Name: Ein präklinisches Modell des Belastungshitzeinschlags bei Mäusen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-01T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Erfahren Sie ein standardisiertes präklinisches Modell des Belastungshitzeschlags bei Mäusen zur Untersuchung von Kühlraten, Komorbiditäten und Langzeitfolgen. Diese Methode ermöglicht mechanistische und therapeutische Studien.

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Diese Arbeit wurde vom Verteidigungsministerium W81XWH-15-2-0038 (TLC) und BA180078 (TLC) und der BK and Betty Stevens Endowment (TLC) finanziert. JMA wurde durch finanzielle Hilfe des Königreichs Saudi-Arabien unterstützt. Michelle King war zum Zeitpunkt der Durchführung dieser Studie an der University of Florida. Derzeit ist sie am Gatorade Sports Science Institute, einer Abteilung von PepsiCo R&D, beschäftigt.

Alle Verfahren wurden von der University of Florida IACUC überprüft und genehmigt. C57BL/6J männliche oder weibliche Mäuse, ~4 Monate alt, mit einem Gewicht von 27-34 g bzw. 20-25 g, werden für die Studie verwendet.
1. Chirurgische Implantation des telemetrischen Temperaturüberwachungssystems
<ol><li>Lassen Sie die Tiere bei der Ankunft vom Verkäufer mindestens 1 Woche vor der Operation im Vivarium ruhen, um den Transportstress zu minimieren.</li>
	<li>Gruppen beherbergen die Mäuse (maximal 5 pro Käfig nach lokalen IACUC-Richtlinien) bis zum Tag der Operation für die Implantation von Temperaturtelemetriegeräten. Bringen Sie sie in Standardkäfigen mit 7,25 "(B) x 11,75" (L) x 5" (H) unter, die Maiskolbenbettung enthalten. Halten Sie den Lichtzyklus auf einem 12 x 12-Lichtzyklus (Ein: 7 Uhr; Aus: 19 Uhr) aufrecht. Halten Sie die Gehäusetemperatur bei 20-22 °C und die relative Luftfeuchtigkeit (RH) bei 30%-60%. Stellen Sie die Standard-Chow-Diät und Wasser ad libitum bis zum EHS-Protokoll zur Verfügung. HINWEIS: Die Begründung für die individuelle Unterbringung besteht darin, häufige Kampfverletzungen bei männlichen C57bl/6J-Mäusen zu vermeiden und jeder Maus ausreichend Gelegenheit für spontane Radläufe zu bieten.</li>
	<li>Zur Platzierung der Telemetriegeräte wird die Maus mit Isofluran (4%, 0,4-0,6 l/minO2-Durchfluss) in einer Induktionskammer betäubt. Anschließend wird die Maus über einen Nasenkegel (1,5 %, 0,6 l/min) unter Daueranästhesie gestellt.</li>
	<li>Verwenden Sie Augengleitmittel, wie z. B. eine Tiersalbe, um die Augen des Tieres vor Schäden oder Verletzungen während der Operation zu schützen.</li>
	<li>Um die Operationsstelle vorzubereiten, rasieren Sie den Unterbauch mit kleinen Tierhaarschneidern oder verwenden Sie einen handelsüblichen Haarentferner. Verabreichen Sie während dieser Zeit die erste Dosis subkutanes Buprenorphin (0,1 mg/kg).</li>
	<li>Schrubben Sie den Bereich mit drei Waschungen Povidon-Jod (oder einem ähnlichen keimtötenden Peeling), gefolgt von einer 70% igen Isopropylalkoholspülung (oder sterile Kochsalzlösung je nach lokalen veterinärmedizinischen Anforderungen). Übertragen Sie dann die Maus in den Operationsbereich.</li>
	<li>Verwenden Sie einen Klebevorhang, um die Operationsstelle an der Maus zu isolieren. Machen Sie mit sterilen Instrumenten und aseptischer Technik einen ~ 1 cm langen Schnitt auf der Mittellinie entlang der Linea alba, etwa 0,5 cm vom Rippenrand entfernt. Trennen Sie dann die Haut von der Muskelschicht und machen Sie einen etwas kleineren Schnitt an der Linea alba, achten Sie darauf, den Darm oder die inneren Organe nicht zu beschädigen.</li>
