Name: Probenahme von subkutanem Fettgewebe beim Menschen mit einer Mini-Fettabsaugungstechnik (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-09-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 59 s
Description: Erfahren Sie die Mini-Fettabsaugungstechnik zur Probenahme von subkutanem Fettgewebe beim Menschen. Diese kostengünstige, fast schmerzfreie Methode ermöglicht mehrere Biopsien am selben Tag und unterstützt Studien zum Fettstoffwechsel.

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Die Autoren haben keine Mittel zu deklarieren.

HINWEIS: Das University of Stirling NHS, Invasive oder Clinical Research Committee genehmigte das unten beschriebene Biopsieverfahren. Alle Forschungsstudien, die dieses Verfahren anwenden, müssen von der entsprechenden unabhängigen Ethikkommission genehmigt werden. Der Biopsieteilnehmer muss eine formale Ausbildung in der beschriebenen Technik gemäß den Anforderungen seiner Einrichtung absolviert haben. Typischerweise beinhaltet dies die Beobachtung einer Demonstration der beschriebenen Fettgewebebiopsietechnik durch einen zertifizierten Arzt, gefolgt von einer überwachten Praxis. Sobald der Auszubildende 10 Praxis-Fettgewebebiopsien an freiwilligen Probanden unter Aufsicht durchgeführt hat, werden sie von einem zertifizierten Arzt untersucht, um eine gute Kenntnis und Praxis des Verfahrens sicherzustellen. Der zertifizierte Arzt stellt der Person dann ein unterschriebenes Untersuchungsformular zur Verfügung.
1. Vorbereitung des Laborraums
<ol><li>Stellen Sie sicher, dass das Labor über einen angemessen privaten Raum mit sauberen, abwischbaren, porenfreien Oberflächen und einem sauberen, bequemen (vorzugsweise porenfreien) Bett verfügt, auf dem der Teilnehmer Rückenlage liegen kann. Reinigen Sie alle erforderlichen Oberflächen für das Biopsieverfahren mit 70% Ethanolspray und sauberen Papiertüchern. Stellen Sie saubere Kissen oder Kissen zur Verfügung, um den Teilnehmer bei Bedarf zu unterstützen.</li>
	<li>Halten Sie geeignete scharfe Entsorgungsbehälter und Biogefahren-Abfallbeutel in Reichweite des Bereichs, in dem die Biopsie durchgeführt wird, und in Reichweite der Person, die die Biopsie vornimmt.</li>
	<li>Bereiten Sie die für den Eingriff erforderliche Ausrüstung vor und stellen Sie sie auf einem frisch gereinigten allgemeinen medizinischen Wagen auf, bevor der Teilnehmer im Labor eintrifft (Abbildung 1). Eine vollständige Liste der erforderlichen Verbrauchsmaterialien finden Sie in der Materialtabelle.</li>
</ol>2. Vorbereitung der Teilnehmer
<ol><li>Stellen Sie sicher, dass alle Teilnehmer vor dem Verfahren eine schriftliche Einverständniserklärung gemäß den von der unabhängigen Ethikkommission der Institution geforderten Protokollen abgeben. Bitten Sie die Teilnehmer außerdem, einen schriftlichen Fragebogen auszufüllen, um sicherzustellen, dass sie nicht allergisch gegen die im Verfahren verwendeten Materialien sind (nämlich Nickel, Chrom, Lokalanästhetikum, Jod, Schalentiere und Pflaster).</li>
	<li>Bestätigen Sie die Identität des Teilnehmers. Stellen Sie sicher, dass der Teilnehmer das durchzuführende Verfahren und mögliche Nebenwirkungen wie Blutergüsse, Schmerzen und Infektionen versteht (Tabelle 1). Holen Sie zusätzlich zur zuvor eingeholten schriftlichen Einverständniserklärung eine mündliche Einwilligung ein.</li>
	<li>Beschreiben Sie dem Teilnehmer, wie das Verfahren durchgeführt wird, wobei der Schwerpunkt darauf liegt, wie sich die Verabreichung des Anästhetikums und die Biopsie selbst anfühlen. Stellen Sie sicher, dass der Teilnehmer mit dem Fortfahren vertraut ist. HINWEIS: Die lokale subkutane Betäubung erzeugt ein stechendes Gefühl, ähnlich einem Bienenstich von kurzer Dauer. Viele Teilnehmer berichten von der Narkoseverabreichung als dem unangenehmsten Teil der Technik. Sobald das Anästhetikum wirksam ist, sollte der Teilnehmer während der Biopsie nicht mehr als ein leichtes Ziehen verspüren.</li>
	<li>Stellen Sie sicher, dass der Teilnehmer keine Allergien gegen das Lokalanästhetikum (insbesondere vom Aminoamid-Typ, wenn Lidocain oder ähnliches verwendet wird), bestimmte Metalle (Nickel und Chrom) und Schalentiere (bei Verwendung von Lösungen auf Jodbasis) hat. Stellen Sie außerdem sicher, dass die Teilnehmer keine Form von gerinnungshemmenden Medikamenten einnehmen.</li>
	<li>Geben Sie dem Teilnehmer die Möglichkeit, bei Bedarf seine Blase zu entleeren, um sicherzustellen, dass er den Eingriff nicht unterbrechen muss oder übermäßige Beschwerden in Schritt 4.1 verspürt.</li>
</ol>3. Biopsieverfahren - Anweisungen für den Biopsienehmer
