Name: Bildung von Human Periodontal ligament Cell Spheroids auf Chitosan Filmen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-19T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 14 s
Description: Erfahren Sie die 3D-Kultivierung von humanen Periodontalligamentzell-Sphäroiden auf Chitosan-Filmen. Diese Methode verbessert die Selbsterneuerung und osteogene Differenzierung für regenerative Parodontaltherapien.

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Diese Studie wurde von der National Natural Science Foundation of China (NSFC 81700978), Fundamental Research Funds for the Central Universities (1504219050), Natural Science Foundation of Shanghai (17ZR1432800) und Dem Shanghai Medical Exploration Project ( 17411972600).

Das Studienprotokoll wurde von der Ethikkommission der Schule und des Krankenhauses für Stomatologie der Tongji University genehmigt. Alle Patienten erteilten ihre schriftliche Einwilligung in Kenntnis der Sachlage.
1. PDL-Zellisolierung
<ol><li>Herstellung eines Proliferationsmediums für die Kultur von PDL-Zellen: das Medium von 10% FCS und 100 U/ml Pen/Strep.</li>
	<li>Bereiten Sie einen Behälter mit Eis vor, um isolierte dritte Molaren zu übertragen.</li>
	<li>Sterilisieren Sie chirurgische Instrumente mit einem Autoklaven.</li>
	<li>Extrahieren Sie normale menschliche Auswirkungen dritten Molaren von Erwachsenen (18-28 Jahre alt) in der Zahnklinik der Schule und Krankenhaus der Stomatologie, Tongji Universität.</li>
	<li>Dritte Molaren in das Proliferationsmedium geben und bei 4 °C ins Labor geben.</li>
	<li>Legen Sie den extrahierten Zahn in eine sterile 100 mm Petrischale und arbeiten Sie in einer biohazard laminaren Durchflusshaube.</li>
	<li>Fügen Sie 10 ml PBS hinzu, um den extrahierten Zahn zu waschen. Wiederholen Sie den Waschschritt zweimal.</li>
	<li>Durch die Verwendung eines sterilen Skalpells trennen Sie die PDL vorsichtig von der Wurzel. HINWEIS: PDL sollte aus dem mittleren Drittel der Wurzel abgekratzt werden, um Kontaminationen durch Gingiva oder apikales Gewebe zu vermeiden.</li>
	<li>Zerkleinern Sie PDL in 1-2-mm-Fragmente mit Hilfe einer sterilisierten Skalpellklinge.</li>
	<li>Legen Sie PDL-Fragmente in einen T-25-Kulturkolben, gefüllt mit 3-4 ml Proliferationsmedium.</li>
	<li>Die Proben in einem Inkubator bei 37 °C in 5% CO2 mit befeuchteter Luft ansaugen.</li>
	<li>Ändern Sie das Kulturmedium, nachdem das Wachstum von PDL-Zellen beobachtet wurde. Es dauert in der Regel 1-2 Wochen für das Wachstum von PDL-Zellen. Beobachten Sie das Wachstum von PDL-Zellen über ein inverses Phasenkontrastmikroskop.</li>
	<li>Ändern Sie das Kulturmedium danach zweimal pro Woche.</li>
	<li>Wenn PDL-Zellen den Zusammenfluss erreicht haben, werden Subkulturzellen im Verhältnis 1:4 (Passage 1) erreicht.</li>
	<li>Beobachten Sie das Zellwachstum täglich und verändern Sie das Kulturmedium zweimal pro Woche.</li>
	<li>Führen Sie jede nachfolgende Passage im Verhältnis 1:4 durch, nachdem die Zellen 80% Zusammenfluss erreicht haben. Verwenden Sie PDL-Zellen der dritten bis fünften Generation für die Zellaussaat.</li>
</ol>2. Herstellung von Chitosan-Filmen
<ol><li>Zur Herstellung einer 1% (v/v) Essigsäurelösung 5 ml Essigsäure zu 495 ml doppeldestilliertem Wasser in einem sauberen Glasbecher hinzufügen.</li>
	<li>Zur Herstellung einer 1% w/v Chitosan-Lösung 5 g Chitosanpulver (durchschnittliches Molekulargewicht 400 kDa, 85% Acetylierungsgrad) wiegen und zu 495 ml 1% (v/v) Essigsäurelösung hinzufügen.</li>
	<li>Die vorbereitete Lösung 24 Stunden lang mit Rührstab und magnetischer Rührplatte bei 60 °C umrühren.</li>