	<li>Sobald die Muskelschicht geöffnet ist, platzieren Sie das sterile Telemeter (Miniatur-wiederverwendbares batterieloses Radiotelemetriegerät; 16,5 x 6,5 mm) in die intraperitoneale Höhle vor den Schwanzadern und Venen und dorsal zu den Verdauungsorganen, damit es frei schweben kann. HINWEIS: Alle Telemeter werden mit Wasser und Seife gereinigt, gründlich gespült und zwischen den Anwendungen mit Ethylenoxid gassterilisiert. Wenn keine Gassterilisation verfügbar ist, wird das Eintauchen in Sterilisationslösungen (gemäß der Empfehlung des Herstellers für Verdünnung und Tauchzeit) akzeptiert, um die Telemeter zu desinfizieren und zu sterilisieren.</li>
	<li>Schließen Sie die Bauchöffnung mit einer sterilen 5-0 resorbierbaren Naht und schließen Sie die Haut mit einem einfachen unterbrochenen Stich mit 5-0 Prolinnaht. HINWEIS: Das Telemeter im Bauchraum schweben zu lassen, ohne es an die Bauchdecke zu binden (eine vom Hersteller empfohlene Methode), hat sich als erfolgreich erwiesen und von den Autoren bevorzugt, um übermäßige Spannungen in der Bauchdecke während der Heilung zu beseitigen. Darüber hinaus hat dies keinen Einfluss auf die Fähigkeit des Empfängers, das Signal vom Sender zu erhalten.</li>
	<li>Legen Sie die Maus in ihren sauberen Käfig mit einem tragbaren Heizkissen unter dem Käfig. Überwachen Sie die Maus alle 15 Minuten während der ersten Stunde der Genesung von der Narkose und kehren Sie dann in die Tierhaltung zurück.</li>
	<li>Versorgen Sie Mäuse während der Genesung alle 12 h für 48 h mit subkutanen Buprenorphin-Injektionen und überwachen Sie weiterhin auf Anzeichen von Stress. Falls verfügbar, langsam freisetzendes Buprenorphin subkutan alle 24 h (1 mg/kg) für 48 h geben. Lassen Sie die Mäuse sich nach der Operation für ~ 2 Wochen erholen, bevor Sie einen freiwilligen Radlauf einführen.</li>
</ol>2. Eingewöhnung: Freiwilliges und erzwungenes Laufen der Räder
<ol><li>Stellen Sie nach der Genesung von der Operation die freiwillig laufenden Räder in den Käfig, um freien Zugang zum Rad zu erhalten. Andere Laufradauswahlen können ebenso effektiv sein, aber stellen Sie sicher, dass sie in die begrenzten verfügbaren Käfiggrößen passen. HINWEIS: Die Laufräder mussten in den Abmessungen leicht reduziert werden, um in einen Standardkäfig zu passen.</li>
	<li>Akklimatisieren Sie die Maus für 2 Wochen an das freiwillige Rad im Käfig. Einmal akklimatisiert, ist die Maus bereit für das Training mit Einarbeitungsverfahren für die zwangsläufigen Laufräder.</li>
	<li>Führen Sie die vier Trainingseinheiten (eins/Tag) in der Umgebungskammer bei Raumtemperatur (~25 °C, 30% relative Luftfeuchtigkeit) durch. HINWEIS: Obwohl dies ideal ist, wurden Mäuse auch erfolgreich in identischen Zwangslaufrädern außerhalb der Kammer trainiert. Mehrere Mäuse können dann gleichzeitig trainiert werden, ohne die Nutzung der Kammer zu beeinträchtigen.</li>
