Eine Labormethode zur Messung des ansteckenden Gähnens bei Ratten

Unser Protokoll ist wichtig, weil es eine einfache Möglichkeit bietet zu untersuchen, welche Sinne an ansteckendem Gähnen bei Ratten beteiligt sein können. Die Verwendung eines nicht-invasiven Verfahrens und die Verfügbarkeit der Applikationssoftware, die die Berechnung zur Messung ansteckenden Gähnens beschleunigt, sind die Hauptvorteile dieser Technik. Personen, die diese Technik noch nie durchgeführt haben, sollten bei der Implementierung keine größeren Schwierigkeiten haben, vorausgesetzt, sie folgen methodisch jedem Schritt und suchen bei der Erstellung des Beobachtungsfalls professionelle Beratung.

Die visuelle Demonstration dieser Methode hilft beim Verständnis der räumlichen Anordnung der Beobachtungskäfige während des Experiments. Helfen, Fehler bei der Bezeichnung der Behandlungen zu vermeiden. Das wird Evelyn Beristain-Castillo demonstrieren, ein Postdoc aus meinem Labor.

Um eine Testsitzung einzurichten, transferieren Sie vier Ratten in einzelnen Käfigen in den Beobachtungsraum. Während sich die Tiere akklimatisieren, legen Sie einen invertierten T-förmigen Tisch auf einen größeren rechteckigen Tisch unter einer Deckenlampe, die den Raum ausreichend beleuchtet. Legen Sie Filterpapier auf die Unterseite jedes Beobachtungskäfigs, und legen Sie die Käfige paarweise auf jeder Seite des invertierten T-förmigen Tisches.

Positionieren Sie einen Teiler zwischen jedem Käfigpaar, und platzieren Sie strategisch zwei digitale Camcorder, sodass jeder das Gähnverhalten jedes Rattenpaares aufzeichnet. Nachdem Sie bestätigt haben, dass die Camcorder sicher an Stativen befestigt und korrekt an den Beobachtungskäfigen ausgerichtet sind, verbinden Sie die Camcorder mit einem Desktop-Computer, um gleichzeitig das Verhalten der Ratten zu überwachen. Wenn sich die Tiere 15 Minuten lang geimpft haben, legen Sie sie gemäß der zuvor festgelegten Zuordnung in die Beobachtungskäfige und setzen Sie den automatischen Fokus auf jeden Camcorder.

Starten Sie die Videoaufzeichnung und eine Stoppuhr gleichzeitig, wodurch die Videoaufzeichnung am Ende des 60-minütigen Beobachtungszeitraums beendet wird. Wenn die Beobachtung vorbei ist, bringen Sie die Ratten in ihre Heimischen Käfige in der Tiereinrichtung mit Zugang zu Nahrung und Wasser zurück. Reinigen Sie dann die Beobachtungskäfige gründlich mit einem ungiftigen Reinigungsmittel, bevor Sie den Versuchsaufbau vorbereiten, um die nachfolgenden Testsitzungen für den Tag durchzuführen.

Spielen Sie nach der letzten Sitzung jedes Video auf einem Computerbildschirm mit einem beliebigen Standardwiedergabesystem für einen Beobachter wieder. Lassen Sie den Betrachter jedes Video zuerst ansehen, um das Gähnverhalten einmal bei normaler Geschwindigkeit auf Datenblättern zu beobachten und aufzuzeichnen, gefolgt von zusätzlichen Betrachtungen mit langsameren Geschwindigkeiten, um das Gähnen zu erleichtern und zu messen. Um das Gähnen zu erzielen, verwenden Sie vertikale Linien, um das Vorkommen eines Gähnens mit der Minute darzustellen, die als Hochanzeige geschrieben ist.

Wenn alle Gähnen gewertet wurden, transkribieren Sie die zeitliche Abfolge von Gähnen in jeder Ratte in eine Tabelle. Wenn das Gähnen bis zur nächsten Minute aufgezeichnet wurde, geben Sie die Anzahl der Gähnen in jeder relevanten Minute ein und verwenden Sie Null, um die Zellen auszufüllen, wenn in einer bestimmten Minute kein Gähnen aufgetreten ist. Speichern Sie dann das Arbeitsblatt als Textdatei.

