Assaying for Inorganic Polyphosphate in Bacteria

Arya Pokhrel; Jordan C. Lingo; Frank Wolschendorf; Michael J. Gray

doi:10.3791/58818

Prüfung für anorganisches Polyphosphat in Bakterien

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Assaying for Inorganic Polyphosphate in Bacteria

Prüfung für anorganisches Polyphosphat in Bakterien

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07:20 min

January 21, 2019

DOI: 10.3791/58818-v

Arya Pokhrel¹, Jordan C. Lingo², Frank Wolschendorf², Michael J. Gray¹

¹Department of Microbiology,University of Alabama at Birmingham, ²Division of Infectious Diseases,University of Alabama at Birmingham

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Wir beschreiben eine einfache Methode für schnelle Quantifizierung von anorganischen Polyphosphat in verschiedenen Bakterien, einschließlich gramnegative und grampositive mykobakteriellen Arten.

Anorganisches Polyphosphat ist ein Schlüsselelement bei der bakteriellen Stressreaktion. Aber ältere Methoden zur Extraktion und Messung von Polyp in Bakterien sind komplex und arbeitsintensiv. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass sie eine schnelle, empfindliche und kostengünstige Quantifizierung von Polyp-Spiegeln in einer Vielzahl von verschiedenen Bakterienarten ermöglicht.

Das Verfahren wird von Arya Pokhrel, einer Studentin aus meinem Labor, demonstriert. Zu Beginn, wachsen Lactobacillus Reuteri Bakterien in malischen Enzym Induktionmedium ohne Cystin bei 37 Grad Celsius über Nacht ohne schütteln. Zentrifugieren Sie einen Milliliter dieser Nachtkultur in einem 1,5 Milliliter Mikrozentrifugenrohr, um genügend Zellen zu ernten, um insgesamt 50 bis 100 Mikrogramm zelluläres Protein zu erhalten.

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