	<li>Um die erste Trainingseinheit zu beginnen, lassen Sie die Maus 15 Minuten lang im modifizierten Laufrad freilaufen, indem Sie den Motorantriebsriemen entfernen oder lösen, damit die Maus die Geschwindigkeit des Rades bestimmen und sich nicht stressig daran gewöhnen kann. HINWEIS: Protokolle können mit Software und Hardware ausgeführt werden, die vom Laufradhersteller bereitgestellt werden, oder sie können durch ein externes programmierbares Netzteil ersetzt werden, das direkt mit dem Radmotor verbunden ist, was die Automatisierung des inkrementellen Übungsprotokolls ermöglicht.</li>
	<li>Kalibrieren Sie das System für jedes Laufrad, um das Verhältnis zwischen der Versorgungsspannung und den Metern/Minuten (m/min) jedes Rades zu bestimmen. HINWEIS: Die erzwungenen Laufräder wurden ebenfalls modifiziert, um den Motor um 15 cm anzuheben, umzukehren und die Riemenscheibe, die das Rad antreibt, auf 5 cm über der Telemetrieempfängerplattform zu bewegen. Dies stellte sicher, dass die Empfängerplattform während des laufenden Protokolls genaue Telemetriedaten ohne Störungen durch den Motor erhielt.</li>
	<li>Nach einer kurzen Ruhezeit (<5 min) leiten Sie das Zwangslaufradprotokoll ein. Starten Sie das Rad mit 2,5 m/min und erhöhen Sie es alle 10 min um 0,3 m/min für insgesamt 1 h, um die erste Stunde des eigentlichen EHS-Versuchs nachzuahmen, jedoch bei Raumtemperatur. Bringen Sie die Maus in ihren Heimkäfig zurück und ermöglichen Sie eine 24-stündige Wiederherstellung. Führen Sie die folgenden drei erzwungenen Laufsitzungen an aufeinanderfolgenden Tagen auf die gleiche Weise durch. Nach Tag 1 entfällt der freilaufende Akklimatisierungsteil.</li>
	<li>Erlauben Sie der Maus 2-3 Tage auswaschen oder sich vom Stress der erzwungenen Laufradübung erholen, aber erlauben Sie der Maus freien Zugang zum freiwilligen Heimkäfigrad. Die Maus ist nun darauf vorbereitet, das EHS-Protokoll zu durchlaufen.</li>
</ol>3. EHS-Protokoll
<ol><li>Stellen Sie die Maus in der Nacht vor dem EHS-Protokoll bei Raumtemperatur (~ 25 °C, ≈30% relative Luftfeuchtigkeit) in die Umgebungskammer, um sich an die Kammer zu gewöhnen.</li>
	<li>Verwenden Sie ein Datenerfassungssystem, um kontinuierliche Tc zu sammeln, gemittelt über 30-s-Intervalle über Nacht.</li>
	<li>Stellen Sie am Morgen des EHS-Protokolls sicher, dass sich die Maus auf oder unter einem normalen Bereich der Tagestemperatur befindet, bevor Sie die Kammertemperatur erhöhen (d. h. 36-37,5 ° C). Dies stellt sicher, dass die Maus kein Fieber hat und während dieser Zeit keinen übermäßigen Stress erlebt hat.</li>
	<li>Sobald die Maus stabil ist und sich in einem Bereich der normalen Ruhekerntemperatur befindet, entfernen Sie das Futter und das Wasser und wiegen Sie das Tier. Schließen Sie die Kammertür und erhöhen Sie die Kammertemperatur auf ein Ziel von 37,5 ° C und 40% -50% relativer Luftfeuchtigkeit oder die gewünschte Umgebungstemperatur undLuftfeuchtigkeit 19. Überprüfen Sie die Temperatur und Luftfeuchtigkeit der Kammer mit einem kalibrierten Temperatur- und Feuchtigkeitsmonitor.</li>
	<li>Umgeben Sie die Kammer mit einem Verdunklungsvorhang, um Licht und Störungen während des Protokolls minimal zu halten. Überwachen Sie die Maus kontinuierlich während des Protokolls über IR-beleuchtete Remote-Kameras. Richten Sie eine zweite Kamera auf den Temperatur- und Feuchtigkeitsmonitor, der sich in der Nähe des Laufrads befindet. Nehmen Sie alle Anpassungen am Regler für den Sollwert der Umgebungskammer vor, um genaue Temperaturmessungen in der Nähe des Tieres zu gewährleisten.</li>
