Name: Verhaltens-Tracking und Neuromast Darstellung der mexikanischen Cavefish (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 58 s
Description: Erfahren Sie hochdurchsatzfähige Verhaltensanalysen und Neuromast-Färbung bei mexikanischen Höhlenfischen für evolutionäre und biomedizinische Forschung. Diese kostengünstige Methode nutzt freie Software zur Untersuchung sensorischer Reaktionen.

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Wir danken allen Mitgliedern des Yoshizawa Labor einschließlich N. Cetraro, N. Simon C. Valdez, C. Macapac, J. Choi, L. Lu, J. Nguyen, S. Podhorzer, H. Hernandes, J. Fong, J. Kato und I. Lord für Fisch Pflege auf die experimentelle Fische in diesem Manuskript verwendet. Wir danken auch A. Keene Lab-Mitglieder, darunter s. Masek Train MY IR CCD Kamera zusammenzubauen. Zu guter Letzt möchten wir der Media Lab - College of Social Sciences - School of Communications an der University of Hawai ' i Mānoa für ihre unschätzbare Hilfe mit macht das Video vor allem B. Smith, J. Lam und S. White danken. Diese Arbeit wurde unterstützt durch Hawaiian Community Foundation (16CON-78919 und 18CON-90818) und nationale Institute der Gesundheit NIGMS (P20GM125508) vergibt an MY.