	<li>Autoklav die vorbereitete Lösung, um die vollständige Auflösung von Chitosan zu gewährleisten. HINWEIS: Das Experiment kann in dieser Phase angehalten werden.</li>
	<li>Um Chitosan-Filme zu bilden, fügen Sie 1% w/v Chitosan-Lösung in Gewebekultur-Polystyrol (TCPS) Gerichte bei 0,25 mL/cm2. Zum Beispiel fügen Sie 0,5 ml von 1% w/v Chitosan-Lösung zu einem Brunnen von 24 -well Platte.</li>
	<li>TcpS-Gerichte im Ofen bei 60 °C 24 Stunden lang trocknen, um Chitosan-Filme zu bilden.</li>
	<li>0,5 N Natriumhydroxid (NaOH) zubereiten. 10 g NaOH, ein wenig nach dem anderen, mit dem magnetischen Rührstab in ein großes Volumen doppelt destillierten Wassers rühren und dann die Lösung verdünnen, um 0,5 L zu machen. HINWEIS: NaOH zu Wasser hinzufügen --nicht Wasser zu festem NaOH hinzufügen. Berühren Sie NaOH nicht! Es kann chemische Verbrennungen verursachen.</li>
	<li>Neutralisieren Sie Chitosan-Filme mit 0,5 N NaOH. Fügen Sie 0,5 ml 0,5 N NaOH Lösung zu einem Brunnen von 24-Well-Platte für 2 Stunden.</li>
	<li>Chitosan-Filme dreimal mit doppelt destilliertem Wasser waschen. HINWEIS: Das Experiment kann in dieser Phase angehalten werden.</li>
	<li>Vor der Zellaussaat die chitosanbeschichteten 24-Well-Platten in 70% Alkohol über Nacht bei Raumtemperatur sterilisieren.</li>
	<li>Spülen Sie Chitosan-beschichtete Platten dreimal mit PBS bei Raumtemperatur.</li>
	<li>Sterilisieren Sie Chitosan-beschichtete Platten durch Behandlung unter ultraviolettem Licht über Nacht bei Raumtemperatur.</li>
</ol>3. Zellaussaat
<ol><li>Vorwarme Proliferationsmedium PBS-Lösung und Trypsin/EDTA-Lösung bis 37 °C.</li>
	<li>Entsorgen Sie den Überstand aus dem T-75-Zellkulturkolben.</li>
	<li>Waschen Sie konfluente PDL-Zellen mit 10 ml PBS-Lösung.</li>
	<li>Verwerfen Sie die PBS-Lösung.</li>
	<li>Fügen Sie 1 ml Trypsin/EDTA-Lösung zum T-75-Zellkulturkolben hinzu.</li>
	<li>Inkubieren Sie Zellen mit Trypsin/EDTA-Lösung für 3 min bei 37 °C.</li>
	<li>Beenden Sie den Verdauungsprozess von Trypsin, indem Sie 3 ml Proliferationsmedium zu T-75 Zellkulturkolben hinzufügen.</li>
	<li>Übertragen Sie die vorbereitete Zellsuspension in ein 15 ml konisches Zentrifugenrohr.</li>
	<li>Zentrifugieren Sie die Suspension für 5 min bei 300 x g und Raumtemperatur.</li>
	<li>Entsorgen Sie den Überstand aus dem 15 ml konischen Zentrifugenrohr und hängen Sie das Zellpellet in 500 l Proliferationsmedium wieder auf.</li>
	<li>Zählen Sie PDL-Zellen mit einem Hämozytometer.</li>
	<li>Seed PDL-Zellen in der Dichte von 0,5 x 104, 1 x 104, 3 x 104und 6 x 104 Zellen/cm2.</li>
	<li>Kultur PDL-Zellen auf Chitosan-Filmen in einem Inkubator bei 37 °C in 5% CO2 mit befeuchteter Luft.</li>
	<li>Ändern Sie das Kulturmedium danach zweimal pro Woche.</li>
	<li>Beobachten Sie an den Tagen 1, 2, 3, 4 und 5 die Zellmorphologie täglich über ein inverses Phasenkontrastmikroskop.</li>
</ol>4. Zellüberleben
<ol><li>Nach 1, 3 und 6 Tagen Kultur, bestimmen Sie das Überleben der Zellen mit einem kommerziellen Lebensfähigkeit / Zytotoxizität Kit.</li>
	<li>In einem 15 ml Rohr 2 ml einer frischen Lösung von 2 mM Calcein-AM und 4 mM Ethidium-Homodimer in PBS durch Wirbeln für 5 s vorbereiten. HINWEIS: Halten Sie den Prozess im Dunkeln.</li>
	<li>Entfernen Sie das Kulturmedium und waschen Sie Sphäroide in PBS.</li>
	<li>Inkubieren Sie Sphäroide in PBS mit 2 mM Calcein-AM und 4 mM Ethidium-Homodimer für 30 min bei Raumtemperatur im Dunkeln.</li>
	<li>Sitheroide Sphäroide zweimal in PBS. Für Sphäroide aus einem Brunnen mit 24-Well-Platte, verwenden Sie 2 ml PBS für jedes Mal.</li>
	<li>Beobachten Sie die Proben mit einem Fluoreszenzmikroskop mit 10- oder 20-facher Vergrößerung.</li>
</ol>