<ol><li>Sobald der Teilnehmer in Rückenlage liegt, identifizieren Sie die Biopsiestelle etwa 5-10 cm seitlich zum Nabel. HINWEIS: Wenn sich der Teilnehmer am selben Tag mehreren Biopsien unterziehen soll, identifizieren Sie für jede Biopsie Biopsiestellen auf gegenüberliegenden Seiten des Nabels. Dies gewährleistet einen maximalen Abstand zwischen den einzelnen Biopsiestellen.</li>
	<li>Hände mit Seife und warmem Wasser nach medizinischen Standardrichtlinien waschen4.</li>
	<li>Legen Sie die sterile Folie auf den gereinigten Wagen oder Arbeitsbereich und achten Sie darauf, nur die äußeren Kanten des Blattes zu berühren.</li>
	<li>Ziehen Sie sterile OP-Handschuhe mit der richtigen aseptischen Technik an. Lassen Sie den Assistenten den Rest der Ausrüstung so öffnen, dass sie auf die vorbereitete sterile Folie fällt, ohne die Ausrüstung zu berühren / zu kontaminieren. Stellen Sie sicher, dass der Assistent darauf achtet, Gegenstände nicht zu berühren, wenn er Werkzeuge aus ihrer sterilen Verpackung entfernt.</li>
	<li>Weisen Sie den Assistenten an, eine kleine Menge Lösung auf Jodbasis auf eine sterile Gaze (ohne die Gaze zu übersättigen) auf der Arbeitsfläche abzugeben.</li>
	<li>Sterilisieren Sie ca. 5-10 cm2 um die gewählte Biopsiestelle mit der sterilen Gaze und der Lösung auf Jodbasis. Stellen Sie sicher, dass die Haut in einer spiralförmigen Bewegung gereinigt wird, die sich von der vorgeschlagenen Biopsiestelle nach außen bewegt. Wiederholen Sie den Hautreinigungsvorgang zweimal. Entfernen Sie überschüssige Flüssigkeit (z. B. aus sterilem Bereich), indem Sie sie mit frischer steriler Gaze abwischen.</li>
	<li>Bestätigen Sie zusammen mit dem Assistenten mündlich den Inhalt des Lokalanästhesiefläschchens (2% Lidocain in diesem Protokoll) und dass dies innerhalb seines Verfallsdatums liegt. Weisen Sie den Assistenten an, die geöffnete Durchstechflasche kopfüber zu halten und 5 ml Lokalanästhetikum mit einer 21-G-Nadel in eine Spritze zu ziehen. Entsorgen Sie die Nadel in den scharfen Behälter und stellen Sie sicher, dass die Spritze frei von Luftblasen ist.</li>
	<li>Tragen Sie eine 26 G Nadel auf die Spritze auf und stoßen Sie Luftblasen aus. Drücken Sie sanft die Bauchhaut und das Fettgewebe ein und bewegen Sie es von der Bauchdecke weg. Führen Sie dann die Nadel horizontal in das Unterhautgewebe in einem Winkel von nicht mehr als 10° relativ zur Hautoberfläche ein.<ol><li>Ziehen Sie den Kolben der Spritze um weitere 0,5 ml heraus (um sicherzustellen, dass sich die Nadel nicht in einem Blutgefäß befindet). Wenn Blut in der Spritze erscheint, ziehen Sie die Nadel zurück und führen Sie sie in einem anderen Winkel wieder ein.</li>
		<li>Heben Sie einen Blasen von 2-4 mm Durchmesser an, um den Einführungsbereich zu betäuben.</li>
		<li>Führen Sie die Nadel in das Unterhautgewebe ein und verabreichen Sie ~ 1 ml Lidocain in einem fächerförmigen Muster (Abbildung 2), wobei Sie darauf achten, den Kolben jedes Mal zurückzuziehen, bevor Sie das Anästhetikum injizieren.</li>
		<li>Entfernen und entsorgen Sie die 26-G-Nadel, führen Sie eine 21-G-Nadel auf die Spritze auf, stoßen Sie Luftblasen aus und verabreichen Sie die restlichen ~ 4 ml Lidocain in einem fächerförmigen Muster (Abbildung 2), wobei Sie darauf achten, den Kolben jedes Mal zurückzuziehen, bevor Sie das Anästhetikum injizieren.</li>
	</ol></li>
	<li>Warten Sie ca. 5 Minuten, bis das Lokalanästhetikum wirkt. Verwenden Sie ein steriles Skalpell, um den Biopsiebereich vorsichtig anzustoßen, um i) sicherzustellen, dass das Lokalanästhetikum wirksam geworden ist, und ii) die Grenzen des anästhesierten Bereichs zu identifizieren. Falls erforderlich, warten Sie ein oder zwei weitere Minuten und bewerten Sie es erneut.</li>
	<li>Sobald Sie überzeugt sind, dass das Lokalanästhetikum wirkt, kneifen Sie sanft die Haut und das Fettgewebe (wie in Schritt 3.8) und verwenden Sie ein steriles Skalpell, um eine kleine 1-2 mm Punktion in der Haut vorzunehmen. HINWEIS: Dies muss nur groß genug sein, um den Eintritt der 14-G-Nadel zu erleichtern, und muss klein genug sein, dass keine Naht erforderlich ist, um sie zu schließen. Es ist üblich, dass ab diesem Zeitpunkt Blutungen auftreten, die mit einem Stück steriler Gaze kontrolliert werden können.</li>
