26. Oktober 2021
Diese Arbeit beschreibt ein Standardprotokoll für mechanische und thermische quantitative sensorische Tests zur Beurteilung des somatosensorischen Systems bei Hunden. Die sensorischen Schwellenwerte werden mit einem elektronischen von-Frey-Anästhesiometer und einem Druckalgometer und einer Heißkontaktthermode gemessen.
Dieses Protokoll zur Bewertung sensorischer Schwellenwerte bei Hunden mittels quantitativer sensorischer Tests oder QST wird dazu beitragen, Studien zu standardisieren und wertvolle Vergleiche zwischen verschiedenen Studien zu ermöglichen. Diese Technik bietet eine nicht-invasive Methode zur Messung der sensorischen Schwellen bei Hunden. Unser Protokoll hilft Forschern, Best Practices zu entwickeln, um genaue und konsistente Daten zu erhalten.
Dieses Protokoll kann Einblicke in die Mechanismen des Schmerzempfindens bei Hunden geben, einschließlich nach Operationen und bei Krankheiten, die mit chronischen Schmerzzuständen verbunden sind. Der wichtigste Aspekt dieser Technik ist das Bewusstsein für das Verhalten von Hunden. Um sichere und genaue Tests zu gewährleisten, müssen alle Beteiligten auf das Verhalten und die Angstzustände des Hundes achten.
Beginnen Sie mit der Einrichtung des Instruments, indem Sie vorsichtig eine starre 0,9 Millimeter Von-Frey-Spitze auf die Wägezelle aufbringen und so sicherstellen, dass die Wägezelle sicher in das Handstück eingeschraubt ist. Verbinden Sie dann das Kabel vom Handstück über den M0-Kanal mit dem Aufnahmegerät. Schalten Sie als Nächstes das Aufnahmegerät ein und drücken Sie die Max-Taste, um die maximale Kraft aufzuzeichnen und anzuzeigen, die erreicht wird, wenn der Hund auf den angewendeten Reiz reagiert.
Stellen Sie das Gerät auf Null, indem Sie die CLR-Taste drücken. Um die Daten zu sammeln und die Schwellenwerte zu messen, weisen Sie den Hund an, sich hinzulegen und ihm dann in die seitliche Liegeposition zu helfen. Wenden Sie minimale bis mäßige Zurückhaltung an, um den Hund in der Position und relativ ruhig zu halten.
Bieten Sie dem zu testenden Hund eine sanfte manuelle Unterstützung, um das Glied vom Boden fernzuhalten, und bieten Sie eine stabile Unterlage, gegen die Kraft ausgeübt werden kann, ohne den Hund daran zu hindern, das Glied zurückzuziehen. Sobald der Hund ruhig und entspannt ist und das Glied bei 70 % Streckung getestet wird, wenden Sie den Reiz einmal an. Platzieren Sie die Von-Frey-Spitze senkrecht zur Haut des zu testenden Bereichs.
Wenn der Hund durch das Gefühl der Von-Frey-Spitze auf der Haut Reflexbewegungen zeigt, lassen Sie den Hund die Gliedmaße wieder entspannen, bevor Sie die Von-Frey-Spitze erneut auftragen. Wenn die Haut keine Reflexbewegungen verursacht, nehmen Sie eine Messung mit dem Von-Frey-Tip vor. Wenden Sie mit der Von-Frey-Spitze bei 20 Gramm pro Sekunde stetig zunehmende Kraft an, bis der Hund das Glied zurückzieht, vokalisiert.
dreht sich um, um den Reiz zu betrachten, oder zeigt andere Bewegungen oder Verhaltensreaktionen, die auf die bewusste Wahrnehmung des Reizes hinweisen. Entfernen Sie den Reiz, wenn der Hund die Gliedmaße zurückzieht oder die maximale Kraft erreicht ist, und zeichnen Sie die maximal ausgeübte Kraft auf, die auf dem Aufzeichnungsgerät angezeigt wird. Wiederholen Sie die Messungen für fünf Versuche, wobei zwischen jeder Messung eine Minute liegt, wenn der Hund in der Seitenlage bleibt, wenn er relativ ruhig und entspannt ohne oder mit minimaler Zurückhaltung bleibt.
Stellen Sie das Gerät zwischen den einzelnen Schritten auf Null, indem Sie die CLR-Taste drücken. Notieren Sie als Nächstes eine Machbarkeitsbewertung von null bis fünf, um die Einfachheit der Datenerfassung anzugeben. Geben Sie dem Hund eine Pause von fünf Minuten, bevor Sie mit den Messungen mit dem stumpfen Druckalgometer beginnen.
Achten Sie beim Einrichten des Instruments darauf, dass die kleine stumpfe Sonde fest in das Gerät eingeschraubt ist. Schalten Sie dann das Aufnahmegerät ein und drücken Sie die Max-Taste, um fortzufahren, wenn Sie auf dem Bildschirm dazu aufgefordert werden. Drücken Sie die Einheitentaste, bis die Einheit oben auf dem Bildschirm in Gramm angezeigt wird, und drücken Sie die Nulltaste, um das Gerät auf Null zu setzen.