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</ol>

Die Autoren haben nichts zu verraten.

Die vorliegende Studie führte ein 3D-Zellkultursystem ein, um einige Einschränkungen im Zusammenhang mit konventioneller 2D-Monolayer-Zellkultur zu überwinden. Nach dem Protokoll, PDL zelluläre Sphäroide wurden erfolgreich durch die Kultivierung von Zellen auf Chitosan-Filme gebildet. Unsere vorherige Studie berichtete, dass die Sphäroidbildung die Selbsterneuerungs- und osteogene Differenzierungskapazitäten von PDL-Zellen14erhöht hat. Anstatt ein Enzym zu verwenden, um Zellen aus TCPS zu ernten, ...

Parodontitis, vor allem durch Zahnbelag1initialisiert, ist durch die Schädigung von Parodontalgewebe einschließlich Parodontalband (PDL), Alveolarknochen und Zement um gekennzeichnet. Aktuelle Behandlungen für Parodontitis sind in der Regel erfolgreich bei der Verhinderung des Fortschreitens der aktiven Krankheit, aber die Regeneration von verlorenen parodontalen Geweben bleibt eine klinische Herausforderung. In jüngster Zeit wurden wichtige Fortschritte bei zellbasierten Ansätzen für die parodontale Geweberegeneration erzielt, um die Nachteile der aktuellen Behandlungen2,3,4zu überwinden.
Unsere vorherige systematische Überprüfung ergab, dass PDL-Zellen ein großes Potenzial für die parodontale Regeneration zeigten5. Üblicherweise werden PDL-Zellen auf zweidimensionalen (2D) Substraten wie Gewebekulturpolystyrol (TCPS) kultiviert. Während der In-vitro-Kultur6wurden jedoch charakteristische Veränderungen von PDL-Zellen beobachtet. Dieses Phänomen liegt wahrscheinlich daran, dass sich der 2D TCPS von der dreidimensionalen (3D) Mikroumgebung in vivo unterscheidet7. Im Vergleich zu Zellen, die auf 2D-Substraten kultiviert werden, weisen Zellen, die in einer 3D-Mikroumgebung angebaut werden, mehr Ähnlichkeiten mit in vivo Zellenauf 8. Daher bieten 3D-Zellkulturmodelle eine vielversprechende Alternative zur konventionellen 2D-Monolayer-Zellkultur.
Herkömmliche 3D-Kulturmethode ist das Verkapseln von Zellen in 3D-Biomaterialien. Im Vergleich zu Zellen, die in 3D-Biomaterialien eingekapselt sind, imitieren zelluläre Sphäroide die In-vivo-Situation genauer, da Sphäroide Aggregate von Zellen sind, die frei von Fremdstoffen wachsen9,10,11, 12. Es wird berichtet, dass zelluläre Sphäroide MSC-Bioaktivitäten durch die Erhaltung von extrazellulären Matrixkomponenten (ECM) einschließlich Fibronectin und Laminin13förderten. Zur Verbesserung herkömmlicher PDL-Zellkulturmodelle haben wir vor kurzem eine 3D-PDL-Zellkulturmethode entwickelt, die aufder Sphäroidbildung von PDL-Zellen auf Chitosan-Filmen 14 basiert. Die Sphäroidbildung erhöhte die Selbsterneuerung und die osteogene Differenzierungsfähigkeit der PDL-Zellen14. Hier präsentieren wir detaillierte PDL-Zellsphäroid-Kulturprotokolle, die auf Chitosan-Filmen basieren. Das 3D-Kultursystem von PDL-Zellsphäriden beseitigt einige der Mängel im Zusammenhang mit der konventionellen TCPS-Zellkultur und eignet sich daher möglicherweise für die Herstellung von PDL-Zellen mit einer verbesserten therapeutischen Wirksamkeit für die zukünftige parodontale Geweberegeneration.

<table><tbody><tr><td>&alpha;-MEM</td><td>Gibco</td><td>11900-073</td><td></td></tr><tr><td>Essigsäure&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>64197</td><td></td></tr><tr><td>Zellkulturflasche 25 cm2</td><td>Corning</td><td>430639</td><td></td></tr><tr><td>Zellkulturflasche 75 cm2</td><td>Corning</td><td>430641</td><td></td></tr><tr><td>Chitosan</td><td>Heppe Medical Chitosan GmbH</td><td>/</td><td>Molekulargewicht 500 kDa, Deacetylierungsgrad 85%</td></tr><tr><td>FCS</td><td>Gibco</td><td>26140-079</td><td></td></tr><tr><td>Lebend/Tot Lebensfähigkeit/Zytotoxizität Kit</td><td>Molekular&nbsp; Sonden</td><td>L3224</td><td></td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1310732</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>KeyGen Biotech&nbsp;</td><td></td><td></td>KGB5001</tr><tr><td>Kugelschreiber/Streptokokken</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin/EDTA&nbsp;</td><td>KeyGen Biotech&nbsp;</td><td></td><td></td>KGM25200</tr><tr><td>konisches Zentrifugenröhrchen 15 mL</td><td>Corning</td><td>430790</td><td></td></tr><tr><td>24-Well-Platte</td><td>Corning</td><td>3524</td><td></td></tr></tbody></table>