<ol><li>Keene, A. C., Yoshizawa, M., McGaugh, S. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKeene%2C+AC+%22Biology+and+Evolution+of+the+Mexican+Cavefish.+Biology+and+Evolution+of+the+Mexican+Cavefish%22">Biology and Evolution of the Mexican Cavefish. Biology and Evolution of the Mexican Cavefish</a>. , Elsevier Inc. Amsterdam. (2015).</li>
<li>Mitchell, R. W., Russell, W. H., Elliott, W. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMitchell%2C+RW+%22Mexican+eyeless+characin+fishes%2C+genus+Astyanax%3A+Environment%2C+distribution%2C+and+evolution.Special+publications+the+museum+Texas+Tech+University%22">Mexican eyeless characin fishes, genus Astyanax: Environment, distribution, and evolution.Special publications the museum Texas Tech University</a>. (12), Texas Tech Press. Texas. (1977).</li>
<li>Wilkens, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+and+genetics+of+epigean+and+cave+Astyanax-fasciatus+%28Characidae%2C+Pisces%29+-+Support+for+the+neutral+mutation+theory%5BTitle%5D)+AND+%22Evolutionary+Biology%22%5BJournal%5D)">Evolution and genetics of epigean and cave Astyanax-fasciatus (Characidae, Pisces) - Support for the neutral mutation theory.</a> Evolutionary Biology. 23, 271-367 (1988).</li>
<li>Fumey, J., Hinaux, H., Noirot, C., Thermes, C., Rétaux, S., Casane, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+late+Pleistocene+origin+of+Astyanax+mexicanus+cavefish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Evolutionary+Biology%22%5BJournal%5D)">Evidence for late Pleistocene origin of Astyanax mexicanus cavefish.</a> BMC Evolutionary Biology. 18 (1), 1-19 (2018).</li>
<li>Yoshizawa, M., Gorički, S., Soares, D., Jeffery, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+a+behavioral+shift+mediated+by+superficial+neuromasts+helps+cavefish+find+food+in+darkness%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Evolution of a behavioral shift mediated by superficial neuromasts helps cavefish find food in darkness.</a> Current Biology. 20 (18), 1631-1636 (2010).</li>
<li>Moran, D., Softley, R., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eyeless+Mexican+cavefish+save+energy+by+eliminating+the+circadian+rhythm+in+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Eyeless Mexican cavefish save energy by eliminating the circadian rhythm in metabolism.</a> PloS One. 9 (9), e107877(2014).</li>
<li>Moran, D., Softley, R., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+energetic+cost+of+vision+and+the+evolution+of+eyeless+Mexican+cavefish%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">The energetic cost of vision and the evolution of eyeless Mexican cavefish.</a> Science Advances. 1 (8), e1500363(2015).</li>
<li>Yoshizawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Evolution+of+a+Series+of+Behavioral+Traits+is+associated+with+Autism-Risk+Genes+in+Cavefish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Evolutionary+Biology%22%5BJournal%5D)">The Evolution of a Series of Behavioral Traits is associated with Autism-Risk Genes in Cavefish.</a> BMC Evolutionary Biology. 18 (1), 89(2018).</li>
<li>Riddle, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+resistance+in+cavefish+as+an+adaptation+to+a+nutrient-limited+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Insulin resistance in cavefish as an adaptation to a nutrient-limited environment.</a> Nature. 555 (7698), 647-651 (2018).</li>
<li>Protas, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+analysis+of+cavefish+reveals+molecular+convergence+in+the+evolution+of+albinism%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic analysis of cavefish reveals molecular convergence in the evolution of albinism.</a> Nature Genetics. 38 (1), 107-111 (2006).</li>
<li>Yoshizawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+genetic+architecture+underlies+the+emergence+of+sleep+loss+and+prey-seeking+behavior+in+the+Mexican+cavefish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biology%22%5BJournal%5D)">Distinct genetic architecture underlies the emergence of sleep loss and prey-seeking behavior in the Mexican cavefish.</a> BMC Biology. 13 (1), 15(2015).</li>
<li>Duboué, E. R., Keene, A. C., Borowsky, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolutionary+convergence+on+sleep+loss+in+cavefish+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Evolutionary convergence on sleep loss in cavefish populations.</a> Current Biology. 21 (8), 671-676 (2011).</li>
<li>Fernandes, V. F. L., Macaspac, C., Lu, L., Yoshizawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+the+developmental+plasticity+and+a+coupling+between+left+mechanosensory+neuromasts+and+an+adaptive+foraging+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Evolution of the developmental plasticity and a coupling between left mechanosensory neuromasts and an adaptive foraging behavior.</a> Developmental Biology. 441 (2), 262-271 (2018).</li>
<li>Pérez-Escudero, A., Vicente-Page, J., Hinz, R. C., Arganda, S., de Polavieja, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((idTracker%3A+tracking+individuals+in+a+group+by+automatic+identification+of+unmarked+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">idTracker: tracking individuals in a group by automatic identification of unmarked animals.</a> Nature Methods. 11, 743(2014).</li>
<li>Branson, K., Robie, A. A., Bender, J., Perona, P., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+ethomics+in+large+groups+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">High-throughput ethomics in large groups of Drosophila.</a> Nature Methods. 6 (6), 451-457 (2009).</li>
<li>Yoshizawa, M., Jeffery, W. R., Van Netten, S. M., McHenry, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sensitivity+of+lateral+line+receptors+and+their+role+in+the+behavior+of+Mexican+blind+cavefish+%28Astyanax+mexicanus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The sensitivity of lateral line receptors and their role in the behavior of Mexican blind cavefish (Astyanax mexicanus).</a> Journal of Experimental Biology. 217 (6), (2014).</li>
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<li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+Image+to+ImageJ%3A+25+years+of+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li>
<li>Cavallari, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+blind+circadian+clock+in+cavefish+reveals+that+opsins+mediate+peripheral+clock+photoreception%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biology%22%5BJournal%5D)">A blind circadian clock in cavefish reveals that opsins mediate peripheral clock photoreception.</a> PLoS Biology. 9 (9), e1001142(2011).</li>
<li>Swimmer, B., Lang, H. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSwimmer%2C+B+%22Surface+Wave+Discrimination+between+Prey+and+Nonprey+by+the+Back+Swimmer+Notonecta+glauca+L.+%28Hemiptera+%2C+Heteroptera+%29%22">Surface Wave Discrimination between Prey and Nonprey by the Back Swimmer Notonecta glauca L. (Hemiptera , Heteroptera )</a>. 6 (3), Springer Stable. https://www.jstor.org/stable/4599284 233-246 (1980).</li>
<li>Montgomery, J. C., Macdonald, J. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMontgomery%2C+JC+%22Sensory+Tuning+of+Lateral+Line+Receptors+in+Antarctic+Fish+to+the+Movements+of+Planktonic+Prey%22">Sensory Tuning of Lateral Line Receptors in Antarctic Fish to the Movements of Planktonic Prey</a>. 235 (4785), American Association for the Advancement of Science Stable. https://www.jstor.org/stable/1698962 195-196 (1987).</li>
<li>Prober, D. A., Rihel, J., Onah, A. A., Sung, R. J., Schier, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypocretin%2Forexin+overexpression+induces+an+insomnia-like+phenotype+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Hypocretin/orexin overexpression induces an insomnia-like phenotype in zebrafish.</a> The Journal of Neuroscience. 26 (51), 13400-13410 (2006).</li>
<li>Zhdanova, I. V., Wang, S. Y., Leclair, O. U., Danilova, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melatonin+promotes+sleep-like+state+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Melatonin promotes sleep-like state in zebrafish.</a> Brain Research. 903 (1-2), 263-268 (2001).</li>
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</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Diese vorgestellten Methoden sind leicht zu erreichende aber können kompliziert sein, aufgrund der Beschaffenheit des Landstrichs Freeware durchführen. Daher ist es dringend empfohlen, Test Tests und Analysen vor jeder tatsächlichen Experimente durchführen.
Die Rate der Datengenerierung kann schnell sein, sobald der experimentelle und analytischen Rahmen geschaffen. Einmal etabliert, ist es möglich, aufzeichnen zwei Fische in 7 min zum VAB Test, 30 Fische in 24 h für die Aktivität/Schlaf-Assay...

