Name: Évaluation hémodynamique invasive pour le système ventriculaire droit et lhypertension artérielle pulmonaire induite par lhypoxie chez les souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-24T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 54 s
Description: Découvrez l'évaluation hémodynamique invasive du ventricule droit et de l'artère pulmonaire chez la souris par chirurgie à thorax ouvert. Cette méthode permet la mesure simultanée des pressions pour l'étude de l'hypertension artérielle pulmonaire.

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Cette recherche est soutenue par le Projet de réforme de l'enseignement supérieur de l'Union de Pékin (10023-2016-002-03), le Fonds pour la jeunesse de l'hôpital Fuwai (2018-F09) et le Fonds des directeurs du Laboratoire clé de recherche préclinique et Évaluation des matériaux d'implant cardio-vasculaire (2018-PT2-ZR05).

Le protocole animal a été examiné et approuvé par le Comité institutionnel de soins et d'utilisation des animaux de l'hôpital Fuwai, de l'Académie chinoise des sciences médicales, du Peking Union Medical College (NO.0000287). Les animaux expérimentaux ont été logés et nourris selon les lignes directrices du bien-être animal en Chine.
REMARQUE : Des souris mâles de C57BL de huit à 12 semaines ont été logées dans un environnement avec un cycle de lumière foncé/12 h de 12 h. Les souris de PAH ont été logées pendant 4 semaines sous une concentration d'oxygène de 10%, maintenuepare par une chambre d'hypoxie oxygène-commandée pour induire l'hypertension pulmonaire, et les souris de contrôle ont été logées dans l'air de pièce (21% oxygène) dans des conditions identiques. Des mesures de RVP et de PAP ont été exécutées à la fin des 4 semaines du défi d'hypoxie.
1. Préparation préopératoire
<ol><li>Faire tremper le cathéter transducteur de pression (taille: 1 Fr) dans 0,9% salin à température ambiante pendant au moins 30 minutes avant l'expérience hémodynamique.</li>
	<li>Filtrer la solution 2,2,2-Tribromoethanol avec un filtre de 0,22 m et le conserver dans un réfrigérateur à 4 degrés.</li>
	<li>Préparer des outils et des fournitures de chirurgie nettoyés tels que des gants pour la chirurgie.</li>
	<li>Préparer 10 ml de solution d'enzymes digestives de 1,0 % pour le nettoyage du cathéter.</li>
	<li>Connectez le cathéter transducteur de pression à un système de volume de pression.</li>
	<li>Calibrer le transducteur de pression avant d'obtenir des mesures de pression pour chaque souris.<ol>
<li>Tournez le bouton d'étalonnage à 0 mmHg et 25 mmHg pour envoyer un signal de pression de vérification au logiciel d'acquisition de données et configurer le réglage d'étalonnage dans le logiciel.</li>
		<li>Tournez le bouton vers Transducer et réglez le bouton Balance à zéro ligne de base.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Mettre en place un stéréomicroscope standard et une table chirurgicale à température contrôlée pour le maintien de la température corporelle pendant la chirurgie.</li>
	<li>Mettre en place un système d'éclairage lumineux pour la microchirurgie pour fournir suffisamment de lumière sur la zone chirurgicale.</li>
</ol>2. Chirurgie à poitrine ouverte et mesure hémodynamique
<ol><li>Anesthésiez les souris avec 250 mg/kg de 2,2,2-Tribromoéthanol par injection intrapéritonéale (i.p.). Si nécessaire, répéter des doses supplémentaires à 1/3 à 1/2 de la dose originale au cours de la procédure.</li>
