Ein Bild geführte transapical Mitral Valve Leaflet Puncture Modell der kontrollierten Volumenüberlastung von Mitral Regurgitation in der Ratte

Mitralregurgitation ist eine häufige Herzklappenerkrankung, die zu Herzinsuffizienz führt. Dieses Ratten-MR-Modell kann dazu beitragen, unser Verständnis der zugrunde liegenden Mechanismen der Herzinsuffizienz zu fördern. Dieses Modell kann verwendet werden, um MR in einem schlagenden Herzen zu induzieren, das die Hämodynamik imitiert, die bei Patienten mit dieser Klappenläsion beobachtet wurde, und dieses Modell klinisch relevant zu machen.

Mikrochirurgie und Handhabungserfahrung helfen bei der Replikation dieses Protokolls und Vertrautheit mit echokardiographischer Bildgebung und Bildinterpretation sind Schlüsselaspekte für eine erfolgreiche Nadelplatzierung. Da es sich um eine bildgesteuerte Technik handelt, kann die visuelle Demonstration der Methoden beim Verständnis des Verfahrens helfen. Nach der Durchführung einer linken Thorakotomie nach Standardprotokollen in einer anästhesierten 350 bis 400 Gramm erwachsenen Sprague-Dawley Ratte, verwenden Sie eine 6-0 PROLENE Naht und Mikronadelhalter, um eine Geldbörsennadel auf den Scheitel punktgleich der linken Herzkammer zu platzieren.

Binden Sie vorsichtig die apikale Naht, um den Scheitelpunkt zu stabilisieren und legen Sie eine 23 Gauge Nadel mit Herzigkeit und mit einem Stopphahn am distalen Ende in die Mitte der Pursestring Naht und in die linke ventrikuläre Höhle gespült. Verwenden Sie eine Hand, um die Nadel stabil zu führen, verwenden Sie die andere Hand, um gleichzeitig die transösophageale Echosonde zu manipulieren, um eine optimale Echoansicht für die Visualisierung der Nadel zu erreichen. Mit Echtzeit-Ultraschallführung, bewegen Sie die Nadel in Richtung der ventrikulären Seite der vorderen Mitral-Broschüre.

Sobald die Nadelposition bestätigt ist, fördern Sie die Nadel in einer feinen Bewegung durch das Ventilblatt. Einmal durch die Packungsbeilage, ziehen Sie die Nadel in die linke ventrikuläre Kammer weg von der Mitralklappe und haben einen Assistenten einschalten Farbe Doppler Bildgebung, um MR Einstellung der Echosonde bei Bedarf zu bestätigen, um eine bessere Sicht zu erhalten. Sobald die MR bestätigt ist, ziehen Sie die Nadel vollständig aus der linken ventrikulären Höhle und binden Sie vorsichtig die Geldbörsestring-Nähte.

Dann verwenden Sie eine sterile Gaze, um Blut auf der Spitze und in der Brusthöhle zu absorbieren. Nach fünf bis zehn Minuten stabiler Herzfunktion verwenden Sie eine unterbrochene 4-0 Vicryl Naht, um die Rippen anzunähern, während die Isoflurane auf 2%Next reduziert werden, legen Sie ein Brustrohr in den sechsten interkostalen Raum ein und sichern Sie das Rohr an den sterilen Vorhängen, um ein versehentliches Eindringen des Rohres in die Brusthöhle zu vermeiden, und beenden Sie dann die Annäherung an die Rippen. Verwenden Sie eine kontinuierliche Naht, um die Muskelschicht mit dem Isofluran bei 1,5% zu schließen und die Hautschicht mit dem Isofluran bei 1%Verbinden Sie eine 10 Milliliter Luer Lock Ventil gekippt Spritze auf das Brustrohr und ableiten 10 bis 12 Milliliter Luft aus der Brusthöhle vor dem Entfernen des Rohres.

