Untersuchung des linksventrikulären Reverse Remodeling durch Aortendefletieren bei Nagetieren

Aortendebanding ist ein nützliches experimentelles Modell zur Untersuchung des myokardialen Reverse Remodeling bei Nagetieren und für neue Einblicke in die Mechanismen der Kardiomyozytenregression und der funktionellen Erholung. Dieses Metall erleichtert die Entwicklung der Kritik-Reverse-Modellierung in VIVO und die Sammlung biologischer Proben für In-vitro- und molekulare Studien zu verschiedenen Zeitpunkten während des Krankheitsverlaufs. Diese Technik ahmt den Fortschritt des Myokardumbaus und des umgekehrten Umbaus nach und ermöglicht es, die Mechanismen der unvollständigen Myokardwiederherstellung zu erforschen.

Dieses Protokoll bietet Einblicke in die Mechanismen und die Linie vollständige und unvollständige Myokardumkehrumbau bei chronischen Drucküberlastungs-bedingten Pathologien wie Augenvorstellung oder Aortenstenose. Schließen Sie den Orotrachealschlauch an das Beatmungsgerät an, um die mechanische Beatmung einzuleiten, und stellen Sie das Beatmungsgerät auf eine Frequenz von 160 Atemzügen pro Minute und ein Gezeitenvolumen von 10 Millilitern pro Kilogramm ein. Bevor Sie mit dem Bandverfahren beginnen, bestätigen Sie eine mangelnde Reaktion auf den Schmerzreflex bei einer sechs bis acht Wochen alten C57 schwarzen Sechsermaus, rasieren und enthaaren Sie enthaarende Creme von der Halslinie bis zur mittleren Brusthöhe der Maus aufgetragen und tragen Sie Salbe auf die Augen des Tieres auf.

Platzieren Sie eine Rektalsonde und das Oximeter zur Überwachung der Temperatur der Sauerstoffversorgung des Blutes und der Herzfrequenz. Legen Sie die Maus in den rechten seitlichen Dekubitus auf ein Heizkissen und kleben Sie die Gliedmaßen an das magnetische Fixator-Rückzugssystem, um das Tier während des Eingriffs in der richtigen Position zu halten. Desinfizieren Sie dann die Brust mit aufeinanderfolgenden 70% Alkohol und Povidon-Jodlösung und öffnen Sie den Hautmuskel und die Rippen, um das Band zur Aorta zu führen.

Am Ende des Verfahrens Povidon-Jod-Lösung auf die Hautnähtstelle auftragen und zweimal täglich für zwei bis drei Tage Analgesie verabreichen, dann steriles salzhaltiges intraperitoneales Lea injizieren, um Austrocknung bei signifikanten Blutungen während der Operation zu verhindern, und das Tier in einen Inkubator mit Überwachung bis zur vollständigen Genesung legen. Sieben Wochen nach der Banding-Operation sanft auf das Gewebe sezieren, Adhäsion und Fibrose um die Aorta bei der Hälfte der gebänderten Tiere, bis die Verengung sichtbar wird. Sezieren Sie vorsichtig die Aorta und trennen Sie die Naht vom Gefäß, dann verwenden Sie eine Schere, um die Naht zu schneiden.

Beachten Sie, dass ein längerer Verschluss des Axt-Indigowassers während der Bindung oder dämonisch zu Lungenödemen führen kann, einer übermäßigen Aktivierung von Entzündungswegen. Schließen Sie die Brustwand mit einer einfachen unterbrochenen oder durchgehenden sechs alten Polypropylennähte mit der minimalen Anzahl von Stichen und schließen Sie die Haut mit einer Sechs-O-Seiden-Polypropylennaht in einem kontinuierlichen Nahtmuster, dann führen Sie die postoperative Pflege wie gezeigt durch. Alle zwei bis drei Wochen nach der Operation wird das Fell wie gezeigt von der Halslinie bis zur mittleren Brusthöhe entfernt und das Tier auf ein Heizkissen in Rückenlage legen Sie EKG-Elektroden auf die exponierte Haut und bestätigen Sie das Vorhandensein einer guten EKG-Spur und einer Herzfrequenz zwischen 300 und 350 Schlägen pro Minute.

Überwachen Sie die Temperatur und tragen Sie Echogel auf die Brustregion auf. Legen Sie die Mäuse in die dorsale Liegefläche leicht nach rechts gedreht und starten Sie den Echokardiographen mit den entsprechenden Einstellungen. Als nächstes positionieren Sie eine Ultraschallsonde über dem Thorax und beurteilen den Druckgradienten über die Aorta.

Nehmen Sie zweidimensionale geführte Bilder der Aorta auf, die das Vorhandensein oder Fehlen der aufsteigenden Aortenverengung zeigen, um die Wirksamkeit der Banding und Debandierung anatomisch zu visualisieren. Um die Hypertrophie zu beurteilen, positionieren Sie die Sonde an einer linken Ventrikel-Kurzachse auf Papillenmuskelebene und drücken Sie die Mode-Tracing-Taste, um die linke Ventrikel-Vorderwand, den linken Ventrikeldurchmesser und die linke Ventrikel-Hinterwand in Diacetyl und Systole zu visualisieren. Bewerten Sie dann die systolische Funktion und berechnen Sie die Auswurffraktion und die fraktionierte Verkürzung nach Standardprotokollen.

Um die diastolische Funktion zu beurteilen, bestimmen Sie den Höhepunkt des Postwellen-Dopplers der frühen und Derblatt-Mitralströmungsgeschwindigkeit mit einer atypischen Vierkammeransicht direkt über den Mitralblättchen und zeichnen Sie die laterale mitralen ringförmigen myokardialen frühen diastolischen und maximalen systolischen Geschwindigkeiten mit Post-Gewebe-Doppler-Bildgebung und der apikalen Vierkammeransicht auf. Der Erfolg der Aortenverengung kann durch einen erhöhten linken Ventrikel und systolischen Druck nachgewiesen werden. Und durch Doppler-Aortenströmungsgeschwindigkeiten von mehr als 2,5 Metern pro Sekunde.

Im Vergleich zu Sham-operierten Tieren zeigt sich die durch Biegung induzierte Hypertrophie des linken Ventrikels durch eine erhöhte Masse des linken Ventrikels und eine beeinträchtigte diastolische Funktion, was durch höhere Fülldrücke und einen linksventrikulären diastolischen Druck belegt wird. Histologisch induziert sieben Wochen Aortenband eine signifikante Hypertrophie und Fibrose der Kardiomyozyten. Bei meiner Debandierung kann eine erfolgreiche Entfernung der Aortenstenose durch Echo-Doppler-Geschwindigkeiten nachgewiesen werden.

Die allgemeine Debandierung fördert eine signifikante Abnahme der Nachlast und der Hypertrophie des linken Ventrikels, die durch die LV-Masse beurteilt wird. Darüber hinaus wird auch eine Normalisierung der diastolischen Funktion beobachtet. Wenn Sie es sorgfältig spielen, vermeiden Sie längere ethische Absprachen, um sicherzustellen, dass die Sauerstoffversorgung des Blutes über 90% bleibt Dieses Mindestmodell ermöglicht es uns, meinen Herzumbau und den umgekehrten Umbau zu verschiedenen Zeitpunkten des Krankheitsverlaufs zu untersuchen und sogar die am meisten dysregulierten Wege zu jedem Zeitpunkt aufzuwecken.

Dieses Verfahren ermöglicht es, das therapeutische Potenzial vielversprechender Medikamente zu bewerten und die Auswirkungen mehrerer Komorbiditäten bei der myokardiellen Umformung und Genesung zu untersuchen.