Name: Beurteilung der Gedächtnisfunktion bei Pilocarpin-induzierten epileptischen Mäusen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 34 s
Description: Lernen Sie die Bewertung von Gedächtnisstörungen bei epileptischen Mäusen mit nicht-invasiven Verhaltensmethoden. Dieses Protokoll nutzt Objektort- und Erkennungstests zur Untersuchung kognitiver Defizite.

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Wir danken Dr. Jae-Min Lee für seine technische Unterstützung. Diese Arbeit wurde von der National Research Foundation of Korea (NRF) Von der koreanischen Regierung finanziert (NRF-2019R1A2C1003958, NRF-2019K2A9A2A08000167).

Die Autoren haben nichts zu verraten.

Diese Arbeit beschreibt experimentelle Verfahren zur Bewertung der kognitiven Funktion bei Mäusen mit chronischer Epilepsie. Viele verschiedene Verhaltenstestparadigmen werden verwendet, um Lern- und Gedächtnisfunktionen bei Mäusen18zu bewerten. Das Morris-Wasserlabyrinth, das Radialarmlabyrinth, das Y-Labyrinth, die kontextbezogene Angstkonditionierung und objektbasierte Tests sind die am häufigsten verwendeten Verhaltenstests und liefern zuverlässige Ergebnisse. Unter ihnen sind die NL-, NO- und...

Epilepsie ist eine chronische Erkrankung, die durch spontane wiederkehrende Anfälle1,2,3gekennzeichnet ist. Da sich wiederholende Anfälle strukturelle und funktionelle Anomalien im Gehirn verursachen können1,2,3, abnormale Anfallsaktivität kann zu kognitiver Dysfunktion beitragen, Die eine der häufigsten Epilepsie-assoziierten Komorbiditäten4,5,6. Im Gegensatz zu den chronischen Anfallsereignissen, die vorübergehend und vorübergehend sind, können kognitive Beeinträchtigungen im Leben epileptischer Patienten fortbestehen und ihre Lebensqualität verschlechtern. Daher ist es wichtig, die pathophysiologischen Mechanismen des epilepsieassoziierten kognitiven Rückgangs zu verstehen.
Verschiedene experimentelle Tiermodelle der Epilepsie wurden verwendet, um die Lern- und Gedächtnisdefizite im Zusammenhang mit chronischer Epilepsie7,8,9,,10,11,12zu demonstrieren. Zum Beispiel wurden häufig das Morris-Wasserlabyrinth, die kontextuelle Angstkonditionierung, Das Hole-Board, die neue Objektposition (NL) und die Tests zur neuartigen Objekterkennung (NO) verwendet, um Gedächtnisfunktionsstörungen bei der temporalen Lappenepilepsie (TLE) zu bewerten. Da der Hippocampus einer der primären Regionen ist, in denen TLE Pathologie zeigt, werden Verhaltenstests, die hippocampus-abhängige Gedächtnisfunktion bewerten können, oft bevorzugt ausgewählt. Da Anfälle jedoch eine abnorme Hippocampus-Neurogenese induzieren und zur Epilepsie-assoziierten kognitiven Abnahme beitragen können10, können Verhaltensparadigmen für tests die neuronale Funktion von Neugeborenen (d. h. räumliche Mustertrennung, PS)8,13 auch wertvolle Informationen über die zellulären Mechanismen von Gedächtnisstörungen bei Epilepsie liefern.
In diesem Artikel zeigen wir eine Batterie von Gedächtnistests, NL, NO und PS, für epileptische Mäuse. Die Tests sind einfach und leicht zugänglich und erfordern kein ausgeklügeltes System.

