Muster-Triggered Oxidative Burst und Seedling Growth Inhibition Assays in Arabidopsis thaliana

Diese Assays können verwendet werden, um Immunleistungen verschiedener Pflanzengenotypen zu bewerten und zu vergleichen. Der Hauptvorteil dieser Techniken ist, dass sie schnell, zuverlässig sind und gängige Laborgeräte verwenden. Für den Wachstumshemmungstest sollten Sämlinge gleicher Größe und Alter transplantiert und vor dem Wiegen vollständig ausgeschmiert werden, um die Variation zu begrenzen.

Nach vier bis fünf Wochen nach der Keimung, verwenden Sie einen scharfen Vier-Millimeter-Biopsie-Punch, um eine Blattscheibe pro Arabidopsis Pflanze zu entfernen, den Mittelvenen zu vermeiden und vorsichtig zu sein, die Verwundung zu begrenzen. Sammeln Sie die Scheiben in einzelne Brunnen einer ungenutzten 96-Well-Luminometer-Platte mit 100 Mikroliter doppeldestilliertem Wasser pro Brunnen, adaxiale Seite nach oben, um austrocknung zu verhindern. Wenn Sie mehrere Entferner bewerten, entfernen Sie für jede Elicitor-Behandlung eine zweite Blattscheibe aus demselben Blatt und bedecken Sie die Platte mit dem Deckel, damit sich die Blattscheiben über Nacht bei Raumtemperatur erholen können.