Legen Sie dann den Hund in die Seitenlage und bereiten Sie ihn vor, um die Schwellenwerte wie zuvor erwähnt zu messen. Platzieren Sie die stumpfe Sonde senkrecht zur Haut des zu testenden Bereichs, um mit der Sonde eine stetig zunehmende Kraft von 20 Gramm pro Sekunde auszuüben, bis der Hund Verhaltensreaktionen zeigt, die auf die bewusste Wahrnehmung des Reizes hinweisen. Entfernen Sie den Reiz, wenn der Hund die Gliedmaße zurückzieht oder die maximale Kraft erreicht ist.
Nachdem Sie die maximal aufgebrachte Kraft mit dem Aufzeichnungsgerät aufgezeichnet haben, wiederholen Sie die Messungen für insgesamt fünf Versuche. Lassen Sie den Hund in der Seitenlage bleiben, um zu sitzen, zu stehen oder sich im QST-Raum zu bewegen, um während des Intervalls zwischen den Versuchen bequem zu bleiben. Setzen Sie dann den Hund vor der anschließenden Messung in die Seitenlage.
Notieren Sie eine Machbarkeitsbewertung von null bis fünf, um anzugeben, wie einfach die Daten gesammelt wurden. Geben Sie dem Hund eine Pause von fünf Minuten, bevor Sie mit der Messung mit der heißen Wärmesonde beginnen. Bevor Sie mit dem Experiment beginnen, bereiten Sie den Hund wie zuvor beschrieben vor.
Tragen Sie dann die Thermode auf die Haut des zu testenden Bereichs auf und klicken Sie auf die Schaltfläche Start in der unteren linken Ecke der Registerkarte Test, um den Test zu starten. Wenn der Hund Bewegungen oder Verhaltensreaktionen zeigt, die auf die bewusste Wahrnehmung des Reizes hinweisen, oder wenn die maximale Latenz erreicht ist, entfernen Sie die Thermode und stoppen Sie gleichzeitig die Stoppuhr. Notieren Sie die Latenz zum Abheben.
Wiederholen Sie die Messungen für insgesamt fünf Versuche, indem Sie zuerst auf die Stopp-Schaltfläche und dann zwischen den einzelnen Messungen auf die Vortest-Schaltfläche klicken, um die Erwärmung der Thermode zu stoppen. Auf diese Weise kann die Software die Thermode neu kalibrieren, um sich auf die nächste Anwendung vorzubereiten. Notieren Sie eine Machbarkeitsbewertung von null bis fünf, um anzugeben, wie einfach die Daten gesammelt wurden.
Die repräsentative Analyse fasst die mechanischen und heißthermischen QST-Daten einer Gruppe gesunder, schmerzfreier Hunde zusammen. Die Daten der sensorischen Schwellenmessungen des elektronischen Von-Frey-Ästhesiometers zeigten keinen signifikanten Einfluss des Körpergewichts auf die sensorischen Schwellen. Ein ähnlicher Einfluss der Körpergewichte wurde in den Daten von sensorischen Schwellen von stumpfen Druckalgometern festgestellt.
Auf der anderen Seite zeigten die Daten, die für die sensorische Latenz der heißen Thermosonde gesammelt wurden, einen signifikanten Einfluss des Körpergewichts auf die sensorische Latenz. Der Gesamtdurchschnitt, die Standardabweichung und der Bereich der sensorischen Schwellenwerte für die mechanische und heiße thermische QST wurden in der gleichen Gruppe gesunder schmerzfreier Hunde zusammengefasst. Dies liefert Referenzwerte für zukünftige Forscher, die diese Techniken anwenden: Es ist am wichtigsten, die Verhaltensreaktion des Hundes zuverlässig zu identifizieren, die auf die bewusste Wahrnehmung des Reizes hinweist, die bei verschiedenen Hunden unterschiedlich aussehen kann.
Zusätzlich zu quantitativen sensorischen Tests kann das Sammeln von Verhaltensinformationen durch validierte Besitzerfragebögen und emotionale Reaktivitätstests zu einer umfassenden Beurteilung des affektiven Zustands des Hundes beitragen.
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Diese Studie stellt einen Standardprotokoll für die quantitative sensorische Testung (QST) bei Hunden vor, um das somatosensorische System mithilfe mechanischer und thermischer Hitzeverfahren zu evaluieren. Durch den Einsatz von Werkzeugen wie dem elektronischen von-Frey-Anästhesiometer und dem Druckalgometer zielt das Protokoll darauf ab, die Bewertungen zu standardisieren, sodass Vergleiche zwischen verschiedenen Studien möglich werden.
Die quantitative sensorische Testung (QST) bei Hunden bietet einen standardisierten, nichtinvasiven Ansatz zur Beurteilung der somatosensorischen Funktion und unterstützt damit translationsorientierte Schmerzforschung sowie die Entwicklung vergleichender Modelle. Die Etablierung referenzieller sensorischer Schwellenwerte und verhaltensbasierter Endpunkte ermöglicht eine präzisere präklinische Bewertung analgetischer Wirkstoffkandidaten und eine mechanistische Risikominimierung in tiermedizinischen und vergleichenden neurowissenschaftlichen Entwicklungsprozessen. Standardisierte QST-Protokolle fördern die Vergleichbarkeit von Daten über verschiedene Studien und Standorte hinweg und stärken so die Entscheidungsfindung in der frühen Entdeckungsforschung und in der translationsorientierten Forschung.
QST ist in die Entdeckungs- bis präklinische Abfolge als funktioneller Endpunkt für die Zielvalidierung, die Optimierung von Leitsubstanzen und die Entwicklung translationaler Biomarker in der Pipeline für Schmerz- und Sinnesstörungen integriert.