Standardisierung einer nicht-tödlichen Methode zur Charakterisierung des Fortpflanzungsstatus und der Larval-Entwicklung von Süßwassermuscheln (Bivalvia: Unionida)

Unser Protokoll standardisiert Methoden für die Probenahme der Kiemen von gravid Süßwassermuscheln und charakterisiert die verschiedenen Stadien der Larvenentwicklung und stellt gleichzeitig eine Online-Datenbank für die Datenübermittlung und Erforschung des Gravidity Almanac zur Verfügung. Die Technik ist nicht tödlich und hat keinen wesentlichen Einfluss auf die Fähigkeit einer weiblichen Muschel, nach der Probenahme der Kiemen gravid zu bleiben, daher kann die Methode sowohl auf gemeinsame als auch auf geschützte Arten angewendet werden. Diese Methode kann auf Organismen angewendet werden, die in den Bivalvia-Familien Hyriidae, Margaritiferidae und Unionidae gekennzeichnet sind und in Süßwasserökosystemen auf allen Kontinenten außer der Antarktis vertrieben werden.

Es ist wichtig, Muscheln mit Sorgfalt zu öffnen, Standortinformationen zu sammeln und sicherzustellen, dass die Daten ordnungsgemäß gesammelt werden. Wenn Identifikationen fragwürdig sind, sollte man Fotos machen und sich an die entsprechenden Experten wenden. Beginnen Sie mit dem Sammeln von lebenden Muscheln aus dem Feld mit taktilen visuellen Methoden.

Bewerten Sie die weibliche Gravidity durch visuelle Inspektion entweder während oder nach der Sammlung, indem Sie die Ventile vorsichtig öffnen, gerade genug, um nach innen zu schauen und zu sehen, ob die Kiemen aufgeblasen sind. Wenn Sie ein konserviertes Exemplar aus einem Museum verwenden, führen Sie eine visuelle Inspektion durch, indem Sie die Ventile öffnen und die Kiemen inspizieren. Um den Kiemengehalt zu beproben, bereiten Sie ein 1,5-Milliliter-Mikrozentrifugen-Sammelrohr aus Kunststoff mit etwa einem Milliliter Wasser oder Ethanol vor, je nachdem, wie schnell die Auswertung erfolgen wird.

Packen Sie eine sterile 30-Spur-Kegelspitze auf einer 10-Milliliter-Spritze aus, schrauben Sie die Kappe ab, um die Nadel freizulegen, und drücken Sie den Griff der Spritze nach unten, sodass sich der Stopfen an der Null-Milliliter-Linie befindet. Nehmen Sie das gravid Weibchen auf und hebeln Sie die beiden Ventile vorsichtig mit den Daumenspitzen auf. Verwenden Sie die Nadelspitze, um sanft ein einzelnes Wasserrohr der aufgeblasenen Beutelkiemen zu durchdringen, und schaufeln Sie dann den Kiemeninhalt vorsichtig mit der abgeschrägten Spitze der Nadel heraus.

Bewahren Sie sie zur späteren Auswertung in dem vorbereiteten Mikrozentrifugenrohr auf. Zeichnen Sie relevante Informationen auf, z. B. die Identifizierung von Gattungsarten, Informationen zum Sammelort und den Gravitationsstatus auf dem Datenblatt, und zeichnen Sie eine eindeutige Kennung auf jedem Sammelbehälter auf, um genaue Datensätze während des Transports sicherzustellen. Richten Sie die Muschel richtig aus, um das richtige Ventil für die Identitätsprüfung zu fotografieren, legen Sie es fest, und nehmen Sie das Foto auf, um sicherzustellen, dass das beschriftete Probenrohr in das Bild aufgenommen wird.

Um den Kiemeninhalt zu bewerten, übertragen Sie sie in eine Petrischale und füllen Sie den Boden der Schale mit Wasser. Wirbeln Sie die Schale vorsichtig, um Denkinhalt in der Mitte für eine konzentriertere Ansicht der Probe zu sammeln. Legen Sie die Petrischale unter ein Seziermikroskop, um die Probe zu bewerten, und machen Sie, wenn möglich, ein Foto der Probe unter dem Mikroskop.