	<li>Tragen Sie zuerst eine 14-G-Nadel auf eine 5- oder 10-ml-Spritze auf. Führen Sie dann, während Sie die Haut und das Fettgewebe sanft kneifen, allmählich die Nadel durch die Punktion in das Fettgewebe etwa mittig im betäubten Bereich und in einem Winkel von nicht mehr als 10 ° relativ zur Hautoberfläche ein. HINWEIS: Für alle Fälle des Nadelvorschubs in Schritt 3.11 muss ein Spritzenwinkel von nicht mehr als 10° eingehalten werden.<ol><li>Saugen Sie an, indem Sie den Kolben bis etwa zur 2,5-ml-Marke zurückziehen. Nehmen Sie die Biopsie, indem Sie die Nadel in einer schnellen Hin- und Rückwärtsbewegung bewegen, um Fragmente des Fettgewebes zu schneiden. Drehen Sie Nadel und Spritze nach ca. 30 s um 90° und wiederholen Sie diesen Vorgang, um die Fettgewebefragmente aufzubrechen, die dann durch das Absaugen in die Spritze abgesaugt werden. HINWEIS: Andere Spritzengrößen können verwendet werden. Es ist wichtig, dass der Forscher eine Spritzengröße wählt, die sowohl einen guten Griff auf der Spritze als auch eine bequeme Aufrechterhaltung des Kolbeneinzugs zur Aufrechterhaltung des Vakuums ermöglicht. Es stehen Verriegelungsspritzen zur Verfügung, die das Vakuum aufrechterhalten, was die Nadelkontrolle verbessern und die wahrgenommenen Schwierigkeiten für den Biopsienehmer verringern kann 5.</li>
		<li>Entfernen Sie nach etwa 45-60 s Schritt 3.11.1 die Nadel und entleeren Sie den Spritzeninhalt auf eine Gazeschicht, die ein Wiegeboot bedeckt. Stellen Sie sicher, dass das Lumen der Nadel nach unten zeigt, um mögliche Blutspritzer zu vermeiden.</li>
		<li>Wiederholen Sie die Schritte 3.11.1 und 3.11.2 maximal 3 Mal. Überprüfen Sie, ob der Teilnehmer zufrieden ist, vor jeder Wiederholung des obigen Verfahrens fortzufahren.</li>
		<li>Weisen Sie bei der Durchführung der Schritte 3.11.1 und 3.11.2 den Assistenten an, die Proben für die Analyse/Lagerung zu verarbeiten und vorzubereiten (siehe Abschnitt 5).</li>
	</ol></li>
</ol>4. Verfahren nach der Biopsie
<ol><li>Sobald eine zufriedenstellende Probe (dh ~ 200 mg) Fettgewebe erhalten wurde, legen Sie 1-2 Schichten sterile Gaze über die Stichwunde, legen Sie dann einen Eisbeutel darüber und üben Sie etwa 10 Minuten lang festen Druck aus, um eine Hämostase zu induzieren.</li>
	<li>Wenn eine Hämostase aufgetreten ist, wischen Sie eine Lösung auf Jodbasis / getrocknetes Blut mit steriler Gaze ab und tragen Sie eine selbstklebende Wundauflage mit saugfähigem Pad auf die Stelle auf. Überprüfen Sie, ob sich der Teilnehmer wohl fühlt und geben Sie mündliche und schriftliche Anweisungen zur Nachsorge an der Biopsiestelle.<ol><li>Betonen Sie, dass die Teilnehmer in den nächsten Tagen wahrscheinlich einige Blutergüsse zeigen werden. Informieren Sie sie, dass dies erheblich sein kann, obwohl es durch den Eisbeutel in Schritt 4.1 minimiert wird und sich ohne dauerhafte Auswirkungen auflöst.</li>
		<li>Empfehlen Sie, dass die Teilnehmer, wenn sie nach Abklingen des Anästhetikums Beschwerden / Schmerzen verspüren, Analgetika wie Paracetamol gemäß den Anweisungen auf der Packung einnehmen, aber keine Analgetika einnehmen sollten, die gerinnungshemmende Aktivitäten haben (z. B. Ibuprofen oder Aspirin).</li>
		<li>Erklären Sie, dass Schwellungen, Rötungen oder Ausfluss von der Biopsiestelle Anzeichen einer Infektion sind. In dem unwahrscheinlichen Fall, dass diese Anzeichen oder Symptome auftreten, weisen Sie den Teilnehmer an, dringend ärztlichen Rat von einem Arzt oder einer örtlichen Unfall- und Notfallstation einzuholen. Informieren Sie den Teilnehmer, dass er, wenn er ärztlichen Rat einholt, auch das Forschungsteam benachrichtigen muss. HINWEIS: Als Forschungspersonal können weder der Biopsienehmer noch der Assistent medizinische Beratung oder Behandlung anbieten; Es ist jedoch wichtig, dass das Forschungsteam alle Fälle von Komplikationen, die sich aus dem Biopsieverfahren ergeben, kennt und aufzeichnet.</li>
		<li>Empfehlen Sie den Teilnehmern, Schwimmen oder übermäßig anstrengende Aktivitäten für 48 Stunden zu vermeiden, bis die Inzisionsstelle geschlossen ist.</li>
	</ol></li>
	<li>Entsorgen Sie alle gebrauchten scharfen und kontaminierten Materialien in dafür vorgesehene scharfe und / oder klinische Abfallbehälter.</li>
	<li>Reinigen Sie alle Oberflächen, die im Biopsieverfahren verwendet werden, mit 70% Ethanolspray und sauberen Papiertüchern. Legen Sie Einweg- und Nicht-Einweg-Einstreu in geeignete klinische Beutel zur Entsorgung bzw. Reinigung.</li>
</ol>5. Probenbearbeitung - Anleitung für den Assistenten
<ol><li>Verwenden Sie eine sterile Pinzette und 0,9% Kochsalzlösung, um die Fettgewebeprobe zu spülen, um sichtbare Verunreinigungen (z. B. Blut, Gefäß) zu entfernen. Dann wiegen Sie die Fettgewebeproben mit digitalen Waagen. Teilen Sie das Gewebe für die nachgeschaltete Analyse in entsprechend große Stücke und legen Sie es mit einer sterilen Pinzette in geeignete Aufbewahrungsröhrchen. Tauchen Sie die Röhrchen mit den Fettgewebebiopsien in flüssigen Stickstoff bei -190 °C, um sie einzufrieren, bis die Proben bei -80 °C gelagert sind. HINWEIS: Der Assistent muss die Probenverarbeitung so schnell wie möglich abschließen, in der Regel innerhalb von 3 Minuten nach der Probenaspiration, um eine mögliche Probenverschlechterung zu minimieren.</li>
</ol>