	<li>Enlever la fourrure de poitrine et de cou à l'aide d'un sehaver et d'une lotion d'épilation(figure 1A, 2A).</li>
	<li>Fixez chaque souris en position de supine sur une table chirurgicale de petit animal à température contrôlée pour aider à maintenir la température corporelle (37 oC) pendant la chirurgie.</li>
	<li>Nettoyer le site chirurgical avec 70% d'éthanal.</li>
	<li>Une fois l'anesthésie en vigueur, confirmer une induction adéquate de l'anesthésie à l'aide d'une pincée d'orteil.</li>
	<li>Faire une incision médiane sur la peau du cou (Figure 1A).</li>
	<li>Disséquer le muscle squelettique à l'aide de forceps incurvés et exposer la trachée (Figure 1B, 1C).</li>
	<li>Effectuer l'intubation par la bouche à l'aide d'un cathéter de gaine intraveineuse modifié de 22 G. Confirmer que le tube est dans la trachée à l'aide de forceps (Figure 1D).</li>
	<li>Connectez le tube à un petit ventilateur animal. Calculer et définir le taux de respiration et le volume des marées en fonction du poids corporel selon le manuel d'utilisation du ventilateur10. Par exemple, fixez le taux de respiration à 133/min et le volume des marées à 180 L pour une souris de 30 g en fonction du calcul décrit.</li>
	<li>Fixer le tube pour la ventilation à l'aide de ruban adhésif.</li>
	<li>Confirmer une induction adéquate de l'anesthésie à l'aide d'une pincée d'orteil.</li>
	<li>Faire une incision médiane sur la peau de la poitrine et disséquer soigneusement les muscles thoraciques à l'aide d'un outil de cautérisation (Figure 2B, 2C).</li>
	<li>Couper le sternum à l'aide de ciseaux au milieu et exposer la cavité thoracique (Figure 2D).</li>
	<li>Prévenir tout saignement à l'aide de l'outil de cautérisation pendant la procédure de chirurgie à poitrine ouverte.</li>
	<li>Exposer le ventricule droit avec les rétracteurs (Figure 2E).</li>
	<li>Insérez le cathéter transducteur à pression imbibé de saline à travers un petit tunnel créé avec une aiguille de 25 G dans le ventricule droit pour mesurer le RVP(figure 2F et figure 3A, 3C).</li>
	<li>Maintenez le câble du cathéter et traversez la valve pulmonaire d'une manière coaxiale avec l'artère pulmonaire. Observez la forme d'onde de pression et obtenez un signal PAP stable(figure 3B, 3D).</li>
	<li>Enregistrez les données hémodynamiques à l'aide du système d'acquisition de données et du logiciel.</li>
	<li>Après les mesures finales, euthanasiez les souris humainement par l'injection d'une dose excessive de 2,2,2-Tribromoethanol solution.</li>
	<li>Retirez soigneusement le cathéter du système cardiaque droit et placez-le dans une seringue de 1 ml contenant une solution d'enzymes digestives de 1 %.</li>
	<li>Utilisez de l'eau distillée pour rincer le cathéter en continu avec soin et entreposez-le dans la boîte d'origine.</li>
</ol>3. Analyse de données pour l'hémodynamique
REMARQUE : Les données hémodynamiques ont été enregistrées et analysées à l'aide du logicield'analyse 11 (Tableau des matériaux).
<ol><li>Pour chaque souris, sélectionnez au moins 10 cycles de rythme cardiaque continus et stables sans bruit pour obtenir les données moyennes des données RVP ou PAP pour chaque paramètre.</li>
	<li>Utilisez le test t-testde l'étudiant pour comparer les groupes normaux de contrôle de l'air et d'hypoxie. REMARQUE : p 'lt; 0.05 a été considéré statistiquement significatif. Les données sont présentées comme la moyenne de SD.</li>
</ol>