<table><tbody><tr><td>1 ml Spritze</td><td>Sung-shim</td><td></td><td>Verwenden Sie es mit der 26- oder 30-Gauge-Nadel</td></tr><tr><td>70% Ethanol</td><td>Duksan</td><td>UN1170</td><td>Spray zur Reinigung der Box und der Gegenstände</td></tr><tr><td>schwarzer Vorhang</td><td></td><td></td><td>Zur Vermeidung unnötiger visueller Hinweise</td></tr><tr><td>Cresylviolett</td><td>Sigma</td><td>C5042</td><td>Für Kryotome mit Kresylviolett-Färbung</td></tr><tr><td></td><td>Leica</td><td>E21040041</td><td>Für Gewebe Trennen</td></tr><tr><td>doppelseitiges Klebeband</td><td></td><td></td><td>Für die feste Platzierung der Objekte</td></tr><tr><td>DPX Montagemedium Sigma</td><td></td><td>06522</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol Serie</td><td>Duksan</td><td>UN1170</td><td>Make 100%, 95%, 90%, 80%, 70% Ethanol</td></tr><tr><td>Lösungen Bodenplatte mit schmalen Gittermustern</td><td>Leehyo-bio</td><td></td><td>Verhaltensexperimentiergerät, Plattengröße: 42,5 x 42,5 x 0,5 cm, Rastergröße: 2,75 x 2,75 cm</td></tr><tr><td>Bodenplatte mit breiten Gittermustern</td><td>Leehyo-bio</td><td></td><td>Behavioral Experiment Equipment, Plattengröße: 42,5 x 42,5 x 0,5 cm, Rastergröße: 5,5 x 5,5 cm</td></tr><tr><td>Illuminometer</td><td>TES Electrical Electronic Corp.</td><td>1334A</td><td>Zur Messung der Raumbeleuchtung (60 Lux)</td></tr><tr><td>Intensivstation</td><td>Thermocare</td><td>#W-1</td><td></td></tr><tr><td>Ketaminhydrochlorid</td><td>Yuhan</td><td>7003</td><td>Zur Betäubung der Maus für die transkardiale Perfusion</td></tr><tr><td>LED-Lampe</td><td>Lungo</td><td>P13A-0422-WW-04</td><td>Beleuchtung für die verhaltensbezogenen</td></tr><tr><td>Testraumobjekte</td><td></td><td></td><td>Gummipuppe, 50 ml Kunststofftube, Coplin-Glas aus Glas, T-Flasche aus Kunststoff, Glasflasche</td></tr><tr><td>offene Feldbox</td><td>Leehyo-bio</td><td></td><td>Verhaltensexperimentiergerät, Größe: 44 x 44 x 31 cm</td></tr><tr><td>Papiertuch</td><td>Yuhan-Kimberly</td><td>47201</td><td>Zum Trocknen von offenen Feldkästen und Gegenständen</td></tr><tr><td>verwenden Paraformaldehyd</td><td>Merck Millipore</td><td>104005</td><td>4% ige Lösung</td></tr><tr><td>herstellen Pilocarpinhydrochlorid</td><td>Sigma</td><td>P6503</td><td></td></tr><tr><td>Lineal</td><td></td><td></td><td>Verwenden Sie die Lokalisierung der Objekte in der offenen Feldbox</td></tr><tr><td>Scopolamin Methylnitrat</td><td>Sigma</td><td>S2250</td><td>Make 10X Stock</td></tr><tr><td>Smart System 3.0</td><td>Panlab</td><td></td><td>Video Tracking System</td></tr><tr><td>Stoppuhr</td><td>Junso</td><td>JS-307</td><td>Für die Messung der explorativen Aktivitäten von Mäusen</td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Sigma</td><td>S9378</td><td>Für die Kryoprotektion von Gewebeschnitten</td></tr><tr><td>Terbutalin-Hemisulfat-Salz</td><td>Sigma</td><td>T2528</td><td>Machen Sie 10X Stock-Videokamera</td></tr><tr><td>(CCD-Kamera)</td><td>Vision</td><td>VCE56HQ-12</td><td>Platzieren Sie die Kamera direkt über der offenen Feldbox</td></tr><tr><td>Xylazin (Rompun)</td><td>Bayer Korea</td><td>KR10381</td><td>Verwenden Sie, um die Maus für die transkardiale Perfusion zu betäuben</td></tr><tr><td></td><td>Xylol Duksan</td><td>UN1307</td><td>Für Kresylviolett-Färbung</td></tr></tbody></table>

beurteilung der gedächtnisfunktion bei pilocarpin-induzierten epileptischen mäusen