	<li>Sobald die Kammer ihre Zieltemperatur erreicht hat, die von der zweiten Kamera auf dem Temperaturwächter gemessen wurde (dies kann ~30 min dauern), öffnen Sie schnell die Kammertür und legen Sie die Maus in das erzwungene Laufrad.</li>
	<li>Initiieren Sie das erzwungene Laufradprotokoll mit einer Geschwindigkeit von 2,5 m/min und erhöhen Sie die Geschwindigkeit alle 10 minuten um 0,3 m/min, bis die Maus einen Tc von 41 °C erreicht. Sobald die Maus diese Kerntemperatur erreicht hat, lassen Sie die Geschwindigkeit bis zur Symptombegrenzung konstant bleiben, gekennzeichnet durch einen offensichtlichen Bewusstlosigkeitsverlust, einen Rückwärtssturz oder Ohnmacht und die Unfähigkeit, weiter zu laufen oder sich am Rad festzuhalten. Bestätigen Sie diesen Zeitpunkt, wenn die Maus drei Rückwärtsumdrehungen auf dem Rad hat, ohne Anzeichen einer physischen Reaktion. Alternativ können Sie einen humanen Endpunkt gemäß den lokalen IACUC-Regeln identifizieren, um zu bestimmen, wann das Protokoll gestoppt werden muss (z. B. wenn Tc ~ 43 ° C). Dieser Endpunkt liegt bei praktisch allen Mäusen leicht über der Symptombegrenzung.</li>
	<li>Um das Rapid Cooling-Protokoll (R) auszuführen, stoppen Sie das Rad, sobald die Maus die Symptombegrenzung erreicht hat, und entfernen Sie es sofort vom erzwungenen Laufrad. Wiegen Sie die Maus und legen Sie sie zurück in ihren Heimkäfig, um sich bei Raumtemperatur zu erholen. Lassen Sie während dieser Zeit die Kammertür offen und bringen Sie den Inkubator-Sollwert auf Raumtemperatur zurück, damit die Kammer schnell abkühlen kann. Dieses Verfahren führt zu >99% Langzeitüberleben.</li>
	<li>Um eine schwerere (S) EHS-Exposition durchzuführen, halten Sie den Heimkäfig des Tieres während des EHS-Protokolls in der 37,5 °C-Kammer. Wenn das Tier die Symptombegrenzung erreicht, lassen Sie es im Laufrad bleiben, bis es zu Bewusstsein zurückkehrt, wie von der Fernkamera beobachtet (~ 5-9 min).</li>
	<li>Entfernen Sie dann schnell die Maus vom Laufrad und bringen Sie sie direkt in ihren vorgewärmten Käfig zurück, um ein viel langsameres Kühlprofil zu erhalten(Abbildung 1A,rote gestrichelte Linie), wodurch die ehS-hypotherme Phase im Wesentlichen eliminiert wird. Entfernen Sie während dieser Zeit die Filteroberseite aus dem Käfig, um das Gleichgewicht mit der Kammer zu verbessern.</li>
	<li>Verwenden Sie einen auf Raumtemperatur vorgekühlten Erholungskäfig, um ein weniger schweres alternatives Verfahren durchzuführen, das zu einer unterdrückten hypothermen Phase führt, jedoch mit einer Überlebensrate von 100%20.</li>
	<li>Überwachen Sie für das S-Protokoll die Maus während der Wiederherstellung sorgfältig und überprüfen Sie kontinuierlich auf humane Endpunkte. Obwohl es schwierig ist, aus der Ferne auf häufig verwendete humane Endpunkte (z. B. Aufrichtungsreflex) zu testen, beobachten Sie die Mäuse aus der Ferne auf normale Bewegungen während der Genesung wie Pflege, normale Atmung, Lecken usw. Überwachen Sie den Tc während dieser Zeit.</li>
	<li>Es ist unwahrscheinlich, dass sich Mäuse erholen, wenn ihre Kerntemperatur während der Erholungsphase die Richtung ändert und schließlich 40 ° C überschreitet. Beenden Sie zu diesem Zeitpunkt das Experiment und bewerten Sie die Maus auf humane Standardendpunkte.</li>
</ol>