Die mexikanische Tetra, Astyanax Mexicanus (Teleostei: Characidae), ist einzigartig unter den Fischen mit zwei radikal verschiedene alternative Morphen - sehende, Oberfläche-Wohnung Morph und eine blinde, höhlenbewohnenden Morph, bestehend aus mehreren unterschiedlichen Populationen1. Obwohl verschiedene in der Morphologie und Physiologie, sind sie noch interfertile2,3. Diese interfertile Morphs scheinen schnell (~ 20.000 Jahre)4, wodurch sie ein ideales Modellsystem für das Studium der rasche Anpassung entwickelt haben. Cavefish sind bekannt für eine Reihe von unterschiedlichen morphologischen und Verhaltensstörungen Eigenschaften einschließlich erhöhte Dichte der Geschmacksnerven, erhöhte Anzahl von Mechanosensors, Futtersuche Verhalten auf einer bestimmten Frequenz eines vibrierenden Stimulus, Hyperaktivität, abgestimmt und Schlaflosigkeit. Viele dieser Verhaltensweisen entwickelt, wahrscheinlich gleichzeitig, von denen einige vorgeschlagen wurden, als vorteilhaft in der Dunkelheit von Höhlen für die Nahrungssuche5 und Energiesparen in dunklen und Essen spärlich Umgebungen6,7.
In vielen evolutionären Modellsystemen ist es schwierig, integrierte wissen auf wie tierischer Morphologie und Verhalten ändern in Reaktion auf die Umwelt zu erwerben, da die meisten Arten in einem kontinuierlichen Verlauf in komplexen Umgebungen verteilt sind. Jedoch führte der starke Kontrast zwischen der Höhle und Oberfläche Morph Astyanax , die entwickelt in kontrastreichen Umgebungen abgegrenzt durch eine scharfe Ökoton Astyanax auftauchen als ein hervorragendes Modell zur tierischen Evolution zu verstehen. Dies macht es möglich, leichter Gene und Entwicklungsprozesse mit adaptiven Eigenschaften und Auswahl in der Umgebung zu verbinden. Darüber hinaus neue biomedizinische Untersuchungen dieser Merkmale in Astyanax hat gezeigt, dass diese Züge menschlichen Symptome8,9,10parallele können. Z. B. sind Verlust von Sozialität und Schlaf und Gewinn von Hyperaktivität, repetitive Verhaltensweisen und Cortisolspiegel ähnlich, was bei Menschen mit Autismus Spektrum Störung8beobachtet wird.
Um komplexe Ko-Evolution von vielen Verhaltensweisen und morphologischen Merkmale zu begegnen, ist es vorteilhaft, viele von ihnen zugrunde liegenden genetischen und molekularen Wege markieren assay. Hier werden Methoden zur Charakterisierung des Grades der Höhle-Typ Verhaltens Phänotypen von Oberfläche, Höhle und Hybrid Morphs von Astyanax. Die fokalen Verhaltensweisen analysiert, um Phänotyp zu charakterisieren sind Höhle angepasst Futtersuche Verhalten (Attraktion Schwingungsverhalten, fortan als VAB bezeichnet) und Hyperaktivität/Schlaf Dauer11,12. Auch präsentiert, ist ein bildgebendes Verfahren für das sensorische System VAB13zugeordnet. Vor kurzem, sind viele OpenSource-Tracking-Software für die Ausführung von Verhaltensstörungen Assays zur Verfügung14,15geworden. Diese arbeiten sehr gut für kurze Videos, weniger als 10 Minuten lang. Allerdings wird es problematisch, wenn das Video wegen intensiver Berechnung/Tracking Zeit länger ist. In der Lage, kommerziell verfügbare Software kann teuer werden. Vorgestellten Methoden verwenden hauptsächlich Freeware und daher gelten als kostengünstige und Hochdurchsatz-Methoden. Repräsentative Ergebnisse basieren sich auf diese Methoden ebenfalls enthalten.