Assessment of Memory Function in Pilocarpine-induced Epileptic Mice

Kognitive Beeinträchtigung ist eine der häufigsten Komorbiditäten bei der temporalen Lappenepilepsie. Um epilepsieassoziierte kognitive Abnahme in einem Tiermodell der Epilepsie zu rekapitulieren, haben wir pilocarpinebehandelte chronische epileptische Mäuse generiert. Wir präsentieren ein Protokoll für drei verschiedene Verhaltenstests mit diesen epileptischen Mäusen: neuartige Objektposition (NL), neuartige Objekterkennung (NO) und Mustertrennungstests (PS), um Lernen und Gedächtnis für Orte, Objekte bzw. Kontexte zu bewerten. Wir erklären, wie man die Verhaltensvorrichtungen einstellt und experimentelle Verfahren für die NL-, NO- und PS-Tests nach einem Offenen Feldtest durchführt, der die basalen Bewegungsaktivitäten der Tiere misst. Wir beschreiben auch die technischen Vorteile der NL-, NO- und PS-Tests im Vergleich zu anderen Verhaltenstests zur Beurteilung der Gedächtnisfunktion bei epileptischen Mäusen. Schließlich besprechen wir mögliche Ursachen und Lösungen für epileptische Mäuse, die während der Einarbeitungssitzungen keinen guten Kontakt zu den Objekten herstellen, was ein entscheidender Schritt für erfolgreiche Gedächtnistests ist. Daher bietet dieses Protokoll detaillierte Informationen darüber, wie Epilepsie-assoziierte Gedächtnisstörungen mit Mäusen bewertet werden können. Die NL-, NO- und PS-Tests sind einfache, effiziente Assays, die für die Bewertung verschiedener Arten von Gedächtnis bei epileptischen Mäusen geeignet sind.

Abbildung 1zeigt einen allgemeinen Versuchsplan und ein allgemeines Setup für die Bewertung der kognitiven Funktion. Sechs Wochen nach der Einführung von pilocarpine-induzierten akuten Anfällen wurden Mäuse den NL-, NO- und PS-Tests in dieser Reihenfolge unterzogen, die durch 3 Tage Ruhezeiten zwischen den Tests getrennt waren (Abbildung 1A). Für den NL-Test wurden während der Einarbeitungssitzung (F1) zwei identische Objekte im offenen Feld platziert, und am nä...

Dieser Artikel stellt experimentelle Verfahren zur Beurteilung von Gedächtnisstörungen bei pilocarpine-induzierten epileptischen Mäusen vor. Dieses Protokoll kann verwendet werden, um die pathophysiologischen Mechanismen der Epilepsie-assoziierten kognitiven Abnahme zu studieren, die eine der häufigsten Komorbiditäten bei Epilepsie ist.

Beurteilung der Gedächtnisfunktion bei Pilocarpin-induzierten epileptischen Mäusen

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal ...

