Induktion des rechtsventrikulären Versagens durch Lungenarterienverengung und Bewertung der rechten ventrikulären Funktion bei Mäusen

Diese Methode bietet eine nützliche Technik zum Studium der Mechanismen des rechtsventrikulären Versagens. Die Hauptvorteile dieser Technik sind Zeitersparnis und die Steigerung der Erfolgsquote bei Operationen. Diese Technik kann uns helfen, rechte Herzhypertrophie und Versagen beim Menschen durch Verengung der Lungenarterie zu imitieren, um eine pulmonate Drucküberlastung zu erzeugen.

Diese Methode kann auf die transversale Aortenverengungstechnik angewendet werden und kann Einblicke in Komplikationen nach Herztransplantationen und angeborene Herzkrankheitsstudien geben. Das Verfahren wird von Xiaoxia Huang, einer Technikerin aus meinem Labor, demonstriert. Bevor Sie mit dem Eingriff beginnen, geben Sie ein Stück 6-0 geflochtene Seidennaht durch eine 25 Gauge Nadel aus einer Ein-Milliliter-Spritze zerlegt.

Verwenden Sie hämostatische Zangen, um die Nadel um 90 Grad zu biegen. Biegen Sie dann eine 22 Gauge Nadel 120 Grad. Nachdem Sie einen Mangel an Reaktion auf Zehenkneifen bestätigt haben, legen Sie eine anästhesierte Maus in die Rückenlage auf einem 37 Grad Celsius Heizkissen und sichern Sie die Schneidezähne mit einer Naht.

Fixieren Sie die Gliedmaßen mit Klebeband, und verwenden Sie Enthaarungscreme, um das Haar vom Hals bis zum xiphoiden Prozess zu entfernen. Desinfizieren Sie die exponierte Haut mit sequenziellen Jod- und 75%Ethanol-Tüchern und verwenden Sie eine spitzen Zange, um die Zunge leicht zu extrahieren. Elevate den Unterkiefer mit einem maßgeschneiderten Spachtel, um die Glottis zu belichten, und verwenden Sie eine kalte Lichtquelle, um das sorgfältige Einsetzen einer maßgeschneiderten Luftröhre durch die Glottis zu lenken.

Stellen Sie die Mini-Lüfterparameter ein und stellen Sie die Atemfrequenz auf 150 Atemzüge pro Minute und ein Gezeitenvolumen von 300 Mikrolitern ein. Schließen Sie dann das Rohr und das Beatmungsgerät an, um zu bestätigen, dass die Kanüle korrekt eingesetzt wurde, bevor Sie die Kanüle mit Klebeband fixieren. Um die Brust zu öffnen, machen Sie einen ca. 10 Millimeter Hautschnitt parallel zur zweiten Rippe.

Verwenden Sie Schere und Ellenbogen Pinzette, um die pectoralis Haupt- und Nebenmuskeln über dem zweiten interkostalen Raum zu trennen. Zählen Sie die Rippen aus dem Sternwinkel, um den zweiten interkostalen Raum zu identifizieren, und verwenden Sie eine Schere, um diesen Raum zu öffnen. Dann trennen Sie das Parenchym und den Thymus unverblümt, bis der Lungenstamm sichtbar ist.

Um die Lungenarterie zu verengen, verwenden Sie die Ellenbogen-Pinzette, um den Lungenstamm und die aufsteigende Aorta unverblümt zu trennen. Verwenden Sie die 90-Grad-Riegelnadel, um die Naht durch das Bindegewebe zwischen dem Lungenstamm und der aufsteigenden Aorta zu passieren. Legen Sie die 120-Grad-Polsternadel auf den Lungenstamm.

Verwenden Sie die 6-0 geflochtene Seidennaht, um die Polsternadel an den Lungenstamm zu legen, und entfernen Sie die Polsternadel unmittelbar nach dem Füllen des Lungenkonus. Schneiden Sie beide Enden der Nähte und beobachten Sie weiterhin die Füllung des Lungenkonus, um zu beurteilen, ob eine Verengung vorhanden ist. Dann bewerten Sie den Pedalreflex des Tieres erneut, um den Erfolg der Ligation zu gewährleisten und schließen Sie Brust und Haut mit einer 5-0 Nylon-Nähte.

Mindestens drei Tage nach der Operation, Ultraschall-Gel auf die Brust der Lungenarterie verengt Tier anwenden. Legen Sie eine 30-Megahertz-Sonde auf die Brust in einer 30-Grad-Gegenposition im Uhrzeigersinn relativ zur linken parasternalen Linie, während Sie die Kerbe in kaudaler Richtung ausrichten. Regulieren Sie die Y- und X-Achsen unter dem B-Modus, bis die Mitralklappe, Aorta und linke Ventrikelkammer deutlich sichtbar sind.