<table><tbody><tr><td>4-Di-1-ASP (4-(4-(dimethylaminostyrol)-1-methylpyridiniumiodid)</td><td>MilliporeSigma</td><td>D3418</td><td></td></tr><tr><td>880 nm Wellenlänge Schwarzlicht</td><td>Advanced Illumination</td><td>BL41192-880</td><td></td></tr><tr><td>avfs Freeware</td><td></td><td>Version 1.0.0.6</td><td>http://turtlewar.org/avfs/</td></tr> <tr><td>Avisynth</td><td>Freeware</td><td>Version 2.6.0</td><td>http://avisynth.nl/index.php/Main_Page</td></tr><tr><td>Cygwin</td><td>Freeware</td><td>Version 2.11.0</td><td>https://www.cygwin.com/</td></tr> <tr><td>Zylindrische Assay-Kammer (Pyrex 325 ml Glasschale)</td><td>Corning</td><td>3140-100</td><td>10 cm Durchmesser 5 cm hoch</td></tr><tr><td>Ethovision XT</td><td>Noldus Informationen&nbsp; Technology, Wageningen, Niederlande</td><td>Version 14</td><td>https://www.noldus.com/animal-behavior-research/products/ethovision-xt</td></tr><tr><td>Fisch Aquarium Zylinder Weicher Schwamm Stein Wasserfilter, schwarz</td><td>Jardin (durch Amazon.com)</td><td>NA</td><td>Schwamm Filter für Schlaf-/Hyperaktivitätsaufzeichnungssystem</td></tr><tr><td>Grade A Saline Garnelen Eier</td><td>Saline Garnelen direkt</td><td>BSEA16Z</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>Freeware</td><td>Version 1.52e</td><td>https://imagej.nih.gov/ij/</td></tr> <tr><td>Makro 1.8/12.5-75mm C-Mount Zoomobjektiv</td><td>Toyo</td><td>NA</td><td>Befestigung an USB-Webcam mit C-Mount, das im 3-D-Drucker gedruckt wird</td></tr><tr><td>Neutralregler</td><td>Seachem</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Optischer IR-Langpassfilter aus gegossenem Kunststoff</td><td>Edmund-Optik</td><td>43-948</td><td>In ein kleines Stück geschnitten, um in den CCD der USB-Webcam</td></tr><tr><td>zu passen pfmap</td><td>Freeware</td><td>Build 178</td><td>http://pismotec.com/download/ (bei " Download Archiv" Link am Ende)</td></tr><tr><td>Reef Crystals Reef Salt</td><td>Instant Ocean</td><td>RC15-10</td><td></td></tr><tr><td>SwisTrack</td><td>Freeware</td><td>Version 4</td><td>https://en.wikibooks.org/wiki/SwisTrack</td></tr><tr><td>USB Webcam (LifeCam Studio 1080p HD Webcam)</td><td>Microsoft</td><td>Q2F-00013</td><td>2-2,5 cm der Front abschneiden</td></tr><tr><td>WinAutomation</td><td>Freeware</td><td>Version 8</td><td>https://www.winautomation.com/ (kostenlos stand-alone App für dieses Verfahren)</td></tr><tr><td>Windows Betriebssystem</td><td>Microsoft</td><td>7, 8 oder 10</td><td>https://www.microsoft.com/en-us/windows</td></tr><tr><td>x264vfw</td><td>Freeware</td><td>NA</td><td>https://sourceforge.net/projects/x264vfw/</td></tr></tbody></table>