Kognitive Beeinträchtigung ist eine der häufigsten Komorbiditäten bei der temporalen Lappenepilepsie. Wir werden ein Protokoll vorstellen, das beschreibt, wie Gedächtnisstörungen mit einem Mausmodell der chronischen Epilepsie bewertet werden können. Neuartige Objektposition, neuartige Objekterkennung und Mustertrennungstest sind einfache und kurze Essen, die die Tiere minimal belasten können.Es macht diesen Test optimal für die Bewertung der Gedächtnisfunktion bei epileptischen Mäusen, ohne zusätzliche Auslöser für einen spontanen wiederkehrenden Anfall. Zunächst können Sie die Tiere mindestens 30 Minuten lang in ihren heimischen Käfigen an das schwache Licht anklimatisieren. Bereiten Sie ein offenes Feld vor.Am ersten Tag der Gewöhnung, Ort und Lichtmessgerät in der Mitte des offenen Feldkastens. Und stellen Sie die Beleuchtungsstärke auf 60 Lux ein. Um die Motoraktivität jeder Maus auszuwerten, verwenden Sie die Video-Tracking-Software für das Tierverhalten.Sobald die Video-Tracking-Software geöffnet ist, kalibrieren Sie die Größe des offenen Feldfeldes. Legen Sie dann vorsichtig eine experimentelle Maus in den offenen Feldkasten mit Blick auf die Wand. Öffnen Sie das Smart-Programm, klicken Sie auf Angepasst und Akzeptieren.Klicken Sie auf Bildquelle. Nachdem Sie die installierte Kamera ausgewählt haben, drücken Sie die Set-Taste. Passen Sie die Kameraauflösung an und drücken Sie die Taste "Akzeptieren".Ziehen Sie nach unserem Kalibrierungsklick die Computermaus, um die Boxgröße anzupassen. Und füllen Sie die innere Box Größe. Klicken Sie auf Zonendefinition, um die Größe der einzelnen Kontrollkästchen zu speichern und anzupassen, und klicken Sie dann auf Speichern.Die rote Box ist der Tracked-Bereich, so dass es in die innere Box-Größe passt, während die rosa Box passt die Kontur. Drücken Sie die Erkennungseinstellung. Klicken Sie auf Snapshot, und drücken Sie Test starten, um zu überprüfen, ob ein bestimmter Bereich nachverfolgt wird, und legen Sie dann den Test stoppen und dann "Akzeptieren" vor.Klicken Sie auf Zeiteinstellungen. Legen Sie nach Auswahl der voreingestellten Zeit die Latenzzeit auf drei Sekunden Erfassungszeit auf 15 Minuten fest, und drücken Sie Akzeptieren. Drücken Sie Subjects, um den Codenamen festzulegen.Klicken Sie auf Scheduler, um die vorhandenen Details zu löschen und den Codenamen, der in Denantragstellern geändert wurde, auf Sitzung 1 zu ziehen. Klicken Sie auf Datenerfassung. Klicken Sie auf die Schaltfläche Aufzeichnen und auf Start.Legen Sie die Maus in die Box und verfolgen Sie sie für 15 Minuten. Nach 15 Minuten Aufnahme kehren Sie die Maus in ihren heimischen Käfig zurück. Stellen Sie das helle Licht wieder her.Klicken Sie auf Datenerfassung. Und klicken Sie dann auf Active Analysis Drag code name Sham in das Fenster daneben. Klicken Sie auf die Schaltfläche "Berichtsdefinitionen".Klicken Sie auf Neue Berichtsdefinitionen, dann Zusammenfassungsbericht und drücken Sie Akzeptieren. Klicken Sie in Zone auf Betreffname und Entfernung, und senden Sie ihn an die Seite. Drücken Sie dann die Schaltfläche Akzeptieren.Klicken Sie auf das rote Häkchen und klicken Sie auf Analysieren. Überprüfen Sie die Ergebnisse. Wiederholen Sie am zweiten Tag und am dritten Tag die Gewöhnungssitzungen.Am vierten Tag führen Sie die Einarbeitungssitzung durch. Platzieren Sie jede Maus im abgesetzten Licht drei Minuten lang im leeren offenen Feld. Nach dieser kurzen Gewöhnung bringen Sie das Tier in seinen heimischen Käfig zurück.Legen Sie zwei identische Objekte, Gummipuppen, in die offene Feldarena, fünf Zentimeter von den angrenzenden Wänden entfernt. Beheben Sie die Objekte mit doppelseitigem Klebeband. Führen Sie die experimentelle Maus in den offenen Feldkasten ein, der der Wand am weitesten von den Objekten zugewandt ist.Erlauben Sie eine kostenlose Erkundung für 20 Minuten und messen Sie manuell die Zeit, die für die Erkundung beider Objekte mit zwei Stoppfeldern aufgewendet wird. Quantifizieren Sie nicht als Sondierungszeit, irgendwelche Verhaltensweisen, in denen die Tierschnarbe nicht auf das Objekt zeigen. Sobald die Maus die minimale Erkundungszeit von 30 Sekunden erreicht hat, beenden Sie für die beiden Objekte die F1-Sitzung und übertragen Sie die Maus in ihren Heimatkäfig.Wenn