Wenn das Gähnen auf die nächste Dezimalzahl einer Minute aufgezeichnet wurde, geben Sie die Sequenz oben nach unten ein. Verwenden Sie NA, um die leeren Leerzeichen der Rattenspalten auszufüllen, in denen die Anzahl der Gähnen in den Zeilen niedriger ist als die der Spalte. Mit der maximalen Anzahl von Reihen von Gähnen für eine Ratte aufgezeichnet.

Speichern Sie dann das Arbeitsblatt als Textdatei. Wenn alle Daten eingegeben wurden, importieren Sie die Textdatei in R.Speichern Sie die Programmcodes mit dem Erweiterungscode R und laden Sie den spezifischen Programmcode herunter, je nachdem, ob die Gähnen als ganze Zahlen oder Bruchzahlen aufgezeichnet wurden. Führen Sie dann das Programm für jedes Rattenpaar und die gewünschte Anzahl von Zeitrahmen aus.

Führen Sie das Programm am Ende des Laufs erneut mit einer zufälligen Verteilung der Anzahl der Gähnen von jeder Ratte aus. Um Gähnungskurven zu erstellen, verwenden Sie die zuvor in der Kalkulationstabelle gespeicherten Daten, um die Nichtansteckungsraten von den Ansteckungsraten für jedes Rattenpaar, das Zeitfenster und die Testsituation zu subtrahieren und die Analysen der beobachteten Daten und künstlichen Daten zu trennen. In diesem repräsentativen Experiment wurde die Gähnenansteckung zwischen unbekannten männlichen Ratten über einen Bereich von Zeitfenstern gemessen, die zwischen einer und zehn Minuten variierten.

Diese Gähnen-Ansteckungskurven deuten darauf hin, dass nur die olfaktorische Kommunikation zwischen Ratten in Käfigen mit einem perforierten opaken Teiler eine Gähnansteckung zeigte. Was sich aus dem Zeitfenster vier und weiter ergibt, da sich das Konfidenzintervall der Durchschnittswerte nicht mit dem Konfidenzintervall der zufällig zugewiesenen Anzahl von Gähnen über den 60-Minuten-Zeitraum überschneidet. Das Band gab erwartungsgemäß an, dass eine zufällige Zuordnung der Anzahl der Gähnen in jeder Ratte im Beobachtungszeitraum Gähnraten erzeugte, die bei etwa Null oszillierten, ohne ein scheinbares Muster zu zeigen.

In diesem repräsentativen Experiment mit vertrauten männlichen Ratten stimulierte keine der vier Testsituationen die Gähnansteckung, da sich ihre Konfidenzintervalle mit dem zufällig generierten Konfidenzintervallband überschnitten. Darüber hinaus gab es keine Unterschiede zwischen den vier Testsituationen, obwohl die allgemeine Zunahme der Gähnansteckung über die 10 Zeitfenster anders als eine Nullneigung. Denken Sie daran, die vertrauten und unbekannten Identitäten der Ratten zu verfolgen, um die Ergebnisse richtig zu interpretieren, und die Beobachtungskäfige zwischen den Experimenten zu reinigen.

Ein pharmakologisches Verfahren kann verwendet werden, um die auditive Kommunikation zu blockieren und die Höreffekte auf ansteckendes Gähnen vollständig von den Auswirkungen der anderen Sinne zu trennen. Diese Technik hat den Weg für den Vergleich ansteckendes Gähnen über die Arten sowohl in Bezug auf die Sinne beteiligt, und die Stärke der Reaktion durch den Vergleich der ansteckenden gähnenden Kurven geebnet. Denken Sie daran, die Beobachtungskäfige sorgfältig zu behandeln, da sie versehentlich brechen und Verletzungen verursachen können.