verhaltens-tracking und neuromast darstellung der mexikanischen cavefish

Behavioral Tracking and Neuromast Imaging of Mexican Cavefish

Höhlenbewohnenden Tiere haben eine Reihe von morphologischen und verhaltensbezogene Merkmale Anpassung an ihre Umgebung ständig dunkel und Essen spärlich entwickelt. Unter diesen Eigenschaften ist Futtersuche Verhalten eines nützlichen Windows in funktionalen Vorteilen der behavioral Merkmal Evolution. Aktualisierte Methoden für die Analyse von Attraktion Schwingungsverhalten sind hierin dargestellt (VAB: eine adaptive Futtersuche Verhalten) und der damit verbundenen Mechanosensors der Höhle angepasst Tetra imaging Astyanax Mexicanus. Darüber hinaus werden Methoden für Hochdurchsatz-Tracking von einer Reihe von zusätzlichen Cavefish Verhaltensweisen wie Hyperaktivität und Schlafverlust vorgestellt. Cavefish zeigen auch Asozialität, repetitive Verhaltensweisen und höhere Angst. Cavefish dienen daher als Tiermodell für weiterentwickelte Verhaltensweisen. Diese Methoden nutzen freier Software und kundenspezifische Skripte, die auf andere Arten von Verhalten angewendet werden können. Diese Methoden bieten praktische und kostengünstige Alternativen zu den im Handel erhältlichen Tracking-Software.

Die hier vorgestellten Ergebnisse sind repräsentative Beispiele der was mit den vorgestellten Methoden erworben werden können. Ergebnisse können daher leicht von den hier vorgestellten für Cavefish und Oberfläche Fisch abhängig von den experimentellen Bedingungen abweichen.
Schwingungsverhalten Attraktion
Repräsentative Ergebnisse für VAB finden Sie in...

Hier präsentieren wir Methoden für Hochdurchsatz-Studie eine Reihe von mexikanischen Cavefish, Verhaltensweisen und lebenswichtigen Färbung eines Mechanosensory-Systems. Diese Methoden nutzen freier Software und kundenspezifische Skripte, bietet eine praktische und kostengünstige Methode für das Studium des Verhaltens.

Verhaltens-Tracking und Neuromast Darstellung der mexikanischen Cavefish

Cave-dwelling animals have evolved a series of morphological and behavioral traits to adapt to their perpetually dark and food-sparse environments. Among ...

Cavefish wird als fantastisches Tiergemälde aufgezogen, um Evolution und biomedizinische Prozesse zu verstehen. Wir führen jetzt biomedizinische Untersuchungen durch, indem wir diese Eigenschaft als Parallele zu menschlichen Symptomen verwenden. Hier zeigen wir die Batterie des Verhaltens-Assays und des Analysesystems, das sowohl für evolutionäre als auch für biomedizinische Studien verwendet werden kann.Um Vibrationen anzulocken und zu verhalten, wird eine vibrierende Glasstange in eine Glasschüssel mit einem Fisch im Dunkeln eingeführt. Fische werden vier Tage vor dem Test in konditioniertem Wasser mit einem 12, 12 hellen, dunklen Zyklus akklimatisiert. Am Tag vor dem Tag des Testes nach drei Tagen der Akklimatisierung, ersetzen Sie Wasser in der Assaykammer mit frischem konditioniertem Wasser.Am Tag des Testes werden den Fischen bis nach Abschluss des Assays Nahrung vorenthalten, da die Einstellung ihre Reaktion auf Vibrationen verändern wird. Bereiten Sie Schwingungs-Emitting-Geräte vor, indem Sie auf 40 Hertz abstimmen. Legen Sie die richtigen Aufzeichnungsparameter, Bestandsbedingungen und Zieldateien fest.Stellen Sie den Assayzylinder auf die Aufnahmebühne, beleuchtet mit In

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Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Wir beschreiben eine Reihe von Techniken für die Untersuchung spontane Verhalten frei schwimmend schwach-elektrischen Fischen über einen längeren Zeitraum durch synchrones Messen der elektrischen Organ Ausstoßzeitpunkt des Tieres, Körper Position und Stellung sowohl genau und zuverlässig in einem speziell konstruierten Aquariumbehälter in einem sensorischen Isolationskammer.

Langfristige Verhaltens Verfolgung von Frei Schwimmen Schwach elektrische Fische

In diesem Protokoll wir zeigen, wie Astyanax Mexicanus Erwachsene zu züchten, die Larven zu erhöhen, und ganze-Mount Immunohistochemistry auf Post-Larven Fische zu vergleichen die Phänotypen der Oberfläche und Höhle Morphotypen führen.