die Maus die Objekte innerhalb der 20 Minuten 30 Sekunden lang nicht untersuchen kann, entfernen Sie die Maus aus dem geöffneten Feldfeld, und schließen Sie sie von weiteren Sitzungen aus. Führen Sie am fünften Tag die neue Testsitzung für den Objektstandort durch. Übertragen Sie die Maus für drei Minuten in den offenen Feldbereich zur Reha.Dann kehren Sie es in seinen heimischen Käfig zurück. Bewegen Sie ein Objekt in die diagonale Position, und platzieren Sie die experimentelle Maus mit Blick auf die Wand des offenen Feldfeldes. Erlauben Sie 10 Minuten kostenlose Erkundung und Aufnahme mit einem Video-Tracking-System.Messen Sie die Zeit, die für die Erkundung jedes Objekts mit zwei Stoppfeldern aufgewendet wird. Als nächstes übertragen Sie die Maus in ihren Heimischen Käfig, indem Sie den Schwanz greifen. Drei Tage lang die Maus mit freiem Zugang zu Essen und Wasser ruhen lassen.Am neunten Tag führen Sie eine 15-minütige Gewöhnungssitzung für eine Maus durch. Am 10. Tag führen Sie die kurze Reha-Sitzung für drei Minuten durch. Dann geben Sie es vorübergehend in seinen heimischen Käfig zurück.Legen Sie zwei identische Objekte, 50 Milliliter Kunststoffrohre gefüllt mit 40 Milliliter Wasser, in das offene Feld, fünf Zentimeter von den angrenzenden Wänden entfernt. Führen Sie die experimentelle Maus in das offene Feldfeld ein und zeigen Sie die Wand am weitesten von den Objekten. Da die Maus den beiden verschiedenen Objekten im NO Test ausgesetzt wird, einem 50 Milliliter Kunststoffrohr gefüllt mit 40 Milliliter Wasser, und einem Glas Coplin Gläser Glas.Gegengewicht das Objekt während der Eingewöhnungssitzung, indem zwei identische Objekte, Glas Coplin Gläser Gläser, für die Hälfte der Tiere in der Gruppe. Dann mit zwei verschiedenen Objekten, ermöglichen freie Erkundung für 20 Minuten und manuell messen Sie die Zeit, die für die Erkundung beider Objekte mit zwei Stoppfeldern verbracht. Sobald die Maus die minimale Ablaufzeit von 30 Sekunden für beide Objekte erreicht hat, beenden Sie die Einarbeitungssitzung.Führen Sie am nächsten Tag die neuartige Objekterkennungstestsitzung durch. Übertragen Sie die Maus zunächst für drei Minuten auf das offene Feld, um sich zu rehabilitieren, und kehren Sie sie dann in ihren heimischen Käfig zurück. In fünf Zentimetern Entfernung von den angrenzenden Wänden, ersetzen Sie das Rohr mit einem Glas Coplin Gläser Glas, so dass die Mäuse zu einem Rohr und ein Glas Coplin Gläser Glas ausgesetzt werden.Für die Hälfte der Tiere, die während der ersten Einarbeitungssitzung Gläsern aus Glas glasiert wurden, ersetzen Sie das Glas Coplin Glas glas durch ein 50 Milliliter Plastikrohr, das mit 40 Milliliter wassergefüllt ist. Damit die Mäuse einem Rohr und einem Glas Coplin Glas glasiert werden. Erlauben Sie 10 Minuten kostenlose Erkundung während der Aufnahme mit einem Video-Tracking-System.Dann schnappen Sie sich den Schwanz der experimentellen Maus und übertragen Sie ihn in ihren Heimischenkäfig. Drei Tage lang und lassen Sie die Maus mit freiem Zugang zu Essen und Wasser ruhen. Öffnen Sie für die NL-Analyse das Startprogramm Customized and Accept.Klicken Sie auf Bildquelle. Nachdem Sie die installierte Kamera ausgewählt haben, drücken Sie die Set-Taste. Nur die Kameraauflösung und drücken Sie Akzeptieren.Klicken Sie auf Die Schaltfläche Videos Ordner öffnen, um das gespeicherte Video zu öffnen. Sehen Sie sich das gespeicherte Video 10 Minuten lang ab dem Zeitpunkt an, zu dem die Maus eintritt, und messen Sie die Zeit, die für die Erkundung jedes Objekts aufgewendet wird. Am 15. Tag wurde die erste Einarbeitungssitzung für den PS-Test durchgeführt.Das ist für die Maus auf das offene Feld Bereich für die Rehabitulierung, für drei Minuten. Platzieren Sie die Bodenplatte mit dem breiten Raster und zwei identischen Objekten. Kunststoff-T-Flaschen gefüllt mit 50 Milliliter Wasser, in der offenen Feldbox.Dann führte die experimentelle Maus in den offenen Feldkasten mit Blick auf die Wand am weitesten von den Objekten. Lassen Sie eine kostenlose Erkundung für 20 Minuten. Und messen Sie manuell die Zeit, die sie mit dem Erkunden beider Objekte verbringen, indem Sie zwei Stoppfelder verwenden.Sobald die Maus die minimale Erkundungszeit von 30 Sekunden für beide Objekte erreicht hat, stoppen