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<li>Mutter, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+frozen+and+RNALater+solid+tissue+storage+methods+for+use+in+RNA+expression+microarrays%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+genomics%22%5BJournal%5D)">Comparison of frozen and RNALater solid tissue storage methods for use in RNA expression microarrays.</a> BMC genomics. 5, 88(2004).</li>
<li>Coleman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+fat+grafting%3A+more+than+a+permanent+filler%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Structural fat grafting: more than a permanent filler.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 118, Suppl 3 108-120 (2018).</li>
</ol>

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte zu erklären.

Das beschriebene Protokoll und das zugehörige Video bieten einen Schritt-für-Schritt-Überblick über eine Mini-Fettabsaugungstechnik, um subkutane Fettgewebeproben aus dem Bauchbereich zu erhalten. Diese Forschungsgruppe hat im Laufe von 19 Monaten insgesamt 124 Biopsien ohne Nebenwirkungen bei den Teilnehmern durchgeführt. Das Verfahren ist sicher und mit einem minimalen Risiko für die Teilnehmer oder das Biopsieteam verbunden, sofern die beschriebenen Sicherheitsmaßnahmen befolgt werden. Die aseptische Technik (einschli...

Fettgewebe kann nützliche Informationen über die Stoffwechselfunktion des Menschen liefern. Menschliches subkutanes Fettgewebe ist leicht zugänglich. Eine Technik zur subkutanen Fettgewebeextraktion wurde erstmals Mitte der 80er Jahre beschrieben1; Seitdem wurde das ursprüngliche Protokoll verbessert, um die Ausbeute zu erhöhen und die Verträglichkeit der Studienteilnehmer zu verbessern. Subkutanes Fettgewebe kann von zahlreichen Stellen gewonnen werden, am häufigsten aus dem Glutei1 und Bauchbereich2. Proben aus letzteren können wünschenswerter sein, da sie wertvollere Informationen in metabolischen Krankheitskontexten liefern3.
Die subkutane Fettgewebebiopsie mit der Mini-Fettabsaugungsmethode kann sicher und effizient in einem nicht-klinischen Umfeld durchgeführt werden. Nach entsprechender Schulung durch einen zertifizierten Arzt und unter Verwendung strenger aseptischer Technik können Forscher diese Biopsien routinemäßig mit minimalem Risiko für Teilnehmer und Prüfärzte durchführen. Das Biopsieteam muss aus mindestens 2 Personen bestehen: der Person, die die Biopsie durchführt, und einem Assistenten.
Die für die Biopsie verantwortliche Person hat die Aufgabe, die Identität des Teilnehmers zu bestätigen, zu überprüfen, ob der Teilnehmer das Verfahren sicher durchlaufen kann (siehe Protokollschritte 2.1-2.4 unten), sicherzustellen, dass sich der Teilnehmer während des gesamten Verfahrens wohl fühlt, sicherzustellen, dass die sterile Technik während des gesamten Verfahrens beibehalten wird, das Verfahren durchzuführen und den Teilnehmer mit mündlichen und schriftlichen Nachsorgeverfahren zu versorgen. Die Aufgabe des Assistenten besteht darin, das gewonnene Fettgewebe für die spätere Analyse und/oder Lagerung zu handhaben und schnell zu verarbeiten. Der Assistent hilft auch, indem er die "nicht sterilen Hände" ist und sicherstellt, dass sich der Teilnehmer während des gesamten Verfahrens wohl fühlt. Der Zweck dieses Videos und Papiers ist es, das Schritt-für-Schritt-Biopsieverfahren zu beschreiben, um subkutanes Fettgewebe sicher aus dem Bauchbereich zu gewinnen.