<ol><li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+therapeutic+interventions+for+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension.</a> Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).</li>
<li>Chatterjee, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Swan-Ganz+catheters%3A+past%2C+present%2C+and+future%3A+a+viewpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint.</a> Circulation. 119 (1), 147-152 (2009).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHAMPION+trial+rationale+and+design%3A+the+long-term+safety+and+clinical+efficacy+of+a+wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Failure%22%5BJournal%5D)">CHAMPION trial rationale and design: the long-term safety and clinical efficacy of a wireless pulmonary artery pressure monitoring system.</a> Journal of Cardiac Failure. 17 (1), 3-10 (2011).</li>
<li>Abraham, W. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+haemodynamic+monitoring+in+chronic+heart+failure%3A+a+randomised+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery haemodynamic monitoring in chronic heart failure: a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 377 (9766), 658-666 (2011).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+guides+management+to+reduce+decompensation+in+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery pressure monitoring guides management to reduce decompensation in heart failure with preserved ejection fraction.</a> Circulation: Heart Failure. 7 (6), 935-944 (2014).</li>
<li>Shatat, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Kruppel-like+Factor+4+modulates+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Endothelial Kruppel-like Factor 4 modulates pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 50 (3), 647-653 (2014).</li>
<li>SPR-1000 Mouse Pressure Catheter. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000">https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000</a> (2019).</li>
<li>Tabima, D. M., Hacker, T. A., Chesler, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+right+ventricular+function+in+the+normal+and+hypertensive+mouse+hearts+using+admittance-derived+pressure-volume+loops%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Measuring right ventricular function in the normal and hypertensive mouse hearts using admittance-derived pressure-volume loops.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 299 (6), 2069-2075 (2010).</li>
<li>Skuli, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+deletion+of+hypoxia-inducible+factor-2alpha+%28HIF-2alpha%29+alters+vascular+function+and+tumor+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Endothelial deletion of hypoxia-inducible factor-2alpha (HIF-2alpha) alters vascular function and tumor angiogenesis.</a> Blood. 114 (2), 469-477 (2009).</li>
<li>Harvard Inspira Advanced Safety Ventilator User's Manual. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.">http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.</a> (2019).</li>
<li>LabChart. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE">https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE</a> (2019).</li>
<li>Marius, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definitions+and+diagnosis+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension.</a> Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), 42-50 (2013).</li>
<li>Ciuclan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+murine+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (10), 1171-1182 (2011).</li>
<li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li>
<li>Chen, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+systolic+pressure+measurements+in+combination+with+harvest+of+lung+and+immune+tissue+samples+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Right ventricular systolic pressure measurements in combination with harvest of lung and immune tissue samples in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (71), 50023(2013).</li>
<li>Ma, Z., Mao, L., Rajagopal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+characterization+of+rodent+models+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic characterization of rodent models of pulmonary arterial hypertension.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), 53335(2016).</li>
<li>Chen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Berberine+attenuates+hypoxia-induced+pulmonary+arterial+hypertension+via+bone+morphogenetic+protein+and+transforming+growth+factor-%CE%B2+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Berberine attenuates hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension via bone morphogenetic protein and transforming growth factor-β signaling.</a> Journal of Cellular Physiology. , (2019).</li>
<li>Bueno-Beti, C., Hadri, L., Hajjar, R. J., Sassi, Y. The Sugen 5416/Hypoxia mouse model of pulmonary arterial hypertension. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBueno-Beti%2C+C+%22Experimental+Models+of+Cardiovascular+Diseases.+Methods+in+Molecular+Biology.+vol+1816%22">Experimental Models of Cardiovascular Diseases. Methods in Molecular Biology. vol 1816</a>. Ishikawa, K. , Humana Press. New York, NY. (2018).</li>
</ol>

Les auteurs n'ont rien à révéler.

L'intubation trachéale est la première étape importante pour les chirurgies à poitrine ouverte. La méthode classique d'intubation trachéale pour les petits animaux, comme les rats ou les souris, consiste à faire une incision en forme de T sur la trachée et à insérer directement des tubes trachéaux de type Y dans la trachée. Dans la pratique, nous constatons que cette méthode n'est pas facile pendant le fonctionnement. Le tube trachéal de type Y est trop grand pour les petits animaux et forme un angle avec la trachée. Ain...

