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DOI: 10.3791/59119-v
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Hier präsentieren wir Ihnen zwei Protokolle, Kartoffelpflanzen zu verwandeln. Die Agrobacterium Tumefaciens Transformation führt zu einer kompletten transgenen Pflanze Agrobacterium Rhizogenes transgenen behaarte Wurzeln in einem Wildtyp-Shooting produziert, die selbst propagiert werden kann. Wir erkennen dann Promotoraktivität von GUS Färbung in den transformierten Wurzeln.
Die agrobacterium-vermittelte Transformation ist eine einfache Methode zur Herstellung gentechnisch veränderter Kartoffelpflanzen. Um bestimmte Genfunktionen und ihren Beitrag zur Organphysiologie zu verstehen. Die Transformation durch Agrobacterium rhizogenes ist ein robustes Werkzeug zur schnellen Beurteilung der Genfunktionswurzeln, da ähnliche Ergebnisse durch Agrobacterium tumefaciens Transformation erzielt werden können.
Demonstriert wird dieses Verfahren von Sandra Fernandez-Pinan, einer Post-Doc, und Jennifer Lopez, einer Studentin von maste5r aus unserem Labor. Beginnen Sie mit dem Anbau einer einzigen Agrobacterium-Kolonie über Nacht in fünf Milliliter Hefe-Extrakt-Brühe, oder YEB-Medium, ergänzt mit Antibiotika in einem 50 Milliliter Zentrifugenrohr bei 28 Grad Celsius, bei 200 Rotationen pro Minute. Für die A-tumefaciens-Transformation, messen Sie die optische Dichte am nächsten Morgen.
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