Sie die erste Einarbeitungssitzung und übertragen Sie das Tier in seinen Heimischenkäfig. Um den Objekt- und Mustertrennungstest für die Hälfte der Tiere auszugleichen, platzieren Sie die Bodenplatte mit dem breiten Gitter und zwei identischen Objekten, Glasflaschen für das Gegenausgleichsexperiment in der offenen Feldbox. Führen Sie dann die experimentelle Maus in die offene Feldbox ein und lassen Sie eine kostenlose Erkundung für 20 Minuten zu.Sobald die Maus die minimale Erkundungszeit von 30 Sekunden für die beiden Objekte erreicht hat, stoppen Sie die erste Einarbeitungssitzung und übertragen Sie das Tier in seinen Heimischenkäfig. Am nächsten Tag, übertragen Sie die Maus auf das Feld Bereich für die Reha für drei Minuten. Und dann zurück in seinen heimischen Käfig.Als nächstes führen Sie die zweite Eingewöhnungssitzung mit zwei Glasflaschen auf dem schmalen Gitterboden durch. Für die Ausgleichsexperimente führen Sie die zweite Einarbeitungssitzung mit zwei t-Kolben durch, die mit Wasser auf schmalem Gitterboden gefüllt sind. Führen Sie am nächsten Tag die Mustertrennungstestsitzung durch.Übertragen Sie die Maus drei Minuten lang in den offenen Feldbereich ohne Objekt zur Rehabilitierung. Und dann zurück in seinen heimischen Käfig. Als nächstes legen Sie den mit Wasser und einer Glasflasche gefüllten T-Kolben auf den schmalen Gitterboden.Machen Sie die T-Flaschen mit Wasser gefüllt, in neuartigen Objekt. Für Ausgleichsexperimente legen Sie jedes Objekt auf den schmalen Gitterboden, um die Glasflasche in diesem Fall zu einem neuartigen Objekt zu machen. Dann für die experimentelle Maus auf das offene Feld für 10 Minuten zu erkunden.Erlauben Sie 10 Minuten kostenlose Erkundung und Aufzeichnung mit einem Video-Tracking-System. Schnappen Sie sich den Schwanz der Versuchsmaus und übertragen Sie ihn in ihren Heimischenkäfig. Messen Sie die Zeit, die für die Erkundung jedes Objekts aufgewendet wird, mit zwei Stoppfeldern.Und berechnen Sie das Diskriminierungsverhältnis, das der Differenz der Zeit entspricht, die zwischen dem romanischen Objekt und dem vertrauten Objekt geteilt wird, geteilt durch die Gesamtzeit, die die beiden Objekte untersucht. Sechs Wochen nach der Einführung von Pilokarin induzierte akute Anfälle. Mäuse werden dem neuartigen Objektortungstest unterzogen.Neuartiger Objekterkennungstest und Mustertrennungstest. In dieser Reihenfolge durch drei Tägige Ruhezeiten zwischen den Tests getrennt. Es wurde bestätigt, dass es keine signifikante Präferenz zwischen den beiden gemeinsam präsentierten Objekten gab.Die epileptischen Mäuse zeigten eine signifikante Reduktion des Diskriminierungsverhältnisses in den drei Tests im Vergleich zu Sham-Kontrollen. Nachweis einer Beeinträchtigung des räumlichen Gedächtnisses. Die Messung der motorischen Aktivität zeigte einen signifikanten Anstieg bei epileptischen Tieren.Während die Motivation, die Objekte zu erforschen, zwischen Schein- und epileptischen Tieren vergleichbar war. Schließlich wurde der Tod der Hippocampus-Zellnachlagnacheinem nach einem Pilokarin-induzierten Status epilepticus mittels kristallvioletter Färbung ausgewertet, um den anfallinduzierten neuronalen Schaden zu bestätigen. Die mit Pilokarin behandelten Tiere demonstrierten pyknotische Zellen im und im CA3-Unterfeld des Hippocampus, im Gegensatz zu den Sham-Kontrollen.Count up in NO und PS-Test ist entscheidend, um inhärente Verzerrungen zu reduzieren, die in diesem gerätespezifischen Objekt möglich sind. Darüber hinaus zeigen chronische epileptische Mäuse offene erhöhte Angst, die mehrere Gewöhnungsschritte für genug Anerkennung Nation zu den experimentellen Einstellungen erfordert. Zeitänderungen wie die Anzahl oder die Position der Objekte in unserem Protokoll können die Speichertests bereitstellen.Was nützlich sein kann, um komplexe Mechanismen der Epilepsie im Zusammenhang mit kognitiven Rückgang zu erarbeiten. Nachdem Sie sich dieses Video angeschaut haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie verschiedene Aspekte der Gedächtnisstörung bei Epilepsie bewerten können.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Induktion des Status epilepticus (SE) bei Mäusen durch systemische Verabreichung von Pilocarpin zur Modellierung der Temporallappenepilepsie.

