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DOI: 10.3791/58664-v
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Hier beschreiben wir eine Methode zur Bestimmung der Lunge Ausdruck von MiRNAs, die vorausgesagt werden, entzündlichen Gene regulieren mit Mäusen Ozon ausgesetzt oder gefilterte Luft in den verschiedenen Phasen des Estrous Zyklus.
Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen im Bereich der Lungenimmunität zu beantworten, wie die Expression von microRNAs bewertet werden kann, die voraussichtlich entzündliche Gene in der Lunge regulieren. Diese Technik bietet die einfache Möglichkeit, die Beiträge von zirkulierenden Hormonen zur Lunge microRNA Expression zu identifizieren. Um das estre Zyklusstadium zu beurteilen, halten Sie eine acht bis neun Wochen alte weibliche Maus manuell zurück und führen Sie die Spitze einer 10-Mikroliter-Kunststoffpipette ein, die mit ultrareinem Wasser gefüllt ist, in die Vagina.
Vier- bis fünfmal sanft spülen, um eine Probe zu sammeln, und die endgültige Spülung der Vaginalflüssigkeit auf eine Glasrutsche ablagern. Beobachten Sie dann die ungefärbte vaginale Spülung unter einem Lichtmikroskop bei 20-facher Vergrößerung. Für Ozon- und gefilterte Lufteinlagen maximal vier Mäuse in einen von zwei einzelnen 1,2-Liter-Glasbehältern mit Drahtgitterdeckeln geben.
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