Drehen Sie die Sonde um 30 bis 40 Grad auf ihrer Y-Achse in Richtung Brust. Regulieren Sie die Y- und X-Achsen, bis der Lungenkonus deutlich sichtbar ist, und platzieren Sie den Cursor an der Spitze der Lungenventil-Blätter, um die Spitzenströmungsgeschwindigkeit zu messen. Wählen Sie Farbe und PW und platzieren Sie die gepulste Wellengestriche parallel zur Richtung des Blutflusses.

Stellen Sie die linke Seite des Pads so ein, dass sie höher als die rechte Seite ist, und halten Sie die Sonde 30 Grad am Horizont entlang der rechten inneren Achsellinie ausgerichtet, wobei die Kerbe in kaudaler Richtung gerichtet ist. Regulieren Sie die X- und Y-Achsen, bis der rechte Ventrikel deutlich sichtbar ist. Klicken Sie dann zweimal auf M-Modus, um die Indikatorlinie anzuzeigen.

Acht Wochen nach der Operation, intubieren Sie die Maus, wie gezeigt, und machen Sie einen 1,5 Zentimeter großen bilateralen Schnitt unterhalb des Xiphoid-Prozesses durch das Zwerchfell, um die Brusthöhle zu öffnen. Schneiden Sie durch die Rippen, um das Herz zu belichten, und verwenden Sie eine 23-Spur-Nadel, um die rechte ventrikelfreie Wand zu durchdringen. Drücken Sie die Punktionsstelle vorsichtig mit einem Wattestäbchen, um jegliche Blutungen zu stoppen, und verwenden Sie die Katheterspitze, um den Ventrikel durch die Wunde zu durchstechen.

Wenn die Kurve stabil ist, regulieren Sie die Spitze des Katheters in Richtung des rechten Ventrikelabflusstraktes. Klicken Sie auf Auswählen und Analysieren, um den systolischen Blutdruck und diastolischen Druck der rechten Herzkammer, die maximale Steigerungsrate, die exponentielle Entspannungskonstante und die Herzfrequenz für 10 Minuten aufzuzeichnen. Dann den Katheter vom Herzen in einen Behälter mit Herzlösung geben.

Im Vergleich zur Sham-Gruppe erhalten sich acht Wochen nach der Operation in der Pulmonaary Artery Constriction-Gruppe eine höhere Spitzengeschwindigkeit, ein größerer Druckgradient und eine größere rechte Ventrikelwanddicke aus der parasternalen Langachsenansicht. Darüber hinaus wird die systolische Funktion des rechten Ventrikels in der Pulmonalenarterien-Konstriktionsgruppe im Vergleich zur Sham-Gruppe acht Wochen nach der Operation signifikant reduziert. Die Pulmonary Artery Constriction Gruppe hat einen höheren rechten Ventrikeldruck in der Systole und Diastole, und der Kontraktilitätsindex wird im Vergleich zu dem der Sham-Gruppe reduziert.

Die rechte Ventrikel Tau und die maximale Rate des Anstiegs sind auch in der Pulmonary Artery Constriction Gruppe größer als in der Sham-Gruppe. Nachweis, dass rechte Ventrikeldysfunktion bei Mäusen nach acht Wochen Lungenarterienbanding induziert wird. Invasive hämodynamische Tests im rechten Ventrikel zeigen, dass die Herzfrequenz vor und nach der Katheterüberwachung stabil bleibt.

Im Vergleich zur Sham-Gruppe werden die rechten Ventrikelabmessungen deutlich vergrößert und das rechte Ventrikelgewicht ist höher. Darüber hinaus zeigt die histologische Untersuchung, dass die Herzfibrose in dem von Kardiomyozyten abgedeckten Bereich in der Gruppe der Pulmonalen arterienden Konstriktionen größer ist als in der Sham-Gruppe. Der wichtigste Teil des Verfahrens ist, dass die Lungenarterie richtig und vollständig getrennt wird.

Um eine falsche Trennung zu vermeiden, sollte sich der Trennpunkt in der Nähe des Asts der Lungenarterie nenen, wo das Bindegewebe zwischen den Arterien lockerer ist. Mit dieser Methode haben wir einen bequemeren und effizienteren Ansatz zur Induktion der rechtsventrikulären Hypertrophie bereitgestellt. Im Allgemeinen sind die chirurgischen Eingriffe und Bewertungsansätze sehr sicher.