigenpräsentierenden Zellen (aAPCs), die mit antigenen, peptidbeladenen MHC-Igs und Anti-CD28-Antikörpern funktionalisiert sind. Die Interaktion der aAPCs mit CD8+ T-Zellen, die spezifisch die antigenen Peptid-Targeting T-Zell-Rezeptoren exprimieren, gefolgt von deren Expansion in vitro, führt zur Anreicherung und Expansion...

Nanopartikelbasierte Anreicherung und Expansion von antigenspezifischen CD8+ T-Zellen

Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Synthese von magneto-Plasmonen-Nanopartikel mit einem starken magnetischen Moments und einer starken Nah-Infrarot (NIR)-Absorption. Das Protokoll schließt auch Antikörper-Konjugation in den Nanopartikeln durch die Fc-Teil für verschiedene biomedizinische Anwendungen, die Molekular spezifisches Targeting erforderlich.

Synthese von Immunotargeted Magneto-Plasmonen Nanocluster

Hier stellen wir ein angepasstes Protokoll vor, das zur Erzeugung einer großen Anzahl von murinen invarianten natürlichen Killer-T-Zellen aus der Milz der Maus verwendet werden kann. Das Protokoll beschreibt einen Ansatz, mit dem Milz-iNKT-Zellen in vitro mit einer begrenzten Anzahl von Tieren und Reagenzien angereichert, isoliert und expandiert werden können.

Ein optimiertes Verfahren zur Isolierung und Ausbau unveränderlichen natürlichen Killer T-Zellen aus der Milz der Maus

Ein Protokoll für die Synthese und Kationisierung von Kobalt-dotiertem Magnetoferritin wird vorgestellt, sowie eine Methode zur schnellen Magnetisierung von Stammzellen mit kationisiertem Magnetoferritin.

Synthese von kationisiertem Magnetoferritin für ultraschnelle Magnetisierungs von Zellen

Eine einfache aber wirksame Methode, die magnetischen Nanopartikel verwendet antigen-reaktiven B-Zellen für die funktionale und phänotypische Analyse zu erfassen und zu bereichern beschrieben.

Detektion und Anreicherung von Rare Antigen-spezifische B-Zellen für die Analyse von Phänotypen und Funktion

Wir beschreiben ein schnelles und robustes Protokoll, um invariante natürliche Killer-T-Zellen (iNKT) aus Mausmilz anzureichern und sie in vitro auf geeignete Zahlen für In-vitro- und In-vivo-Studien zu erweitern.

Aufreinigung und Expansion von mausinvarianten natürlichen Killer-T-Zellen für in vitro und in vivo Studien

Wir bieten ein detailliertes Protokoll für die Isolierung und Identifizierung seltener antigenspezifischer T-Zellpopulationen in der Lunge von Mäusen durch magnetische T-Zell-Anreicherung und Peptid:Major Histocompatibility Complex (MHC)-Tetramere.

Identifizierung seltener antigenspezifischer T-Zellen aus der Lunge von Mäusen mit Peptid:Major-Histokompatibilitätskomplex-Tetrameren

Erfahren Sie die E plus E-Technik zur Anreicherung und Expansion seltener antigenspezifischer T-Zellen mit magnetischen Nanopartikeln. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Neoepitopen und personalisierte Immuntherapie.

Bereichern Sie und erweitern Sie seltene antigenspezifischen T-Zellen mit magnetischen Nanopartikeln

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