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DOI: 10.3791/58931-v
Felipe J. Núñez1,2, Flor M. Mendez2, Maria B. Garcia-Fabiani1,2, Joaquín Pardo1,3, Marta Edwards1,2, Pedro R. Lowenstein1,2, Maria G. Castro1,2
1Department of Neurosurgery,University of Michigan Medical School, 2Department of Cell & Developmental Biology,University of Michigan, 3INIBIOLP, Histology B-Pathology B, School of Medicine,UNLP
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Neurosphären als 3D Kulturen angebaut sind ein mächtiges Werkzeug um Gliom Biologie zu studieren. Hier präsentieren wir ein Protokoll zum Immunohistochemistry durchführen unter Beibehaltung der 3D-Struktur von Gliom Neurospheres durch Paraffin einbetten. Diese Methode ermöglicht die Charakterisierung von Gliom Neurosphäre Eigenschaften wie Stemness und neuronale Differenzierung.
Dieses Protokoll ist wichtig, weil es verwendet werden kann, um das Vorhandensein von Gliom-Biomarkern durch eine Methode zu untersuchen, die die 3D-Struktur von Tumorneurosphären bewahrt. Der Hauptvorteil dieses Protokolls besteht darin, dass die Morphologie von Neurosphären im Vergleich zur Cytospin-Methode beibehalten wird, bei der Zellen einer belastenden Manipulation unterzogen und abgeflacht werden. Diese Methode kann auf alle anderen Gewebekultursysteme angewendet werden, in denen Zellen in 3D kultiviert werden und die Erhaltung der Struktur wichtig ist.
Zu Beginn, Kultur Tumor Neurosphären oder NS in einem T-25 Kolben, bis die Zellen konfluent sind. Wählen Sie den Tumor NS in einem 15 Milliliter konischen Rohr. Impellet die NS bei 300 Gs für fünf Minuten.
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