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</ol>

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenzulegen. Alle durchgeführten Arbeiten und alle Unterstützung für dieses Projekt wurden an der University of Florida generiert.

Diese technische Überprüfung zielt darauf ab, Richtlinien für die Leistung eines präklinischen Modells von EHS bei Mäusen bereitzustellen. Detaillierte Schritte und Materialien, die für die Ausführung einer reproduzierbaren EHS-Episode mit unterschiedlichem Schweregrad erforderlich sind, werden bereitgestellt. Wichtig ist, dass das Modell weitgehend die Anzeichen, Symptome und Multiorganfunktionsstörungen nachahmt, die bei menschlichen EHS-Opfern beobachtetwurden 11,19...

Hitzschlag ist gekennzeichnet durch dysfunktion des zentralen Nervensystems und nachfolgende Organschäden bei hyperthermen Probanden1. Es gibt zwei Manifestationen von Hitzschlag. Der klassische Hitzschlag (CHS) betrifft vor allem ältere Bevölkerungsgruppen während Hitzewellen oder Kinder, die an heißen Sommertagen in sonnenexponierten Fahrzeugen zurückgelassen werden1. Ein Belastungshitzschlag (EHS) tritt auf, wenn es nicht möglich ist, während körperlicher Anstrengung angemessen zu thermoregulieren, typischerweise, aber nicht immer, unter hohen Umgebungstemperaturen, was zu neurologischen Symptomen, Hyperthermie und anschließender Multiorganfunktionsstörung und-schädigungführt 2 . EHS tritt bei Freizeit- und Spitzensportlern sowie Militärpersonal und bei Arbeitern mit und ohne gleichzeitige Dehydrierungauf 3,4. Tatsächlich ist EHS die dritthäufigste Todesursache bei Sportlern bei körperlicher Aktivität5. Es ist äußerst schwierig, EHS beim Menschen zu untersuchen, da die Episode tödlich sein oder zu langfristigen negativen gesundheitlichen Folgen führen kann6,7. Daher könnte ein zuverlässiges präklinisches Modell von EHS als wertvolles Instrument dienen, um die Einschränkungen retrospektiver und assoziativer klinischer Beobachtungen bei menschlichen EHS-Opfern zu überwinden. Präklinische Modelle von CHS bei Nagetieren und Schweinen wurden gut charakterisiert8,9,10. Präklinische Modelle von CHS übersetzen sich jedoch aufgrund der einzigartigen Auswirkungen körperlicher Bewegung auf das thermoregulatorische Profil und die angeborene Immunantwort nicht direkt in die EHS-Pathophysiologie11. Darüber hinaus stellten frühere Versuche, präklinische EHS-Modelle bei Nagetieren zu entwickeln, erhebliche Einschränkungen dar, darunter überlagerte Stressreize, die durch elektrischen Schlag induziert wurden, das Einsetzen einer rektalen Sonde und vordefinierte maximale Körperkerntemperaturen mit hohenMortalitätsraten 12,13,14,15,16 die nicht mit den aktuellen epidemiologischen Daten übereinstimmen. Dies stellen erhebliche Einschränkungen dar, die die Dateninterpretation stören und unzuverlässige Biomarker-Indizes liefern können. Daher zielt das Protokoll darauf ab, die Schritte eines standardisierten, hochgradig wiederholbaren und übersetzbaren präklinischen Modells von EHS in Mäusen zu charakterisieren und zu beschreiben, das weitgehend frei von den oben genannten Einschränkungen ist. Anpassungen des Modells, die zu abgestuften physiologischen Ergebnissen von einem mittelschweren bis zu einem tödlichen Hitzschlag führen können, werden beschrieben. Nach Kenntnis der Autoren ist dies das einzige präklinische EHS-Modell mit solchen Eigenschaften, das es ermöglicht, relevante EHS-Forschung hypothesengetrieben zu betreiben11,17,18.

