Verwendung eines murinen Modells psychosozialen Stresses in der Schwangerschaft als translational relevantes Paradigma für psychiatrische Störungen bei Müttern und Säuglingen

Unser Protokoll ist von Bedeutung, weil es ein neues Paradigma für die Bewertung der Auswirkungen von chronischem Stress, insbesondere psychosozialem Stress, auf die Schwangerschaftsergebnisse darstellt. In diesem Protokoll setzen wir schwangere Mäuse auf unvorhersehbare Weise verschiedenen psychosozialen Beleidigungen unterschiedlicher Art und Weise aus. Frühere Tiermodellparadigmen verwendeten körperliche Stressoren oder eine begrenzte Anzahl von Stressoren, die wiederholt verabreicht wurden, was nicht die Erfahrung von Frauen während der Schwangerschaft widerspiegelt.

Unser chronisches psychosoziales Stressmodell überwindet diese Einschränkungen. Diese Methode hat weitreichende Auswirkungen auf verschiedene Forschungsbereiche, einschließlich der psychischen Gesundheit von Müttern und der Forschung im Zusammenhang mit der entwicklung von Säuglingen, und im weiteren Sinne auf das Verständnis der Entwicklungsursprünge von Erwachsenenerkrankungen durch unerwünschte intrauterine Ereignisse. Bevor Sie mit jedem Stressor im CGS-Paradigma beginnen, bringen Sie die Mäuse der CGS-Gruppe aus dem Gehäuseraum in den für CGS vorgesehenen Raum.

Setzen Sie die Mäuse nach einem 11-tägigen Stressor-Regime, das vom Schwangerschaftstag 6,5 bis 17,5 verläuft, verschiedenen Stressoren aus. Um die Mäuse Fremdkörpern auszusetzen, verteilen Sie zufällig sechs Murmeln oder sechs Legos verschiedener Formen in einem sauberen statischen Käfig mit Mausbettung, ohne dass sich die Maus einschmiegt. Legen Sie alle Mäuse aus einem Heimkäfig für zwei Stunden in den statischen Käfig mit Fremdkörpern und bringen Sie die Mäuse dann in ihren Heimkäfig zurück.

Um die Mäuse dem Geruch von Raubtieren auszusetzen, legen Sie eine zentimeterdicke schmutzige Einstreu von weiblichen Ratten in einen sauberen statischen Käfig ohne Mauseinstreu oder Schmiedungen. Legen Sie alle Mäuse aus einem Heimkäfig für zwei Stunden in den statischen Käfig mit schmutziger Ratteneinstreu und bringen Sie die Mäuse dann in ihren Heimkäfig zurück. Um die Mäuse einer Käfigneigung auszusetzen, legen Sie alle Mäuse aus einem Hauskäfig in einen sauberen statischen Käfig mit Mausbettung, ohne dass sich die Maus einschmiegt.

Halten Sie den Käfig zwei Stunden lang in einem Winkel von 30 Grad an der Wand geneigt und bringen Sie die Mäuse dann in ihren Heimkäfig zurück. Um die Mäuse häufigen Einstreuwechseln auszusetzen, legen Sie alle Mäuse aus einem Hauskäfig in einen sauberen statischen Käfig mit Mauseinstreu, ohne dass sich die Maus einschmiegt. Bewegen Sie die Mäuse alle 10 Minuten vorsichtig in einen anderen sauberen Käfig und ersetzen Sie die Mausbettwäsche.

Nach zwei Stunden bringen Sie die Mäuse in ihren Heimkäfig zurück. Um die Mäuse der Einstreuentfernung auszusetzen, legen Sie alle Mäuse aus einem Hauskäfig zwei Stunden lang in einen leeren, sauberen statischen Käfig ohne Mauseinstreu oder Schmiedungen und bringen Sie die Mäuse dann in ihren Heimkäfig zurück. Um die Mäuse einer Bewegung auf einem Shaker auszusetzen, legen Sie alle Mäuse aus einem Hauskäfig in einen sauberen statischen Käfig mit Mausbettung, ohne dass sich die Maus einschmiegt.