bildung von human periodontal ligament cell spheroids auf chitosan filmen

Formation of Human Periodontal Ligament Cell Spheroids on Chitosan Films

Parodontalbandzellen (PDL) sind für die Regeneration des parodontalen Gewebes vielversprechend. Üblicherweise werden PDL-Zellen auf zweidimensionalen (2D) Substraten wie Gewebekulturpolystyrol (TCPS) kultiviert. Jedoch, charakteristische Veränderungen der PDL-Zellen wurden während der In-vitro-Kultur beobachtet. Dieses Phänomen liegt wahrscheinlich daran, dass sich das 2D TCPS von der dreidimensionalen (3D) Mikroumgebung in vivo unterscheidet. Im Vergleich zu Zellen, die auf 2D-Substraten kultiviert werden, weisen Zellen, die in einer 3D-Mikroumgebung angebaut werden, mehr Ähnlichkeiten mit In-vivo-Zellen auf. Daher bieten 3D-Zellkulturmodelle eine vielversprechende Alternative zur konventionellen 2D-Monolayer-Zellkultur. Um herkömmliche PDL-Zellkulturmodelle zu verbessern, haben wir vor kurzem eine 3D-Zellkulturmethode entwickelt, die auf der Sphäroidbildung von PDL-Zellen auf Chitosan-Filmen basiert. Hier präsentieren wir detaillierte Zellsphäroid-Kulturprotokolle, die auf Chitosan-Filmen basieren. Das 3D-Kultursystem der PDL-Zellsphäriden überwindet einige der Einschränkungen im Zusammenhang mit der konventionellen 2D-Monolayer-Zellkultur und eignet sich daher möglicherweise für die Herstellung von PDL-Zellen mit einer verbesserten therapeutischen Wirksamkeit für die zukünftige parodontale Geweberegeneration.

Mit dem vorliegenden Protokoll wurden erfolgreich lebensfähige PDL-Zellsphäride gebildet. Abbildung 1 zeigte, dass suspendierte Zellen oder Sphäroide anstelle von angehängten Zellen hauptsächlich auf Chitosan-Filmen beobachtet wurden. Bei der Saatdichte von 0,5 x 104 Zellen/cm2wurden gelegentlich an Tag 1 und 3 angehängte PDL-Zellen gefunden, und PDL-Zellsphäride wurden selten beobachtet. Im Gegenteil, für die Sädichten von 3 x 104<...

Hier präsentieren wir Protokolle zur Kultivierung von Humanparodontalband (PDL) Zellsphäriden durch Chitosan-Filme. Die Kultur der dreidimensionalen (3D) zellulären Sphäroide bietet eine Alternative zum herkömmlichen Gewebekulturpolystyrol (TCPS) Kultursystem.

Bildung von Human Periodontal ligament Cell Spheroids auf Chitosan Filmen

Periodontal ligament (PDL) cells hold great promise for periodontal tissue regeneration. Conventionally, PDL cells are cultured on two-dimensional (2D) ...