<table><tbody><tr><td>Artikel: 14 G Nadel 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm</td><td>B Braun</td><td>4665473</td><td>Pro Biopsie: 1</td></tr><tr><td>Artikel: 21 G Nadel 21 G x 1 1/2" 0,8 mm x 38 mm</td><td>Terumo</td><td>AN*2138R1</td><td>Pro Biopsie: 2</td></tr><tr><td>Artikel: 26 G&nbsp; Nadel 26 G x 1/2" Mikrolanzennadel 0,45 mm x 13 mm</td><td>BD</td><td>303800</td><td>Pro Biopsie: 2</td></tr><tr><td>Artikel: 5 mL Spritze 5 mL Luer</td><td>DB Plastipak</td><td>302187</td><td>Pro Biopsie: 2</td></tr><tr><td>Artikel: Adhäsiver Wundverband Gegenüberliegender postoperativer Verband 9,5 x 8,5</td><td>Smith & </td><td>Neffe 6600709</td><td>Pro Biopsie: 1</td></tr><tr><td>Artikel: Steriles Einweg-Skalpell Einweg-Skalpell Sterile Klinge Nr. 10</td><td>Swann Morton</td><td>/0501</td><td>Pro Biopsie: 1</td></tr><tr><td>Artikel: Icepack BlueDot Wiederverwendbare Heiß-/Kältepackung 26,5 cm x 13,0 cm</td><td>NuCare</td><td>F711</td><td>Pro Biopsie: 1</td></tr><tr><td>Artikel: Antiseptikum auf Jodbasis Videne antiseptische Lösung</td><td>Ecolab Videne</td><td>3030440</td><td>Per Biopsie: q.s</td></tr><tr><td>Artikel: Lidocain 2% ohne Adrenalin Lidocain 2% Injektion 5 mL</td><td>B Braun</td><td>3558553</td><td>Pro Biopsie: 5 mL</td></tr><tr><td>Artikel: Unsterile Handschuhe Starguard sensitive puderfreie Nitrilhandschuhe</td><td>Starguard</td><td>SG-N-S</td><td>pro Biopsie: Paar</td></tr><tr><td>Artikel: Natriumchlorid 0,9% Natriumchlrid 0,9% w/v intravenöse Infusion BP</td><td>BBraun</td><td>S8004-5384</td><td>Pro Biopsie: Q.S.</td></tr><tr><td>Artikel: Stabilisierungslösung* RNAlater Stabilisierungslösung</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>AM7020</td><td>Pro Biopsie: q.s</td></tr><tr><td>Artikel: Sterile Pinzette Sterile Pinzette</td><td>Rocialle</td><td>RML109-006</td><td>Pro Biopsie: 1</td></tr><tr><td>Artikel: Sterile Mulltupfer Vliestupfer steril 7,5 x 7,5 cm</td><td>Prestige</td><td>1860</td><td>Pro Biopsie: 5</td></tr><tr><td>Artikel: Sterile Handschuhe Prestige weiches Vinyl sterile puderfreie medizinische Handschuhe</td><td>Prestige</td><td>S: P4301 M:P3302 L:P3301</td><td>Pro Biopsie: Paar</td></tr><tr><td>Artikel: Sterile Mikrozentrifugenröhrchen 1,5 mL sterile Mikrozentrifugenröhrchen</td><td>StarLab</td><td>I1415-5510</td><td>Pro Biopsie: q.s</td></tr><tr><td>Artikel: Steriles Blatt Papier glatt weiß 90 x 90 cm</td><td>Rocialle</td><td>RML 126-216</td><td>Pro Biopsie: 1</td></tr><tr><td>Artikel: Wägeschiffchen Rautenförmige Wägeschiffchen</td><td>Heathrow Scientific</td><td>HS1427C</td><td>Pro Biopsie: 1</td></tr><tr><td>* bezeichnet optionale Materialien</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

probenahme von subkutanem fettgewebe beim menschen mit einer mini-fettabsaugungstechnik

Human Subcutaneous Adipose Tissue Sampling Using a Mini-Liposuction Technique

Studien über Fettgewebe sind nützlich, um metabolische und andere Bedingungen zu verstehen. Menschliches subkutanes Fettgewebe ist zugänglich. Mit entsprechender Schulung und strikter Einhaltung der aseptischen Technik können subkutane Fettproben sicher und effizient in einem nicht-klinischen Umfeld von Forschern gewonnen werden. Nach der Verabreichung eines Lokalanästhetikums lateral zum Nabel wird eine 14 G-Nadel, die an einer 5- oder 10-ml-Spritze befestigt ist, durch die Haut in das Unterhautgewebe eingeführt. Unter Absaugen wird die Spritze in einer hin- und hergehenden Schnittbewegung bewegt, um Fragmente von Fettgewebe zu isolieren. Das Zurückziehen des Kolbens reicht aus, um sicherzustellen, dass Fettgewebefragmente durch die Nadel in die Spritze abgesaugt werden. Eine einzige Biopsie kann etwa 200 mg Gewebe sammeln. Diese Biopsietechnik ist sowohl für die Teilnehmer als auch für das Forschungspersonal sehr sicher. Nach der Biopsie können die Teilnehmer die meisten alltäglichen Aktivitäten wieder aufnehmen, obwohl sie Schwimmen und übermäßig anstrengende Aktivitäten für 48 Stunden vermeiden sollten, um übermäßige Blutungen zu vermeiden. Die Teilnehmer können sich innerhalb eines Tages sicher 2 Biopsien unterziehen, was bedeutet, dass die Technik in Vorher-Nachher-Akutinterventionsstudien angewendet werden kann.