<table><tbody><tr><td>&nbsp; 1080P HD 4 Überwachungskameras 4CH Heimvideo-Überwachungskamerasystem mit 1 TB HDD 2MP Nachtsichtkameras CCTV-Überwachungskit</td><td>LaView</td><td></td><td></td></tr><tr><td>5-0 Coated Vicryl Violet Geflochtenes</td><td>Ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>5-0 Ethilon Nylon-Naht Schwarzes Monofilament</td><td>Ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Selbstklebendes chirurgisches Abdecktuch mit Povidon 12x18</td><td>Jorgensen Labset al.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BK Precision Programmierbare Mehrbereichs-DC-Netzteile Modell 9201</td><td>BK Precision</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DR Instruments&nbsp; Umfassendes Anatomie-Sezierset für Medizinstudenten</td><td>&nbsp; DR Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Energizer Netzteil</td><td>Starr Life Sciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>G2 Emitteret al.</td><td>Starr Life Sciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Layfayette Motorisiertes Radmodell #80840B</td><td>Layfayette</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Patterson Veterinär Isofluran</td><td>Patterson Veterinärplattform</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Empfängeret al.</td><td>Starr Life Sciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Scientific Klimakammer Modell 3911</td><td>ThermoForma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stützräder</td><td>&nbsp; Columbus Inst.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

ein präklinisches modell des belastungshitzeinschlags bei mäusen

A Preclinical Model of Exertional Heat Stroke in Mice

Hitzschlag ist die schwerste Manifestation von hitzebedingten Erkrankungen. Klassischer Hitzschlag (CHS), auch bekannt als passiver Hitzschlag, tritt in Ruhe auf, während exertional hitzschlag (EHS) während körperlicher Aktivität auftritt. EHS unterscheidet sich von CHS in Ätiologie, klinischer Präsentation und Folgeerscheinungen von Multiorgan-Dysfunktion. Bis vor kurzem waren nur Modelle von CHS gut etabliert. Dieses Protokoll zielt darauf ab, Richtlinien für ein verfeinertes präklinisches Mausmodell von EHS bereitzustellen, das frei von wichtigen einschränkenden Faktoren wie der Verwendung von Anästhesie, Zurückhaltung, rektalen Sonden oder Elektrischem Schlag ist. Männliche und weibliche C57Bl/6-Mäuse, die mit telemetrischen Kerntemperatursonden (Tc) instrumentiert wurden, wurden in diesem Modell verwendet. Um sich mit dem Laufmodus vertraut zu machen, durchlaufen Mäuse ein 3-wöchiges Training mit freiwilligen und erzwungenen Laufrädern. Danach laufen Mäuse auf einem erzwungenen Rad in einer Klimakammer, die auf 37,5 °C und 40%-50% relative Luftfeuchtigkeit (RH) eingestellt ist, bis sie eine Symptombegrenzung (z. B. Bewusstlosigkeit) bei Tc von 42,1-42,5 °C zeigen, obwohl bei Kammertemperaturen zwischen 34,5-39,5 °C und einer Luftfeuchtigkeit zwischen 30%-90% geeignete Ergebnisse erzielt werden können. Abhängig von der gewünschten Schwere werden Mäuse sofort aus der Kammer entfernt, um sich bei Umgebungstemperatur zu erholen, oder bleiben länger in der beheizten Kammer, was zu einer schwereren Exposition und einer höheren Mortalitätsrate führt. Die Ergebnisse werden mit scheingepassten Übungskontrollen (EXC) und/oder naiven Kontrollen (NC) verglichen. Das Modell spiegelt viele der pathophysiologischen Ergebnisse wider, die bei menschlichen EHS beobachtet wurden, einschließlich Bewusstlosigkeit, schwerer Hyperthermie, Multiorganschäden sowie entzündlicher Zytokinfreisetzung und akuter Phasenreaktionen des Immunsystems. Dieses Modell ist ideal für die hypothesengetriebene Forschung, um präventive und therapeutische Strategien zu testen, die den Beginn von EHS verzögern oder den Multiorganschaden reduzieren können, der diese Manifestation charakterisiert.