L'hypertension artérielle pulmonaire (HAP) est un trouble cardio-pulmonaire chronique et grave avec élévation de la pression artérielle pulmonaire (PAP) et de la pression ventriculaire droite (RVP) qui est causée par la prolifération cellulaire et la fibrose des petites artères pulmonaires 1. Les cathéters pulmonaires d'artère, également appelés cathéters de cygne-Ganz2,sont couramment employés dans la surveillance clinique de RVP et de PAP. En outre, un système de surveillance sans fil PAP a été utilisé cliniquement3,4,5. Pour imiter la maladie pour l'étude chez la souris, un environnement hypoxique est employé pour simuler des manifestations cliniques humaines de PAH6. Dans l'évaluation du PAP chez les animaux, les grands animaux sont relativement faciles à surveiller à travers les cathéters d'artère pulmonaire utilisant la même technique que pour les sujets humains, mais les petits animaux tels que les rats et les souris sont difficiles à évaluer en raison de leur petite taille du corps. La mesure hémodynamique du système ventriculaire droit chez la souris est possible avec un cathéter de taille ultrasmall 1 Fr7. Une méthode pour mesurer RVP et PAP chez les souris a été rapportée dans la littérature8,9, mais la méthodologie manque d'une description détaillée. RVP et PAP sont plus difficiles à mesurer que la pression ventriculaire gauche en raison des différences anatomiques entre les systèmes cardiaques gauche et droit.
Pour obtenir les paramètres PAP et RVP dans la même souris, nous décrivons une approche basée sur la chirurgie de la poitrine ouverte pour les mesures hémodynamiques du cœur droit, sa validation avec des souris saines et HAP, et comment éviter de générer des données artificielles pendant la poitrine ouverte compliquée chirurgie. Bien que cette technique soit mieux réalisée par un chirurgien bien formé, elle a l'avantage d'être en mesure d'évaluer PAP et RVP dans la même souris.

<table><tbody><tr><td>2,2,2-tribromoéthanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T48402-5G</td><td>Pour l’anesthésie Contrôleur de</td></tr><tr><td>température animale</td><td>Physitemp Instruments, Inc.</td><td>TCAT-2LV</td><td>Pour le contrôle de la température</td></tr><tr><td>Pince à dissection</td><td>Fine Science Tools, Inc.</td><td>11274-20</td><td>Pour la chirurgie</td></tr><tr><td>Gemini Cautery System</td><td>Gemini</td><td>GEM 5917</td><td>Pour la chirurgie</td></tr><tr><td>Cathéter intraveineux (22G)</td><td>BD angiocath</td><td>381123</td><td>Pour l’intubation</td></tr><tr><td>LabChart 7.3</td><td>ADInstruments</td><td>Pour l’analyse</td><td></td> des données</tr><tr><td>Système d’éclairage</td><td>lumineux Olympus</td><td></td><td>Pour la chirurgie</td></tr><tr><td>Cathéter Mikro-Tip</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>SPR-1000</td><td>Pour la mesure de la pression</td></tr><tr><td>Millar Pressure-Volume Systems</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>MVPS-300</td><td>Pour la mesure de la pression</td></tr><tr><td>Contrôleur O2 et chambre d’hypoxie</td><td>Biospherix</td><td>ProOx 110</td><td>Pour l’hypoxie chronique</td></tr><tr><td>Système d’acquisition de données PowerLab</td><td>ADInstruments</td><td>PowerLab 16/30</td><td>Pour l’enregistrement des données</td></tr><tr><td>Ciseaux</td><td>Outils de science fine, Inc.</td><td>14084-08</td><td>Pour</td></tr><tr><td>la chirurgie Ventilateur pour petits animaux</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Mini-Vent 845</td><td>Pour la chirurgie</td></tr><tr><td>Stéréomicroscope</td><td>Olympus</td><td>SZ61</td><td>Pour la chirurgie</td></tr><tr><td>Bande de chirurgie</td><td>3M</td><td></td><td>Pour la chirurgie</td></tr><tr><td>Enzyme Terg-a-zyme Sigma-Aldrich</td><td></td><td>Z273287-1EA</td><td>Pour le nettoyage du cathéter</td></tr></tbody></table>

Évaluation hémodynamique invasive pour le système ventriculaire droit et l'hypertension artérielle pulmonaire induite par l'hypoxie chez les souris