Das beschriebene Fettgewebebiopsieverfahren ist eine effiziente und risikoarme Technik für Forscher, um subkutane Fettgewebeproben von menschlichen Freiwilligen zu erhalten. Wir führten 39 subkutane Fettgewebebiopsien mit dem beschriebenen Verfahren bei 11 gesunden, normalgewichtigen Frauen durch (Alter, 27,4 ± 3,3 Jahre; Body-Mass-Index (BMI), 22,6 ± 1,5 kg.m2). Alle Teilnehmer besuchten das Labor zwischen 07:00 und 10:00 Uhr nach einer 8-12-stündigen Fastenperiode. Die Probenausbeute mit diesem Fettgewebebio...

Das Manuskript und das zugehörige Video demonstrieren eine perkutane Biopsietechnik, um Proben von subkutanem Fettgewebe aus Bereichen um den Nabel zu gewinnen. Diese Methode ist eine risikoarme und effiziente Methode, um eine Reihe von Parametern (z. B. Gen- oder Proteinexpression, Enzymaktivität, Lipidgehalt) im Fettgewebe zu untersuchen.

Probenahme von subkutanem Fettgewebe beim Menschen mit einer Mini-Fettabsaugungstechnik

Studies on adipose tissue are useful in understanding metabolic and other conditions. Human subcutaneous adipose tissue is accessible. With appropriate ...