Systemische Pilocarpin-Behandlung: Mausmodell der Temporallappenepilepsie

Dieses Video zeigt die elektroenzephalographische (EEG) Aufzeichnung von epileptischen Anfällen bei epilepsieinduzierten Ratten. Eine Ratte mit Elektroden, die in den ventralen Hippocampus implantiert sind, wird an das EEG-Aufzeichnungssystem angeschlossen und in eine Plexiglaskammer gelegt. Die Ratte kann sich frei bewegen, während die Gehirnaktivität aufgezeichnet wird, um das Auftreten von Anfällen zu überwachen.

Elektroenzephalographische Aufzeichnung epileptischer Anfälle bei Epilepsie-induzierten Ratten

Quelle: Soukupová, M., et al. Mikrodialyse von exzitatorischen Aminosäuren während EEG-Aufzeichnungen bei frei beweglichen Ratten. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video zeigt die Beurteilung der extrazellulären exzitatorischen Neurotransmitterspiegel bei Ratten mit chronischer Epilepsie-Induktion. Nach der Implantation einer Mikrodialysesonde in das Gehirn und der Bestätigung des Fehlens von Anfällen mittels Elektroenzephalographie (EEG) wird extrazelluläre Flüssigkeit gesammelt, um erhöhte...

Beurteilung der exzitatorischen Neurotransmitterspiegel bei chronischen Epilepsie-induzierten Ratten

Das Ziel dieses Protokolls ist es, die räumliche Wahrnehmung bei Nagetieren zu untersuchen. Das Doppel-H-Wasserlabyrinth ist ein neuartiger Test, der besonders nützlich ist, um die verschiedenen Komponenten des Lernens, der Konsolidierung und des Gedächtnisses sowie das Zusammenspiel der Gedächtnissysteme aufzuklären.

