Verwendung von einzelnen Molekül Fluoreszenz In Situ Hybridisierung (SM-Fisch), Quantify und Localize mRNAs in murinen Eizellen

Diese Technik ermöglicht nicht nur die Lokalisierung, sondern auch die Quantifizierung von Kandidaten-mRNAs in den einzelnen Eizellen und Embryonen. Im Vergleich zu anderen Assays, einschließlich PCR, führt die Vervollständigung der Technik zu reproduzierbaren Daten mit geringer Variation. Demonstriert wird das Verfahren von Kelsey Timme, einem Doktoranden in meinem Labor.

Beginnen Sie dieses Verfahren mit der Vorbereitung des benötigten Materials und weiblicher Mäuse im Alter von fünf bis acht Wochen, wie im Textprotokoll beschrieben. Reinigen Sie die Maus mit 70% Ethanol. Setzen Sie die Bauchhöhle aus und visualisieren Sie den weiblichen Fortpflanzungstrakt.