Dies ist ein detailliertes Protokoll der Kultivierung parodontalen Bandzellsphäriden durch Chitosan-Filme. Im Vergleich zum herkömmlichen Kultursystem produziert das Sphäroid-Kultursystem parodontale Bandzellen mit erhöhter Selbsterneuerung und osteogenen Differenzierungsfähigkeiten. Bereiten Sie zunächst 1% Gewicht-zu-Volumen-Chitosan-Lösung vor, wie im Manuskript angegeben.Fügen Sie 0,5 Milliliter Chitosan-Lösung in jeden Brunnen einer 24-Well-Gewebekultur Polystyrolplatte. Trocknen Sie die Platte in einem Ofen bei 60 Grad Celsius für 24 Stunden, um Chitosan-Filme zu bilden. Um die Chitosan-Filme zu neutralisieren, fügen Sie 0,5 Milliliter 0,5 normales Natriumhydroxid in jeden Brunnen der 24-Well-Platte und inkubieren bei Raumtemperatur für zwei Stunden.Dann die Chitosan-Filme dreimal mit doppelt destilliertem Wasser waschen. Sterilisieren Sie die chitosanbeschichtete 24-Well-Platte in 70% Alkohol über Nacht bei Raumtemperatur. Spülen Sie die Platte dreimal mit PBS und lassen Sie sie dann über Nacht unter ultraviolettem Licht.Vor der Zellaussaat, vorwarmend Proliferation sende Medium, PBS-Lösung, und Trypsin EDTA-Lösung auf 37 Grad Celsius. Entsorgen Sie den Überstand aus dem Zellkulturkolben und waschen Sie das konfluente Parodontalband oder PDL-Zellen mit 10 MilliliterPBS. Entsorgen Sie die PBS und fügen Sie dem Kolben einen Milliliter Trypsin EDTA-Lösung hinzu.Inkubieren Sie den Kolben bei 37 Grad Celsius für drei Minuten und fügen Sie dann drei Milliliter Proliferationsmedium hinzu, um die Trypsin-Verdauung zu beenden. Übertragen Sie die Zellsuspension in ein 15 Milliliter konisches Rohr und zentrieren Sie sie dann für fünf Minuten bei 300 mal g. Entsorgen Sie den Überstand und setzen Sie die Zellen in 500 Mikroliter Proliferationsmedium wieder aus.Zählen Sie die Zellen mit einem Hämozytometer und säen Sie sie auf die Platte bei fünf, 10, 30 und 60 Tausend Zellen pro Quadratzentimeter. Kultur die PDL-Zellen in einem Inkubator bei 37 Grad Celsius in 5% Kohlendioxid und befeuchteter Luft, verändert das Kulturmedium zweimal pro Woche. Beobachten Sie die Zellmorphologie täglich fünf Tage lang über ein inverses Phasenkontrastmikroskop.Mit diesem Protokoll werden lebensfähige PDL-Zellsphäride erfolgreich gebildet. Sphäroide werden selten für die niedrigere Saatdichte an den Tagen eins und drei beobachtet. Aber bei den beiden höheren Dichten sind vom ersten Tag an verschiedene