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

L'hypertension artérielle pulmonaire (HAP) est un trouble cardio-pulmonaire chronique et grave. Les souris sont un modèle animal populaire utilisé pour imiter cette maladie. Cependant, l'évaluation de la pression ventriculaire droite (RVP) et de la pression d'artère pulmonaire (PAP) demeure techniquement provocante chez les souris. RVP et PAP sont plus difficiles à mesurer que la pression ventriculaire gauche en raison des différences anatomiques entre les systèmes cardiaques gauche et droit. Dans cet article, nous décrivons une méthode de mesure hémodynamique de coeur droit stable et sa validation utilisant des souris saines et de PAH. Cette méthode est basée sur la chirurgie à poitrine ouverte et le soutien de la ventilation mécanique. Il s'agit d'une procédure compliquée par rapport aux procédures thoraciques fermées. Tandis qu'un chirurgien bien formé est exigé pour cette chirurgie, l'avantage de cette procédure est qu'elle peut produire des paramètres de RVP et de PAP en même temps, ainsi c'est une procédure préférable pour l'évaluation des modèles de PAH.

Le cathéter transducteur de pression a été inséré dans le ventricule droit (figure 3A) à travers un tunnel élargi par une aiguille de 25 G, et une forme d'onde RVP typique (figure 3C) a été obtenue. Le cathéter a été continuellement ajusté et lentement avancé et maintenu dans le même axe que l'artère pulmonaire tout en passant par la valve pulmonaire (Figure 3B). Lorsque le capteur ...

Ici, nous présentons un protocole pour effectuer une évaluation hémodynamique invasive du ventricule droit et de l'artère pulmonaire chez les souris utilisant une approche de chirurgie à coffre ouvert.

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

Ce protocole est une évaluation hémodynamique basée sur la chirurgie thoracique ouverte et il est utile pour l’évaluation ventriculaire droite et pulmonaire de pression artérielle chez les petits animaux tels que les souris. L’avantage de cette procédure est qu’elle peut générer à la fois des paramètres VP et PAP en même temps. Il est donc préférable pour les évaluations des modèles pah.Commencez par mettre en place l’équipement pour la chirurgie. Faire tremper le cathéter transducteur sous pression dans 0,9 % salin à température ambiante pendant au moins 30 minutes avant l’expérience hémodynamique. Ensuite, connectez le cathéter à un système de volume de pression.Calibrez le transducteur de pression en transformant le bouton d’étalonnage à zéro et 25 millimètres de mercure pour envoyer un signal de pression de vérification au logiciel d’acquisition de données, puis configurez le réglage d’étalonnage. Tournez le bouton en transducteur et ajustez la soupape d’équilibre à zéro ligne de base. Installez un microscope stéréo standard, une table chirurgicale pour petits animaux à température contrôlée et un système d’éclairage léger pour la microchirurgie.Une fois que la souris est correctement anesthésiée, retirez la fourrure de la poitrine et du cou à l’aide d’un rasoir et d’une lotion d’épilation. Fixez la souris en position supine sur la table chirurgicale à température contrôlée. Après s’être assuré que l’anesthésie est en vigueur, faire une incision midline sur la peau du cou.Disséquer le muscle squelettique à l’aide de forceps incurvés et exposer la trachée. Effectuez l’intubation par la bouche avec un cathéter intraveineux de gaine de calibre 22, confirmant que le tube est dans la trachée avec des forceps. Connectez le tube à un ventilateur pour petit animal et fixez-le pour la ventilation à l’aide de ruban adhésif.Ensuite, faire une incision de midline sur la peau de la poitrine et disséquer soigneusement le muscle thoracique à l’aide d’un outil de cautérisation. Couper le sternum à l’aide de ciseaux à travers le milieu, et exposer la cavité thoracique. Assurez-vous d’éviter tout saignement à l’aide de l’outil cautérisation.Exposez le ventricule droit avec des rétracteurs, puis insérez le cathéter transducteur de pression trempé saline à travers un petit tunnel créé avec une aiguille de calibre 25 dans le ventricule droit pour mesurer la pression ventriculaire droite, ou RVP. Tenez le câble de cathéter et traversez la valve pulmonaire d’une manière coaxiale avec l’artère pulmonaire. Observez la forme d’onde de pression et obtenez une pression artérielle pulmonaire stable ou un signal PAP.Ensuite, enregistrez les données hémodynamiques à l’aide du logiciel d’acquisition de données. Retirez soigneusement le cathéter du bon système cardiaque et placez-le dans une seringue d’un millilitre contenant une solution enzymatique digestive de 1 %. Ce protocole a été utilisé avec succès pour obtenir des formes d’onde RVP et PAP chez la souris en insérant un cathéter transducteur de pression dans le ventricule droit et l’artère pulmonaire.Afin d’éviter de générer des données artificielles, des segments avec du bruit ont été exclus de l’analyse des données et des corrections ont été apportées si le niveau zéro du cathéter avait dérivé. RVP et PAP ont été mesurés chez les souris avec l’hypoxie chronique induite, et les résultats ont été comparés à ceux obtenus d’un groupe témoin. Pap systolique, PAP diastolique, PAP moyen, et pression systolique ventriculaire droite ont été tous sensiblement augmentés dans le groupe chronique d’hypoxie.La chose la plus importante à retenir est d’insérer le cathéter transducteur de pression dans le ventricule droit avec soin, en s’assurant d’éviter les dommages au cathéter et de confirmer la forme d’onde RVP lisse apparaît sur l’écran.