Diese Technik eignet sich besonders gut für jede Studie, die ein Vorher-Nachher-Studiendesign implementiert oder eine bestimmte Population charakterisieren möchte und keine übermäßigen Mengen an Körperpostgewebe erfordert. Die Hauptvorteile sind, dass die Technik relativ kostengünstig und nahezu schmerzfrei ist. Sie können mehrere Biopsien am selben Tag am selben Teilnehmer durchführen.Diese Technik kann zum Verständnis der Fettgewebephysiologie beitragen, insbesondere zum Verständnis von Krankheiten und Stoffwechselfunktionen. Stellen Sie zunächst sicher, dass das Labor über einen angemessen privaten Raum mit sauberen, abwischbaren, nicht porösen Oberflächen und einem sauberen, bequemen Bett verfügt, auf dem der Teilnehmer in Rückenlage liegen kann. Reinigen Sie dann mit einem 70% igen Ethanolspray und sauberen Papierhandtüchern alle erforderlichen Oberflächen für das Biopsieverfahren.Als nächstes platzieren Sie geeignete Einwegbehälter und Biohazard-Hüftbeutel in Reichweite des Bereichs, in dem die Biopsie durchgeführt wird, und der Person, die die Biopsie vornimmt. Bevor der Teilnehmer im Labor ankommt, richten Sie die für den Eingriff erforderlichen Geräte auf einem frisch gereinigten allgemeinen medizinischen Wagen ein. Nach Erhalt der schriftlichen Einverständniserklärung bitten Sie den Teilnehmer, einen schriftlichen Fragebogen auszufüllen, um sicherzustellen, dass er nicht allergisch auf Materialien reagiert, die in diesem Verfahren verwendet werden.Stellen Sie nach der mündlichen Bestätigung der Identität des Teilnehmers sicher, dass der Teilnehmer das durchzuführende Verfahren und mögliche sekundäre Nebenwirkungen wie Blutergüsse, Schmerzen und Infektionen versteht. Neben der schriftlichen Einverständniserklärung ist auch die mündliche Einwilligung des Teilnehmers einzuholen. Als nächstes beschreiben Sie dem Teilnehmer das Verfahren und betonen Sie, wie sich die Verabreichung des Anästhetikums und der Biopsie anfühlen kann.Stellen Sie außerdem sicher, dass der Teilnehmer mit dem Fortfahren vertraut ist. Stellen Sie erneut sicher, dass der Teilnehmer keine Allergien gegen das Lokalanästhetikum, bestimmte Metalle und Schalentiere hat und dass der Teilnehmer keine Form von gerinnungshemmenden Medikamenten einnimmt. Sobald der Teilnehmer in Rückenlage liegt, identifizieren Sie die Biopsiestelle etwa fünf bis 10 Zentimeter seitlich zum Nabel.Als nächstes waschen Sie die Hände mit Seife und warmem Wasser gemäß den üblichen medizinischen Richtlinien. Legen Sie ein steriles Blatt auf den sauberen Wagen oder Arbeitsbereich und achten Sie darauf, nur die Außenkanten des Blattes zu berühren. Ziehen Sie sterile OP-Handschuhe mit der richtigen aseptischen Technik an.Lassen Sie dann den Rest der Ausrüstung so öffnen, dass sie ohne Berührung oder Kontamination auf die vorbereitete sterile Folie fällt. Stellen Sie sicher, dass der Assistent die Gegenstände nicht berührt, wenn er sie aus der sterilen Verpackung nimmt. Als nächstes weisen Sie den Assistenten an, eine kleine Menge Jodlösung auf sterile Gaze zu dosieren.Desinfizieren Sie dann die Haut in einer spiralförmigen Bewegung, die sich von der vorgeschlagenen Biopsiestelle nach außen bewegt. Entfernen Sie überschüssige Flüssigkeit, falls vorhanden, durch Abwischen mit frischer steriler Gaze. Bestätigen Sie mündlich den Inhalt und das Verfallsdatum der Lokalanästhesiedurchstechflasche mit dem Assistenten.Weisen Sie dann den Assistenten an, die geöffnete Durchstechflasche kopfüber zu halten. Und mit einer 21-Gauge-Nadel fünf Milliliter Lokalanästhetikum in eine Spritze ziehen. Entsorgen Sie die Nadel in den scharfen Spin und stellen Sie sicher, dass die Spritze frei von Luftblasen ist.Als nächstes tragen Sie eine 26-Gauge-Nadel auf die Spritze auf und stoßen Sie alle Luftblasen aus. Dann kneifen Sie vorsichtig die Bauchhaut und das Fettgewebe, bewegen Sie es von der Bauchdecke weg und führen Sie die Nadel horizontal in das Unterhautgewebe in einem Winkel von nicht mehr als 10 Grad relativ zur Hautoberfläche ein. Als nächstes ziehen Sie den Kolben der Spritze und zusätzliche 0,5 Milliliter heraus.Wenn Blut in der Spritze erscheint, ziehen Sie die Nadel zurück und führen Sie sie in einem anderen Winkel wieder ein, dann heben Sie eine Blase von zwei bis vier Millimetern Durchmesser an, um den Einführungsbereich zu betäuben. Führen Sie die Nadel in das Unterhautgewebe und verabreichen Sie einen Milliliter Lidocain in einem fächerförmigen Muster. Entfernen und entsorgen Sie die 26-Gauge-Nadel.Tragen Sie dann eine 21-Gauge-Nadel auf die Spritze auf und verabreichen Sie die restlichen vier Milliliter Lidocain in einem fächerförmigen Muster. Nach fünf Minuten mit einem sterilen Skalpell den Biopsiebereich vorsichtig anstoßen, um sicherzustellen, dass das Lokalanästhetikum wirksam geworden ist, und die Grenzen des anästhesierten Bereichs identifizieren. Warten Sie dann ein oder zwei weitere Minuten und bewerten Sie erneut.Sobald Sie überzeugt sind, dass die Anästhesie funktioniert, kneifen Sie sanft die Haut und das Fettgewebe und machen Sie eine kleine Ein- bis Zwei-Millimeter-Punktion in der Haut. Als nächstes tragen Sie eine 14-Gauge-Nadel auf eine Fünf- oder 10-Milliliter-Spritze auf. Führen Sie dann, während Sie die Haut und das Fettgewebe vorsichtig kneifen, die Nadel durch die Punktion in das Fettgewebe ungefähr mittig im anästhesierten Bereich in einem Winkel von nicht mehr als 10 Grad relativ zur Hautoberfläche ein.Saugen Sie an, indem Sie den Kolben bis etwa zur 2,5-Milliliter-Marke zurückziehen. Dann sammeln Sie die Biopsie, indem Sie die Nadel in einer schnellen, rückwärts- und vorwärtsbewegung bewegen, um Fragmente des Fettgewebes zu schneiden. Drehen Sie nach 30 Sekunden die Nadel und die Spritze um 90 Grad und wiederholen Sie diesen Vorgang, um die Fragmente des Fettgewebes aufzubrechen, die dann durch Absaugen in die Spritze abgesaugt werden.Entfernen Sie nach etwa einer Minute die Nadel und entleeren Sie den Spritzeninhalt auf eine Gazeschicht, die ein abnehmendes Boot bedeckt, um sicherzustellen, dass das Lumen der Nadel nach unten zeigt, um mögliche Blutspritzer zu vermeiden. Wiederholen Sie das Verfahren der Biopsieentnahme maximal dreimal, wie gezeigt, und überprüfen Sie, ob der Teilnehmer zufrieden ist, bevor Sie den Vorgang jedes Mal wiederholen. Während Sie die zusätzlichen Proben sammeln, weisen Sie den Assistenten an, die zuvor gesammelten Proben für die Analyse oder Lagerung zu verarbeiten und vorzubereiten.Nach der Entnahme zufriedenstellender Proben ein bis zwei Schichten steriler Gaze über die Stichwunde legen. Dann legen Sie einen Eisbeutel und üben Sie etwa 10 Minuten lang Druck aus, um die Homöostase zu induzieren. Sobald die Homöostase stattgefunden hat, wischen Sie eine Lösung auf Jodbasis oder getrocknetes Blut mit steriler Gaze ab und tragen Sie eine selbstklebende Wundauflage mit einem saugfähigen Pad auf die Stelle auf.Nachdem Sie überprüft haben, dass sich der Teilnehmer wohl fühlt, geben Sie mündliche und schriftliche Anweisungen zur Nachsorge an der Biopsiestelle und betonen Sie, dass die Teilnehmer in den nächsten Tagen wahrscheinlich Blutergüsse aufweisen werden. Beseitigen Sie gebrauchte scharfe und kontaminierte Materialien in ausgewiesene scharfe oder klinische Abfallbehälter, reinigen Sie dann alle Oberflächen, die im Biopsieverfahren verwendet werden, mit 70% Ethanol und legen Sie Einweg- und Nicht-Einwegartikel in geeignete klinische Beutel oder Entsorgung bzw. Reinigung. In dieser Studie wurden 39 subkutane Fettgewebebiopsien bei 11 gesunden normalgewichtigen Frauen durchgeführt.Mit diesem Verfahren wurden durchschnittlich 192 Milligramm Probe erhalten. Die Wahl einer Biopsiestelle zu nahe am Nabel kann zu unnötig ausgedehnten Blutergüssen führen. Eine Liste der Komplikationen, die bei Teilnehmern nach Fettgewebebiopsien aufgetreten sind, ist hier zusammengefasst.Stellen Sie sicher, dass die Haut immer eingeklemmt ist, um zu vermeiden, dass die Nadel die tiefere Muskelschicht perforiert oder durch die andere Seite der Haut perforiert. Übung macht perfekt sicherstellen, dass das Training von einem ausgebildeten Arzt durchgeführt wird, bevor es an tatsächlichen Teilnehmern versucht wird. Und wenn Sie die Nadel einführen, um das Fettgewebe aufzubrechen, stellen Sie sicher, dass die Person, die die Biopsie durchführt, sicher genug ist, um die Probe aufzubrechen.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Durch die drastische und negative Zusammenhang zwischen Fettleibigkeit und andere Begleiterkrankungen, Forschung über die Rolle Fettgewebe spielt in Krankheit und die allgemeine Gesundheit gerechtfertigt ist. Wir stellen ein Protokoll für die Isolierung und Entfernung von Fettgewebe Depots ermöglicht die Untersuchung von Fettgewebe unter Verwendung von in situ und in vitro-Verfahren.