Größen von Sphäroiden vorhanden.Die optimale Saatdichte beträgt 30 Tausend Zellen pro Zentimeter quadratisch, da sie zu homogenen Sphäroiden führt. Nach fünf Tagen Kultur werden größere Sphäroide für alle Sädichten beobachtet. Ein Lebensfähigkeitstest zeigt, dass die Mehrheit der PDL-Zellen an den Tagen eins, drei und sechs am Leben sind, aber die Anzahl der abgestorbenen Zellen steigt an Tag sechs.Eine Einschränkung dieses Protokolls ist die verminderte Proliferation von Zellen nach Sphäroidbildung. Daher sind weitere Studien zur Förderung der Zellproliferation nach Sphäroidbildung erforderlich.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

Entwicklungsbiologie

Die Herstellung einer erfindungsgemäßen, flexiblen Dünnfilm chirurgischen Klebstoff aus FDA zugelassenen Inhaltsstoffen, Chitosan und Indocyaningrün beschrieben. Bonden dieser Klebstoff auf Kollagengewebe durch eine einfache Aktivierung mit einer Low-Power-Infrarotlaser nachgewiesen wird.

A Chitosan Based, Laser Activated Thin Film Surgical Adhesive &quot;SurgiLux &#39;: Vorbereitung und Demonstration

Eine große Hürde in der aktuellen Stammzelltherapien ist die Bestimmung der effektivste Methode, diese Zellen zu Wirtsgewebe zu liefern. Hier beschreiben wir eine Chitosan-basierte Methode, die Lieferung effizienter und einfacher in Ansatz ist, während es aus Fettgewebe gewonnenen Stammzellen, ihre Multipotenz aufrecht zu erhalten.

Der Bau einer Kollagen-Hydrogel für die Lieferung von Stem Cell-beladenen Chitosan-Mikrokügelchen

Wir präsentieren ein Modell des Bandgewebes, in dem dreidimensionale Konstrukte mit dem menschlichen Übungskonditionierten Serum behandelt und auf Kollagengehalt, Funktion und Zellbiochemie analysiert werden.

Behandlung von Ligamentenkonstrukten mit ausüberschüssigem Serum: Ein Translations-Gewebe-Engineering-Modell

Hier beschreiben wir eine einfache Zubereitung von Chitosan-basierten injizierbaren Hydrogele mit dynamischen Imin Chemie. Methoden der Hydrogel mechanische Festigkeit und seine Anwendung in 3D Zellkultur anpassen werden vorgestellt.

Vorbereitung der Chitosan-basierten injizierbaren Hydrogele und deren Anwendung in 3D Zellkultur

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll zur 3D-Kultur-Systeme selbst Montage Peptid Gerüste zur Förderung der Differenzierung der entdifferenzierten menschlichen Gelenkknorpel Chondrozyten Knorpel-ähnliches Gewebe zu erhalten.