Die typischen thermoregulatorischen Profile während der Gesamtheit des EHS-Protokolls und der frühen Wiederherstellung einer Maus sind in Abbildung 1Adargestellt. Dieses Profil umfasst vier verschiedene Phasen, die als Kammererwärmungsstufe, inkrementelle Übungsstufe, Steady-State-Übungsstufe und Erholungsphase entweder durch eine schnelle Abkühlung (R) oder eine schwere (S) Methode17definiert werden können. Zu den wichtigsten thermoregulatorischen Ergebnissen gehören...

Das Protokoll beschreibt die Entwicklung eines standardisierten, wiederholbaren, präklinischen Modells des Belastungshitzschlags (EHS) bei Mäusen, die frei von nachteiligen äußeren Reizen wie Elektroschocks sind. Das Modell bietet eine Plattform für mechanistische, präventive und therapeutische Studien.

Ein präklinisches Modell des Belastungshitzeinschlags bei Mäusen

Heat stroke is the most severe manifestation of heat-related illnesses. Classic heat stroke (CHS), also known as passive heat stroke, occurs at rest, ...

Bisher waren nur passive Modelle des Hitzschlags gut etabliert. Dieses Modell des Belastungshitzschlags ist frei von großen Einschränkungen und ahmt die menschliche Pathophysiologie genauer nach. Es ist nicht möglich, Hitzschlag beim Menschen effektiv zu untersuchen, da es sich um eine lebensbedrohliche Erkrankung handelt.Dieses präklinische Modell behält die klinischen Merkmale des menschlichen Hitzschlags bei. Diese Technik hilft, die Auswirkungen der Abkühlgeschwindigkeit auf die Erholung von einem Anstrengendhitzschlag, Komorbiditäten aus der Einnahme von Medikamenten sowie die langfristigen Folgen einer Hitzschlagexposition zu testen. Jamal Alzahrani, ein leitender Doktorand aus Dr. Clantons Labor, wird das Verfahren demonstrieren.Verwenden Sie nach der Betäubung der Maus Augengleitmittel wie die Tiersalbe, um die Augen des Tieres während der Operation vor Schäden oder Verletzungen zu schützen. Um die Operationsstelle vorzubereiten, rasieren Sie den Unterbauch mit kleinen Tierhaarschneidern oder einem handelsüblichen Haarentferner. Verabreichen Sie die erste Dosis subkutan 0,1 Milligramm pro Kilogramm Buprenorphin.Schrubben Sie den Bereich mit drei Wäschen Von Povidon-Jod oder

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Ein leistungsfähiges Modell für perioperative und Intensivmedizin akute Nierenversagen wird vorgestellt. Mit ganzen Körper Hypoperfusion durch Herzstillstand ist es möglich, fast replizieren die histologische und funktionelle Veränderungen der klinischen AKI induziert.

Normothermen Herzstillstand und Herz-Lungen: Ein Maus-Modell der Ischämie-Reperfusionsschaden

Dieser Beitrag beschreibt ein Protokoll für die Ganzkörper-Hyperthermie bei Mäusen, die Fieber ähnlichen Bedingungen zu stimulieren bis zu 12-24 Stunden kann.