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Un protocole spécifique et rapide à la fois étudier la fonction cardiaque droite, une inflammation des poumons, et la réponse immunitaire est décrit comme un outil d'apprentissage. Vidéo et chiffres décrivent la physiologie et de techniques de microdissection dans une équipe organisée approche qui est adaptable pour être utilisé pour les petites et grandes études taille.

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Cet article fournit un protocole pour l'évaluation échocardiographique de la taille du ventricule droit et l'hypertension pulmonaire chez la souris. Les applications comprennent la détermination du phénotype et évaluation de série en modèles transgéniques et de souris induite par la toxine de myocardiopathie et une maladie vasculaire pulmonaire.

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Surveillance hémodynamique invasive d’artère aortique et pulmonaire hémodynamique dans un modèle Animal grand de SDRA

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Ici, nous fournissons une approche utile pour étudier le mécanisme de l'échec ventriculaire droit. Une approche plus pratique et plus efficace de la constriction d'artère pulmonaire est établie utilisant des instruments chirurgicaux faits en interne. En outre, des méthodes pour évaluer la qualité de cette approche par l'échocardiographie et le cathétérisation sont fournies.

Induction de l'échec ventriculaire droit par constriction pulmonaire d'artère et évaluation de la fonction ventriculaire droite chez les souris

Le présent protocole décrit la caractérisation échocardiographique de la morphologie et de la fonction ventriculaires droites dans un modèle d’hypertension artérielle pulmonaire chez le rat.

Évaluation échocardiographique complète de la fonction du ventricule droit dans un modèle d’hypertension artérielle pulmonaire chez le rat

Ce protocole fournit une procédure étape par étape pour l’exécution de l’administration de plusieurs doses de bolus intraveineux et la surveillance hémodynamique invasive chez la souris. Les chercheurs peuvent utiliser ce protocole pour le dépistage futur de composés thérapeutiques pour l’hypertension artérielle pulmonaire.

Dosage multiple de bolus intraveineux et évaluation hémodynamique invasive dans un modèle d’hypertension artérielle pulmonaire induite par l’hypoxie chez la souris

La présentation de méthodes détaillées pour l’évaluation de la fonction du ventricule droit améliorera la qualité et la fiabilité de la recherche sur l’hypertension pulmonaire, offrant un cadre solide pour les études futures et améliorant la reproductibilité entre les différents laboratoires.

Évaluation de la fonction ventriculaire droite dans des modèles expérimentaux d’hypertension artérielle pulmonaire

Découvrez l'évaluation hémodynamique invasive du ventricule droit et de l'artère pulmonaire chez la souris par chirurgie à thorax ouvert. Cette méthode permet la mesure simultanée des pressions pour l'étude de l'hypertension artérielle pulmonaire.

Évaluation hémodynamique invasive pour le système ventriculaire droit et lhypertension artérielle pulmonaire induite par lhypoxie chez les souris (Vidéo) | JoVE Journal

Évaluation hémodynamique invasive pour le système ventriculaire droit et l'hypertension artérielle pulmonaire induite par l'hypoxie chez les souris

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