Beurteilung der zellulären Immunantwort der Fruchtfliege Drosophila Melanogaster, mit einem In-Vivo-Phagozytose-Assay

Dieser in vivo Phagozytose-Assay ermöglicht es Forschern, genetische Screens und genomweite Assoziationsstudien durchzuführen, um neuartige Gene zu identifizieren, die die Phagozytose in adulten Blutzellen regulieren. Dieses Experiment ist quantitativ, einfach durchzuführen und kann auf das Screening von lebenden Tieren auf Wirtsfaktoren angewendet werden, die die Erkennung, Aufnahme und Clearance von Krankheitserregern beeinflussen. Nach dem Ziehen dünnwandigen Glaskapillaren mit einem Nadelzieher, verwenden Sie ein Mikrometer, um die Nadel unter dem Mikroskop zu halten, und verwenden Sie Nummer fünf, Feinpunkt, Edelstahl Pinzette, um die Spitze auf einen 100-Mikrometer-Spitzendurchmesser zu brechen.

Um das Flüssigkeitsvolumen zu messen, das in jede Fliege injiziert wird, laden Sie eine Kapillarnadel mit steriler 5%Lebensmittelfärbung in PBS und vertreiben Sie die Flüssigkeit auf einen Tropfen Mineralöl auf einem 0,01-Millimeter-Mikrometer. 10 Mikroliter 1,6 Milligramm pro Milliliter Partikel auf ein kleines Quadrat Parafilm geben und die Flüssigkeit in die Nadel ziehen. Montieren Sie die Nadel in die Injektordüse und säumen Sie die anästhesierten Fliegen entlang ihres vorgesehenen Bereichs auf dem Fliegenpolster, ventrale Seite nach oben, mit den Köpfen, die nach vorne ausgerichtet sind.