Zeichnen Sie die Ergebnisse auf, deren Entwicklungsstadien in jeder Kiemenprobe vorhanden sind. Wenn die Weibchen Larven in mehreren Entwicklungsstadien brüten, melden Sie jede Entwicklungsphase, die in einer bestimmten Probe beobachtet wird. Wenn voll entwickelte Glochidie identifiziert werden und Ethanol nicht zur Konservierung verwendet wurde, bewerten Sie ihre Lebensfähigkeit, indem Sie einem Teiltröpfchen der Kiemenprobe einen Kristall aus Natriumchlorid hinzufügen.

Viable Glochidia reagiert, indem sie ihre Ventile öffnet und schließt oder sie einfach aus einer offenen Position schließt. Melden Sie alle salzgeprüften Glochidie mit einem T am Ende der Bezeichnung, wenn Daten aufgezeichnet werden. Um die Daten zu melden, greifen Sie auf die FMGA-Seite oder die mobile App zu und zeichnen Sie die Ergebnisse im Dateneingabeformular mithilfe von Dropdown-Menüs und Texteingabefeldern auf.

Wenden Sie sich für große bereits vorhandene Datensätze an die Autoren für die Vorlagentabelle. Geben Sie die aufgezeichneten Daten unter den entsprechenden Spaltenüberschriften ein, wobei zu berücksichtigen ist, dass jede Zeile in der Kalkulationstabelle Beobachtungen einer Kiemenprobe von einer Gravitationsperson darstellt, und senden Sie dann die Ergebnisse, und sie werden der FMGA-Datenbank hinzugefügt, nachdem sie von einem Administrator validiert wurden, der den Sammler kontaktieren kann, um weitere Details oder Fotos anzufordern. Die FMGA-Datenbank stellt alle übermittelten Informationen zusammen und ermöglicht es dem Benutzer, zeitliche Gravitationsdaten für alle Arten in der Datenbank zu visualisieren.

Die Süßwassermuschel Gravidity Almanac ist ein Forschungswerkzeug, das entwickelt wurde, um die Sammlung von Gravidity-Daten zu standardisieren und gleichzeitig zukünftige Forschungs-, Konservierungs- und Wiederherstellungsbemühungen zu erleichtern. Das Kiemen-Sampling-Protokoll wurde durch Tagging und Rückeroberung von Weibchen in monatlichen Abständen während des ganzen Jahres bewertet. Obwohl die Stichprobengrößen in der Studie artenübergreifend ungleich sind, unterstreichen die Ergebnisse die vorteilhaften und praktischen Anwendungen dieses Protokolls.

Der Gravitationskalender für Villosa lienosa zeigt, dass gravid weibchen, die voll entwickelte Glochidie brüten, in fast jedem Monat des Jahres gefunden wurden, außer im August, als nur Weibchen gefunden wurden, die Eimassen brüten. Weibliche Hamiota australis wurden im Juli, August und Dezember nicht gravid gefunden. Ein größerer Anteil der Weibchen brutierte im Januar und Februar sowie im Oktober und November voll entwickelte Glochidie.

Es wurden keine Individuen von Elliptio pullata gefunden, die voll entwickelte Glochidie brüten, obwohl Weibchen von Mai bis Juni Eiermassen brüten. Nur ein Strophitus williamsi Weibchen wurde gefunden und dreimal zurückerobert. Dieses Weibchen wurde gefunden, das im März voll entwickelte Glochidie brütet, nicht gravid im Mai, berichtete gravid im Juni, und brutende Eier im August.

Gravid Weibchen von Villosa vibex Brut voll entwickelte Glochidia wurden zwischen Februar und Juni gefunden. Süßwassermuscheln sind eine stark gefährdete Gruppe von Organismen. Diese Methode ist wichtig, weil sie eine nicht tödliche Möglichkeit bietet, die reproduktiven Eigenschaften gefährdeter Arten zu bewerten.

Es ist wichtig, Muscheln mit Vorsicht zu behandeln. Umweltbedingungen wie Wassertemperatur und Strömungsläufe können im Feld gemessen werden, um zu bestimmen, welche Bedingungen Laich- und Larvenentwicklung in Süßwassermuscheln auslösen. Die Zusammenstellung von zeitlichen Gravitationsdaten für alle Arten von Süßwassermuscheln kann Studien in Epidemiologie, glochidialer Morphologie, Lebensgeschichte, Phylogenetik, Vermehrung und Translokation unterstützen.