Die Doppel-H Maze: A Robust Verhaltenstest für Lernen und Gedächtnis in Nagetiere

Diese Arbeit demonstriert die Leistung von Akupunktur, Epilepsiemodellen und der Analyse des Schlafes bei Nagetieren. Das Verfahren der Akupunktur und die Identifizierung von Akupunkturpunkten werden beschrieben. Pilocarpin oder Pentylentetrazol (PTZ) wird verwendet, um Epilepsie zu induzieren. Für die Schlafanalyse werden Elektrokortikogramm (ECoG), Elektromyogramm (EMG), Gehirntemperatur und Bewegungsaktivitätsaufzeichnungen verwendet.

Manipulation von Epileptiforme Electrocorticograms (ECoGs) und Schlaf bei Ratten und Mäusen durch Akupunktur

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode des chemischen anzünden mit Pentylenetetrazole und bietet einem Mausmodell der Epilepsie. Dieses Protokoll kann auch zur Anfälligkeit für Beschlagnahme Induktion und Pathogenese nach epileptischen Anfällen bei Mäusen zu untersuchen.

Pentylenetetrazole-induzierten anzünden-Maus-Modell

Dieses Manuskript beschreibt eine Methode des Verursachens Status Epilepticus durch systemische Pilocarpin Injektion und spontane wiederkehrende Anfälle mit lebenden Tieren, die mit einem drahtlosen Telemetrie video und Elektroenzephalogramm System zu überwachen. Dieses Protokoll kann genutzt werden, für das Studium der pathophysiologische Mechanismen der chronischen Epilepsie, Epileptogenesis und akute Anfälle.

Das Pilocarpin Modell der Temporallappen-Epilepsie und EEG Monitoring mittels Radiotelemetrie System bei Mäusen

Hier beschreiben wir eine Methode zur in Vivo Mikrodialyse Aspartat- und Glutamat Freisetzung im ventralen Hippocampus von epileptischen und nicht-epileptischen Ratten, in Kombination mit EEG-Ableitungen zu analysieren. Extrazelluläre Konzentrationen von Aspartat- und Glutamat können mit den verschiedenen Phasen der Erkrankung korreliert werden.

Mikrodialyse exzitatorischen Aminosäuren während der EEG-Ableitungen in Ratten frei beweglich

Dieser Bericht beschreibt die Methoden zur Erstellung eines Modells der Temporallappenepilepsie, das auf dem elektrischen Anzünden transgener VGAT-Cre-Mäuse basiert. Entzündete VGAT-Cre-Mäuse können nützlich sein, um die Ursachen von Epilepsie zu bestimmen und neue Therapien zu untersuchen.

Präparation und Implantation von Elektroden für elektrisch anzündende VGAT-Cre-Mäuse zur Erstellung eines Modells für Temporallappenepilepsie

Die intrazerebrale Infektion mit dem Theiler-murinen Enzephalomyelitis-Virus (TMEV) in C57BL/6-Mäusen repliziert viele der frühen und chronischen klinischen Symptome der viralen Enzephalitis und der anschließenden Epilepsie bei menschlichen Patienten. Dieser Artikel beschreibt die Virusinfektion, die Symptome und die Histopathologie des TMEV-Modells.

Ein Modell für Epilepsie infektiöser Ätiologie am Beispiel des Theiler-Maus-Enzephalomyelitis-Virus

Krampfanfälle wirken sich negativ auf verschiedene Funktionen und die Lebensqualität aus. Planaria-Würmer wurden unterschiedlichen Konzentrationen von Chemokonvulsiva ausgesetzt, um ihre Anfallsphänotypen und ihre störende Motilität zu bewerten. Diese Studie schlägt vor, Planarienwürmer als Modell für akute Anfälle beim Menschen zu verwenden und ist von Bedeutung für die Entwicklung von Medikamenten für Epilepsie.

Planarien als Tiermodell für experimentelle akute Anfälle

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Beurteilung der Gedächtnisfunktion bei Pilocarpin-induzierten epileptischen Mäusen

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