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Immunology and Infection
Bewertung der Lymphozytenmigration in einem Ex-Vivo-Transmigrationssystem
Bewertung der Lymphozytenmigration in einem Ex-Vivo-Transmigrationssystem
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JoVE Journal Immunology and Infection
Assessment of Lymphocyte Migration in an Ex Vivo Transmigration System

Bewertung der Lymphozytenmigration in einem Ex-Vivo-Transmigrationssystem

Full Text
7,385 Views
10:25 min
September 20, 2019

DOI: 10.3791/60060-v

Kristi J. Warren1,3, Todd A. Wyatt2,3,4

1Department of Internal Medicine,University of Utah, 2Research Service,VA Nebraska Iowa Health Care System, 3Department of Internal Medicine,University of Nebraska Medical Center, 4Department of Environmental, Agricultural & Occupational Health,University of Nebraska Medical Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

In diesem Protokoll werden Lymphozyten in die obere Kammer eines Transmigrationssystems gelegt, die durch eine poröse Membran von der unteren Kammer getrennt sind. Chemokin wird der unteren Kammer hinzugefügt, was eine aktive Migration entlang eines Chemokingradienten induziert. Nach 48 h werden Lymphozyten in beiden Kammern gezählt, um die Transmigration zu quantitieren.

Lymphozytentransmigration ist ein wichtiges Merkmal jeder Immunantwort. Daher ist dieses Protokoll von Bedeutung, da es es einem Forscher ermöglicht, die Mobilität von Lymphozyten in einem genau definierten In-vitro-System zu bewerten. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass verschiedene Chemokine bewertet werden können, um ihre Wirksamkeit der Induktion der Migration in kürzlich definierten Zellen zu bestimmen, wie die Gruppe zwei angeborene lymphoide Zellen, oder ILC2.

Ein zweiter Vorteil ist, dass Inhibitoren oder biologische Therapien zur Blockierung bestimmter Chemokinwege mit dieser Methode getestet werden können, bevor teurere Experimente mit Tieren durchgeführt werden. Beginnen Sie mit der Ausscheidung von Lungen und Milz von eingeschläferten eizellenbehandelten männlichen und weiblichen Mäusen mit zwei bis drei Tieren pro Gruppe. Zerlegen Sie ausgeschnittene Gewebe in separate Dissoziationsröhren nach Gewebetyp und tierischem Geschlecht.

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Immunologie und Infektion Ausgabe 151 CCL17 (C-C Motiv Chemokin 17)/TARC (Thymus und Aktivierungsbezogenes Chemokin) CCL22 (C-C Motiv Chemokin 22)/MDC (Macrophage-derived chemokine) CCR4 (CC Chemokine Receptor 4) CD4 T Cell (CD4+ T helper cell)/Th2 cell ILC2: (Gruppe 2 angeborene Lymphoidzelle) OVA (Chicken Egg Ovalbumin)

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