Legen Sie den statischen Käfig zwei Stunden lang auf einen reziproken Laborschüttler, der auf 140 Hübe pro Minute eingestellt ist, und bringen Sie die Mäuse dann in ihren Heimkäfig zurück. Um die Mäuse über Nacht Lichtern auszusetzen, legen Sie alle Mäuse aus einem Hauskäfig in einen sauberen statischen Käfig mit Mausbettung, ohne dass sich die Maus einschmiegt. Lassen Sie die Lichter über Nacht eingeschaltet, um den dunklen Zyklus zu stören.

Am nächsten Tag bringen Sie die Mäuse in ihren Heimkäfig zurück. Um eine Maus neuen Käfigkameraden auszusetzen, bringen Sie die Maus in einen sauberen statischen Käfig mit Mausbettwäsche, der zwei unbekannte weibliche Mäuse enthält. Lassen Sie die Maus über Nacht mit den unbekannten Käfigkameraden im statischen Käfig.

Am nächsten Tag brachte die Maus mit vertrauten Käfigkameraden in ihren Heimatkäfig zurück. Um die Mäuse nasser Einstreu auszusetzen, sättigen Sie die Mauseinstreu in einem statischen Käfig mit sauberem Wasser, das bei 24 Grad Celsius gehalten wird. Legen Sie alle Mäuse aus einem Heimkäfig über Nacht in den statischen Käfig mit nasser Einstreu.

Am nächsten Tag bringen Sie die Mäuse in ihren Heimkäfig zurück. Nachdem das Stressor-Regime am Schwangerschaftstag 17.5 abgeschlossen ist, nehmen Sie alle experimentellen Mäuse unter, um sich auf die Geburt und die nachgelagerten Funktionsbewertungen vorzubereiten. Die Exposition schwangerer weiblicher Mäuse gegenüber CGS führt zu Veränderungen chronischer stressrelevanter Parameter, wie z. B. verringerung der Körpergewichtszunahme während der Schwangerschaft und erhöhte Nebennierengewichte in der frühen postpartalen Periode.

Wichtig ist, dass CGS-Muttertiere postpartale Anomalien und mütterliche neuroendokrine Funktionen aufweisen, was durch erhöhte Serumkorticosteronspiegel nach einer neuartigen akuten Beleidigung belegt wird. Darüber hinaus zeigen CGS-Muttertiere Veränderungen in der mütterlichen Versorgung, die sich in einer Zunahme des Fragmentierungsgrades der von den Welpen empfangenen mütterlichen Signale widerspiegeln. Die durchschnittliche Dauer von Leck- / Pflegeanfällen wird reduziert, während die mittlere Anzahl der Kämpfe erhöht wird, was auf zahlreiche kurze Episoden von Pflegeverhalten hinweist.

Die Saccharosepräferenz ist auch bei CGS-Dämmen im Vergleich zu Kontrolldämmen niedrig, was auf das Vorhandensein von Anhedonie hindeutet. Schließlich zeigen die CGS-Dämme auch ein erhöhtes angstbedingtes Verhalten, gemessen an einer Verringerung der Zeit, die in den offenen Quadranten des EZM im Vergleich zu Kontrolldämmen verbracht wird. Bei den Nachkommen führt die Exposition gegenüber CGS in utero zu einer verminderten Gewichtszunahme während der postnatalen Periode vom postnatalen Tag 7 bis 21, obwohl es bei der Geburt keine Unterschiede gibt.

Diese Verringerung der Körpergewichtszunahme ist bei Nachkommen beiderlei Geschlechts vorhanden. Bei diesem Verfahren ist es entscheidend, einen Zeitplan für die Erlangung von zeitlich festgelegten Schwangerschaften festzulegen und die gesamte Serie konsequent umzusetzen, variable unvorhersehbare psychosoziale Stressoren. Diese Technik kann helfen, interessante Fragen zu beantworten, wie zum Beispiel, kann mütterlicher psychosozialer Stress geschlechtsspezifische Auswirkungen auf die Plazentafunktion oder die Gehirnentwicklung und das Verhalten der Nachkommen verursachen?

Und können diese Effekte durch pharmakologische Intervention oder postnatale mütterliche Versorgung rückgängig gemacht oder modifiziert werden?