Anhebung der mexikanischen Tetra Astyanax Mexicanus für Analyse der Post-larval Phänotypen und vollständig-hängen Immunohistochemistry

Wir beschreiben Ansätze für die Manipulation von Genen im evolutionären Modellsystem Astyanax Mexicanus. Drei verschiedene Techniken beschrieben: Tol2-vermittelte Transgenese, gezielte Manipulation des Genoms mit CRISPR/Cas9 und Zuschlag des Ausdrucks mit Morpholinos. Diese Tools sollten die direkte Untersuchung von Genen zugrunde liegen die Unterschiede zwischen Oberfläche und höhlenbewohnenden Formen erleichtern.

Manipulation der Genfunktion in mexikanischen Cavefish

Dieses Protokoll ermöglicht die Visualisierung der Genexpression in embryonalen Astyanax Cavefish. Dieser Ansatz wurde mit dem Ziel der Maximierung der gen-Expression-Signal, bei gleichzeitiger Minimierung der unspezifischen Hintergrundfärbung entwickelt.

Wholemount In Situ Hybridisierung für Astyanax Embryonen

Dieses Protokoll beschreibt die Methodik zur Quantifizierung der Bewegungsorgane Verhalten und Schlaf in der mexikanischen Cavefish. Frühere Analysen werden erweitert, um diese Verhaltensweisen in sozial untergebracht Fisch zu messen. Dieses System kann weit angewendet werden, um Schlaf und Aktivität in anderen Fischarten zu studieren.

Automatisierte Messungen des Schlafes und Bewegungsorgane Aktivität im mexikanischen Cavefish

Die In-vitro-Fertilisation ist eine häufig verwendete Technik mit einer Vielzahl von Modellorganismen, um Laborpopulationen zu erhalten und synchronisierte Embryonen für nachgelagerte Anwendungen zu produzieren. Hier präsentieren wir ein Protokoll, das diese Technik für verschiedene Populationen des mexikanischen Tetrafisches Astyanax mexicanusumsetzt.

Gamete Collection und In-Vitro-Fertilisation von Astyanax mexicanus

Dieser Artikel beschreibt die grundlegenden Laborbedingungen und Protokolle für ein inkrementelles Temperaturregime zur Stimulierung des maximalen Laichens beim mexikanischen Salmler Astyanax mexicanus, einem aufstrebenden Modell für Entwicklungs- und Evolutionsstudien.

Inkrementelle Temperaturänderungen für maximale Brut und Laichzeit bei Astyanax mexicanus

Längerer und umfassende Überwachung der Mäuse in einem Heim-Käfig-Umgebung bietet ein tieferes Verständnis für abweichendes Verhalten in Mausmodellen der Erkrankungen des Gehirns. Dieses Papier beschreibt die Integrated Behavioral Station (INBEST) als wesentlicher Bestandteil der modernen Verhaltensanalyse.

Behavioral Phänotypisierung von murinen Krankheitsmodelle mit dem Integrated Behavioral Station (INBEST)

Dieses Protokoll soll es Forschern ermöglichen, Experimente durchzuführen, die darauf ausgelegt sind, diese Aspekte der Sucht mit Hilfe der konditionierten Ortspräferenz und der Sensibilisierung des Bewegungsapparates zu testen.

Bewertung der Kokain-induzierte Behavioral Sensibilisierung und konditionierten Platzpräferenz bei Mäusen

Eine Ratte Version des menschlichen Psychomotorik Vigilance Test (PVT) beschrieben, die mit dem menschlichen PVT gemessen Aspekte der Aufmerksamkeit ähnlich denen Maßnahmen, einschließlich der Aspekte der menschlichen Wachsamkeit wie Leistungsgenauigkeit, Motordrehzahl, vorzeitige reagiert und Verfehlungen in der Aufmerksamkeit.

Das Nagetier Psychomotorik Vigilance Test (rPVT): Eine Methode zur Beurteilung der Neuropsychologische Leistung bei Ratten und Mäusen

Erfahren Sie hochdurchsatzfähige Verhaltensanalysen und Neuromast-Färbung bei mexikanischen Höhlenfischen für evolutionäre und biomedizinische Forschung. Diese kostengünstige Methode nutzt freie Software zur Untersuchung sensorischer Reaktionen.

Verhaltens-Tracking und Neuromast Darstellung der mexikanischen Cavefish

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