Kultivierung von Säugerzellen in dreidimensionale Peptid Gerüste

Wir entwickelten eine heterogene Brust-Krebs-Modell, bestehend aus verewigt Tumor und Fibroblasten-Zellen eingebettet in ein Bioprintable Alginat/Gelatine Bioink. Das Modell der in Vivo Tumor Mikroumgebung rekapituliert und erleichtert die Bildung von mehrzelligen Tumor Sphäroide, Einblick in die Mechanismen fahren Tumorgenese nachgeben.

Bioprintable Alginat/Gelatine Hydrogel 3D In-vitro- Modellsysteme induzieren Sphäroid Zellbildung

Dieses Protokoll stellt eine Methode für die Kultur und das 3D-Wachstum von Ameloblasten-ähnlichen Zellen in Schwerelosigkeit vor, um ihre längliche und polarisierte Form sowie die schmelzspezifische Proteinexpression zu erhalten. Auch Kulturbedingungen für die Kultur von parodontalen Engineering-Konstrukten und Lungenorganen in Schwerelosigkeit werden beschrieben.

Vermehrung von Zahn- und Atmungszellen und -organen in Schwerelosigkeit

Das vorliegende Protokoll beschreibt ein nicht-emulsionsbasiertes Verfahren zur Herstellung von Chitosan-Genipin-Mikrogelen. Die Größe dieser Mikrogele kann präzise kontrolliert werden, und sie können pH-abhängige Schwellungen aufweisen, in vivo abgebaut werden und mit therapeutischen Molekülen beladen sein, die im Laufe der Zeit nachhaltig freigesetzt werden, was sie für Tissue-Engineering-Anwendungen sehr relevant macht.

Herstellung von größenkontrollierten und emulsionsfreien Chitosan-Genipin-Mikrogelen für Tissue-Engineering-Anwendungen

In dieser Studie wird ein Rattenmodell zur Induktion von Parodontitis durch eine Kombination aus remanenter Ligatur und wiederholten Injektionen von Lipopolysaccharid aus Porphyromonas gingivalis über 14 Tage um die ersten Oberkiefermolaren herum vorgestellt. Die Ligatur- und LPS-Injektionstechniken waren wirksam bei der Induktion einer Peridontitis, die zu einem Verlust und einer Entzündung des alveolären Knochens führte.

Induktion von Parodontitis durch eine Kombination aus Ligatur- und Lipopolysaccharid-Injektion im Rattenmodell

Diese Studie beschreibt ein Verfahren zur Herstellung von chondrozytären Sphäroiden, indem Zellen unter Verwendung der Schwerkraft unter Bedingungen mit geringer Adhäsion zu Sphäroiden aggregiert werden, gefolgt von der Kultivierung der resultierenden Sphäroide in Mini-Bioreaktoren.

Erzeugung von Sphäroiden aus verschiedenen Chondrozyten unter Verwendung von niedrigadhäsiven Bedingungen unter Schwerkraft und selbstgemachten Mini-Bioreaktoren

Diese Studie beschreibt eine modifizierte 6-0-Nylon-Ligaturmethode zur Induktion von Parodontitis bei Mäusen, die hochgradig reproduzierbar ist und eine Alternative für Forscher darstellt, um Parodontalerkrankungen von ihrer Entwicklung bis zu ihren pathologischen Folgen zu untersuchen.

Mausmodell der fortgeschrittenen Parodontitis, die durch eine Nylonligatur im zweiten oberen Molaren induziert wird

Erfahren Sie die 3D-Kultivierung von humanen Periodontalligamentzell-Sphäroiden auf Chitosan-Filmen. Diese Methode verbessert die Selbsterneuerung und osteogene Differenzierung für regenerative Parodontaltherapien.

Bildung von Human Periodontal ligament Cell Spheroids auf Chitosan Filmen

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