Lokalisierung, Identifizierung und Exzision Murine Fettgewebe Depots

Wir stellen die Techniken vor, die zur Isolierung der stromalen vaskulären Fraktion (SVF) aus inguinalen (subkutanen) und perigonadalen (viszeralen) Fettgewebsdepots der Maus erforderlich sind, um ihre Genexpression und kollagenolytische Aktivität zu beurteilen. Diese Methode umfasst die Anreicherung von Sca1-Stammzellen (ASCs) mithohem Fettgehalt durch immunomagnetische Zelltrennung.

Immunomagnetische Trennung von Fett Depot-spezifische Sca1<sup&gt; Hoch</sup&gt; Fettgewebe gewonnene Stammzellen (ASC)

Wir standardisierte eine abdominalen Fettgewebe Biopsie mit einer nicht-Diathermie-Methode unter örtlicher Betäubung durchgeführt. Drei Fälle von übermäßiger postoperative Blutungen aus 115 Operationen (2,61 %) aufgetreten. Wir schließen, dass eine abdominale Fettgewebe chirurgische Biopsie mit einer nicht-Diathermie-Methode sicher auf gesunden Männern angewendet werden kann.

Eine Technik zur subkutanen abdominalen Fettgewebe Biopsie über eine nicht-Diathermie-Methode

Dieses Papier soll eine schrittweise Anleitung zu sammeln verschiedene weißen Fettgewebe von Mäusen, die Fett Proben zu verarbeiten und RNA extrahieren zu präsentieren.

Maus Fettgewebe Erhebung und Verarbeitung für die RNA-Analyse

Die Unterscheidung von weiß und Beige Adipozyten aus Fettgewebe vaskulären Stammeltern trägt metabolische Verbesserungspotenzial bei Adipositas. Protokolle beschrieben für eine CD34 + CD31 + Endothelzellen losgelöst von menschlichen Fett und für eine spätere in-vitro- Erweiterung und Differenzierung in weiß und Beige Adipozyten. Mehrere downstream-Anwendungen werden diskutiert.

Isolation, Expansion und Adipogenen Induktion von CD34 + CD31 + Endothelial Zellen aus menschlichen Omentalis und subkutanem Fettgewebe

Hier präsentieren wir menschliche Fettgewebe enzymfreie Mikrofragmentierung mit einem geschlossenen Systemgerät. Diese neue Methode ermöglicht die Gewinnung von Submillimeter-Clustern von Fettgewebe, die für In-vivo-Transplantationen, In-vitro-Kulturen und weitere Zellisolation und -charakterisierung geeignet sind.

Human Adipose Tissue Mikrofragmentierung für Zell-Phänotypisierung und Secretome-Charakterisierung

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine verbesserte Methodik zur ADSC-Isolierung, die im Vergleich zur Literatur zu einer enormen zellulären Ausbeute mit Zeitgewinn führt. Diese Studie bietet auch eine einfache Methode, um eine relativ große Anzahl lebensfähiger Zellen nach langfristiger Kryokonservierung zu erhalten.

Technik zur Gewinnung mesenchymaler Stammzellen aus Fettgewebe und stromaler vaskulärer Fraktion Charakterisierung in der Langzeitkryokonservierung

Hier stellen wir ein detailliertes Protokoll vor, das die Verwendung von mikrovaskulären Fragmenten, die aus Nagetier- oder menschlichem Fettgewebe isoliert wurden, als einfachen Ansatz zur Herstellung von funktionellem, vaskularisiertem beigefarbenem Fettgewebe beschreibt.

Dreidimensionale Kultivierung von vaskularisiertem thermogenem Fettgewebe aus mikrovaskulären Fragmenten

Hier stellen wir ein Protokoll vor, das autologe Fettgewebe in verschiedene Fettbestandteile mit unterschiedlichen physikalisch-chemischen Eigenschaften und Funktionen umwandeln kann.

Innovative Fettgewebefraktionierung zur Umwandlung von Fett in spezialisierte Bestandteile

In diesem Videobericht zeigen wir die Anwendung von Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) für interscapulares braunes Fettgewebe bei Mäusen unter aktivierten und depressiven Bedingungen.

Cerenkov Lumineszenz-Imaging von interskapulären braunes Fettgewebe

Erfahren Sie die Mini-Fettabsaugungstechnik zur Probenahme von subkutanem Fettgewebe beim Menschen. Diese kostengünstige, fast schmerzfreie Methode ermöglicht mehrere Biopsien am selben Tag und unterstützt Studien zum Fettstoffwechsel.

Probenahme von subkutanem Fettgewebe beim Menschen mit einer Mini-Fettabsaugungstechnik

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