Sobald die Röhre entfernt ist, eine endgültige subkutane Dosis von Carprofen. Nach dem Ausschalten des Isoflurans, setzen Sie die mechanische Belüftung fort, während die Ratte von der Anästhesie entwöhnt und die Vitalzeichen überwacht. Zu Beginn der spontanen Atmung, schalten Sie die Beatmung aus, um die Fähigkeit der Ratte zu testen, eine solche Atmung und eine gute periphere Hohlraumsauerstoffsättigung aufrechtzuerhalten.

Sobald die Ratte in der Lage ist, periphere Kapillarsauerstoffsättigung ohne belüfteende zu halten, schneiden Sie die Verankerungsnähte an das Endotrachealrohr und extubieren Sie das Tier. Wenn die Ratte ambulant ist, übertragen Sie das Tier in einen sauberen Käfig mit minimaler Bettwäsche und überwachen Sie weiterhin die Vitalzeichen mit einem peripheren Kapillar-Sauerstoffsättigungsmonitor. Innerhalb von drei Stunden nach dem Aufwachen Buprenorphin verabreichen.

Zwei Wochen nach der Operation die anästhesierte Ratte in die rechte Dekubitusposition bringen und eine acht Megahertz 8-französische intrakardiale Ultraschallsonde mit einer kleinen Menge Gel, die auf die Spitze aufgetragen wird, in die Speiseröhre des Tieres einsetzen. Visualisieren Sie mithilfe der Farb-Doppler-Bildgebung in der Zweikammeransicht den linken Ventrikel und den linken Vorhof und messen Sie den Bereich des linken Atriums und des MR-Jets, um die Berechnung des MR-Strahlflächenanteils wie angegeben zu ermöglichen. Um die Fläche der regurgitanten Öffnung anzunähern, verwenden Sie den Außendurchmesser der Nadel, um die Fläche der 23-Spurnadel mit der Formel zu berechnen.

Erhalten Sie eine kontinuierliche Wellen-Doppler-Bildgebung mit dem Doppler-Gate an der Öffnung des regurgitanten Strahls und verfolgen Sie die Wellenform, um das Geschwindigkeitszeitintegral des regurgitanten Jets zu berechnen. Verwenden Sie die Formel, um das MR-Volumen zu schätzen. Drehen Sie dann die Echosonde seitlich im Uhrzeigersinn, um eine Pulswellen-Doppler-Bildgebung der Lungenvene zu erhalten und die systolischen und diastolischen Wellengeschwindigkeiten mit der Gleichung zu messen, um das Verhältnis zu berechnen.

In diesen Bildern kann die Richtung der Nadel, wie sie in die Mitralklappe eingeführt wird, beobachtet werden. Hierbei wird das Loch, das in der Mitralklappenbroschüre in einer repräsentativen Ratte hinterlassen wurde, zwei Wochen nach dem Eingriff explantiert. Nach zwei Wochen nach der Operation sind die Herzen von Ratten mit MR kugelförmig und stark erweitert und ein lebendiger MR-Jet ist mit einer durchschnittlichen Fläche von etwa 21 Quadratmillimetern und einer mittleren Geschwindigkeitszeit von etwa 40 Zentimetern sichtbar.

Der normalisierte MR-Anteil beträgt in der Regel etwa 42%, was nach den Richtlinien der American Society of Echocardiography als schwerwiegend gilt. Der Schweregrad des MR ist ausreichend, um eine Lungenflussumkehr mit einer Abnahme des systolischen/diastolischen Verhältnisses von etwa 0,9 zu Beginn auf etwa minus 0,7 nach zwei Wochen zu induzieren. Die Echtzeit-Bildgebung mit transösophagealer Echokardiographie und die Einführung einer Nadel in das schlagende Herz, um die Mitralbroschüre zu durchstechen, ist ein machbarer chirurgischer Eingriff, der gelehrt werden kann.

Unser Modell kann mit ventrikulären Kardiomyopathien kombiniert werden, um die Herzumgestaltung zu untersuchen und erleichtert die Untersuchung der Auswirkungen des frühen Beginns im Vergleich zum späten Beginn von MR auf den Herzumbau.