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DOI: 10.3791/59966-v
Kyla A. Britson1,2, Aaron D. Black2,3, Kathryn R. Wagner1,2,3,4, Thomas E. Lloyd1,2,4
1Graduate Program in Cellular and Molecular Medicine,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Neurology,Johns Hopkins University School of Medicine, 3Kennedy Krieger Institute, 4Department of Neuroscience,Johns Hopkins University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Komplexe menschliche Krankheiten können in traditionellen Labormodellsystemen eine Herausforderung darstellen. Hier beschreiben wir einen chirurgischen Ansatz zur Modellierung menschlicher Muskelerkrankungen durch die Transplantation menschlicher Skelettmuskelbiopsien in immundefizienten Mäusen.
Dieses Protokoll ist wichtig, weil es verwendet werden kann, um menschliche Skelettmuskel Xenografts zu schaffen, die verwendet werden können, um Muskelerkrankungen zu modellieren und präklinische therapeutische Tests durchzuführen. Dieses Xenograft-Modell ermöglicht es Forschern, menschliche Muskeln in vivo zu untersuchen, um die menschliche Muskelzellbiologie besser zu verstehen und neuartige Modelle für seltene oder erworbene Muskelerkrankungen zu entwickeln. Nach Erhalt einer menschlichen Muskelbiopsie, legen Sie die Probe in eine 100 x 15-Millimeter Petrischale mit Muskelmedium, und verwenden Sie ein Stereomikroskop und chirurgische Schere, um alle verbleibenden Faszien oder Fettgewebe zu entfernen.
Sezieren Sie die Muskelbiopsie in etwa sieben mal drei mal drei Millimeter, wobei darauf geachtet wird, dass die Fasern längs innerhalb der Probe angeordnet sind. Als nächstes die Petrischale mit dem sezierten Muskel auf Eis übertragen und synthetische, nicht resorbierbare Nähte in eine 100 mal 15 Millimeter lange Petrischale mit 70% Ethanol legen. Nach der Bestätigung eines Mangels an Reaktion auf Zehenkneifen in einer acht bis zwölf Wochen alten, anästhesierten NOD-Rag-Gamma-Maus, tragen Sie Salbe auf die Augen des immungeschwächten Tieres auf und verwenden Sie einen Trimmer, um das Haar zu entfernen, das das Tibialis vordem vom Knöchel bis zum Knie überragt.
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