Protokoll für Long Duration Ganzkörper-Hyperthermie in Mäuse

In diesem Video beschreiben wir einen chirurgischen Eingriff, bei dem ein Temperaturtelemetriegerät in ein Mausmodell implantiert wird, um kontinuierlich seine Körperkerntemperatur zu messen.

Chirurgische Implantation eines telemetrischen Temperaturüberwachungssystems im Mausmodell: Ein chirurgischer Eingriff zur Implantation eines telemetrischen Temperaturgeräts zur Messung der Körperkerntemperatur der Maus

In diesem Video beschreiben wir ein Schritt-für-Schritt-Protokoll zur Untersuchung von Belastungs-Hitzschlag (EHS) in einem Mausmodell.

Belastungs-Hitzschlag-Mausmodell: Ein Protokoll zur Untersuchung der Mechanismen, die dem Belastungs-Hitzschlag zugrunde liegen

Dieses Video zeigt das Verfahren zur Induktion hitzeinduzierter Anfälle bei einer transgenen Maus mit epilepsiebedingten Genmutationen, indem die Körpertemperatur in einer kontrollierten Kammer allmählich erhöht wird. Dieses Protokoll wird verwendet, um Anfallsmechanismen und mögliche Therapien für Epilepsie zu untersuchen.

Auslösen und Überwachen von hitzeinduzierten Anfällen in einem transgenen Mausmodell

Eine Methode zur Beurteilung der Belastungsausdauer bei Labormäusen ohne die Verwendung eines Schockgitters wird demonstriert. Diese Methode ist eine humane Verfeinerung, die die verwirrenden Effekte von Stress auf experimentelle Parameter verringern kann.

Beurteilung der Murine sportliche Ausdauer, ohne die Verwendung eines Shock Grid: Eine Alternative zur Zwangsübung

High-Intensity-Training in Hypoxie ist ein Protokoll, die potenziell vorteilhaft bei einigen Patienten vaskuläre Anpassungen zu induzieren und Athleten zu verbessern Sprint Fähigkeit wiederholt bewährt hat. Hier testen wir die Machbarkeit der Ausbildung Mäuse verwenden, das Protokoll und die vaskulären Anpassungen mit ex-Vivo Gefäßfunktion Bewertung zu identifizieren.

Supramaximalen hypoxischer Intensität und Gefäßfunktion Bewertung bei Mäusen

Ziel der Methode ist es, in Mausmodellen auf Hyperthermie oder hitzeinduzierte Anfälle zu screenen. Das Protokoll beschreibt die Verwendung einer speziell angefertigten Kammer mit kontinuierlicher Überwachung der Körpertemperatur, um festzustellen, ob eine erhöhte Körpertemperatur zu Anfällen führt.

Ein Verhaltensbildschirm für hitzeinduzierte Anfälle in Mausmodellen der Epilepsie

Dieses Mausmodell kombiniert einen septischen Insult mit dem Ausfall der Hintergliedmaßenmuskulatur, um das bettlägerige Merkmal des typischen septischen Patienten zu rekapitulieren. Das Modell stellt eine deutliche Abkehr von früheren Modellen zur Untersuchung von Muskelfunktionsstörungen bei Sepsis dar und ist ein reproduzierbarer Ansatz zur Behandlung dieser Erkrankung.

Ein präklinisches Modell der Sepsis-induzierten Myopathie mit Nichtanwendung bei Mäusen

Filamentous Verschluss der mittleren Hirnarterie ist ein gemeinsames Modell für die Untersuchung einen ischämischen Schlaganfall bei Mäusen.

Modeling Stroke in Mice - Middle Zerebralarterie mit dem Filament-Modell

Erfahren Sie ein standardisiertes präklinisches Modell des Belastungshitzeschlags bei Mäusen zur Untersuchung von Kühlraten, Komorbiditäten und Langzeitfolgen. Diese Methode ermöglicht mechanistische und therapeutische Studien.

Ein präklinisches Modell des Belastungshitzeinschlags bei Mäusen

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